每日一菌之分枝杆菌
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每日一菌之分枝杆菌
小编正式开启每日奉献一菌的编辑模式，不要离开，总有一株菌是您希望了解的~哦，对了，据说法国生物梅里埃公司有一款小型仪器适用于分枝杆菌抗酸染色与荧光染色，嘘，小编也只是听说啦~ 分枝杆菌分枝杆菌属是一类细长或略带弯曲、为数众多（包括54个种）呈分支状生长的需氧杆菌。因其繁殖时呈分支状生长故称分枝杆菌。本属细菌的主要特点是细胞壁含有大量脂类，可占其干重的60%，这与其染色性、抵抗力、致病性等密切相关。一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后，能抵抗3%盐酸酒精的脱色作用，故又称抗酸杆菌。需氧生长，无鞭毛，无芽胞和荚膜。引起的疾病均为慢性，有肉芽肿病变的炎症特点。　　分枝杆菌的种类较多，包括结核分枝杆菌、非典型分枝杆菌和麻风分枝杆菌。　　一、结核分枝杆菌　　结核分枝杆菌简称结核杆菌，是引起人和动物结核病的病原菌。目前已知在我国引起人类结核病的主要有人型和牛型结核分枝杆菌。　　（一）生物学特性　　1.形态与染色：结核分枝杆菌为细长或略带弯曲的杆菌，其大小约（1～4）μm×0.4μm。在培养基中可呈球状或丝状，陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝状。抗酸染色时菌体呈红色。显微镜下常堆积成团、成束，排列无序，也有呈链状、索状者。革兰染色阳性，既往在组织中曾发现革兰阳性的非抗酸颗粒，接种动物可产生典型的结核病变，后被称为Much颗粒。金胺“0”等染色，在荧光显微镜下菌体可发生荧光。　　2.培养特性：本菌专性需氧，在无氧条件下迅速死亡，在5%～10%C02环境中可刺激其生长。烛缸不适合本菌培养，需用二氧化碳培养箱。培养温度适应范围较大，35～40℃均可生长，最适温度为35～37℃。最适pH为6.5～6.8。兼性胞内寄生菌，在细胞内外均可发育繁殖，强毒株可长期生存于巨噬细胞内。生长时还需适当的湿度。本菌生长缓慢，最快的分裂速度为18h一代。　　在固体培养基上，一般需2～6周才能长出菌落。菌落呈干燥颗粒状，不透明，乳白色或米黄色，表面呈皱纹状，形似菜花。　　在液体培养基中生长较快，多为表面生长，形成菌膜，且干燥易碎而沉于管底。此种特性与菌体的疏水性有关。有毒力菌株在液体培养基中可呈索状生长，无毒株则无此现象。　　结核分枝杆菌营养要求较高，必须在血清、卵黄、马铃薯、甘油以及某些无机盐类的特殊培养基（罗氏培养基）上才能生长。但经多次传代或长期保存的菌种，也能在营养较简单的培养基中生长。　　据报道少量铁质可促进结核分枝杆菌生长，铁质可使细菌产生分枝杆菌生长素。选择培养基加有抗微生物药物，以抑制标本中杂菌、真菌等污染菌的生长。常用的选择剂有结晶紫、孔雀绿、青霉素、萘啶酸、林可霉素、多粘菌素B等。　　3.生化反应：各型结核杆菌均不发酵糖类，能产生过氧化氢酶，耐热触酶试验、聚山梨酯-80水解试验和耐热磷酸酶试验均为阴性，脲酶试验和中性红试验均为阳性。人型结核分枝杆菌烟酸试验、硝酸盐还原和烟酰胺酶试验均为阳性，借此可与牛型结核分枝杆菌鉴别。　　4.抵抗力：对酒精敏感。　　5.变异性：形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异。　　毒力变异：卡介苗（BCG）——将有毒的牛型结核分枝杆菌培养于含有甘油、胆汁、马铃薯的培养基中经13年传种230代，获得减毒菌株，再接种动物，不能致病而使其获得免疫力。用于预防结核病。　　（二）临床意义　　1.致病性：该菌不产生内毒素和外毒素和侵袭性酶。可在细胞内、外生长与大量繁殖，致病物质主要是荚膜、脂质、蛋白质。结核分枝杆菌主要通过呼吸道、消化道和受损伤的皮肤侵入易感机体，引起多种组织器官的结核病，其中以通过呼吸道引起的肺结核最多见。肺部感染可分为原发性感染和继发性感染。肺外感染可发生在脑、肾、肠、及腹膜等处。机体对菌体成分和其代谢产物引起免疫损伤以及变态反应，从而导致一系列组织学上的病理变化。（机理）　　2.Koch现象：机体对结核分枝杆菌的特异性免疫和迟发型超敏反应同时存在。结核的特异性免疫是通过结核分枝杆菌感染后所产生，试验证明，将有毒结核分枝杆菌纯培养物初次接种于健康豚鼠，不产生速发型过敏反应，而经10～14d，局部逐渐形成肿块，继而坏死，溃疡，直至动物死亡。若在8～12周之前给动物接种减毒或小量结核分枝杆菌，第二次接种时则局部反应提前，于2～3d内发生红肿硬结，后有溃疡但很快趋于痊愈。此现象为Koch在1891年观察到的，故称为Koch现象。免疫性和迟发型超敏反应由不同的T细胞亚群介导。　　3.结核菌素试验：利用Ⅳ型变态反应的原理，检测机体是否感染过结核杆菌。本实验对婴幼儿结核病的诊断有意义。　　（三）微生物学检验　　1.标本采集：根据感染部位的不同，可采集不同标本。结核患者各感染部位的标本中大多都混有其他细菌，为此应采取能抑制污染菌的方法。若作分离培养，必须使用灭菌容器，患者应停药1～2天后再采集标本。可采集痰、尿、粪便、胃液、胸水、腹水、脑脊液、关节液、脓液等。　　2.检验方法　　（1）涂片检查　　直接涂片包括：　　1）薄涂片：挑取痰或其他处理过的标本约0.01ml，涂沫于载玻片上，用萋-尼（热染法）或Kinyoun（冷染法）抗酸染色，油镜镜检，报告方法：-：全视野（或100个视野）未找到抗酸菌；+：全视野发现3～9个；++：全视野发现10～99个；+++：每视野发现1～9个；++++：每视野发现10个以上（全视野发现1～2个时报告抗酸菌的个数）。　　2）厚涂片：取标本0.1ml，涂片，抗酸染色、镜检，报告方法同上。　　3）集菌涂片：主要方法有沉淀集菌法和漂浮集菌法。　　4）荧光显微镜检查法：制片同前。用金铵“O”染色，在荧光显微镜下分枝杆菌可发出荧光。　　（2）分离培养　　1）固体培养法：结核分枝杆菌的分离培养对于结核病的诊断、疗效观察及抗结核药物的研究均具有重要意义。培养前针对标本应做适当的前处理，如痰可做4%H2S04或4%NaOH处理20～30min，除去杂菌再接种于罗氏培养基，37℃5%～10%C02培养，定时观察，至4～8周。此方法可准确诊断结核杆菌。　　2）液体培养法：Bactec-460半自动培养方法，Bact，Vitck-3D，全自动快速培养系统。　　3）噬菌体法。　　（3）基因快速诊断：PCR反向膜探针杂交，DNA探针，16s rRNA基因序列测定，高效液相色谱（HPLC）监测分枝菌酸。简便快速、灵敏度高、特异性强。但需注意实验器材的污染问题，以免出现假阳性。　　（4）耐药性：结核杆菌对多种抗结核药物产生耐药性，对利福平耐药是由rpoB的基因突变，链霉素耐药是和编码核糖体S12蛋白的rpsl基因发生突变以及编码16SrRNA的rrs基因发生突变，异烟肼的耐药与过氧化氢酶和过氧化物酶的失活有关。　　（四）治疗原则　　利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素为第一线药物。利福平与异烟肼合用可以减少耐药的产生。对于严重感染，可用吡嗪酰胺与利福平及异烟肼联合使用。　　二、非典型（非结核）分枝杆菌　　分枝杆菌属中除结核杆菌和麻风杆菌以外，均称为非结核分枝杆菌或非典型分枝杆菌。因其染色性同样具有抗酸性亦称非结核抗酸菌，其中有14～17个非典菌种能使人致病，可侵犯全身脏器和组织，以肺最常见，其临床症状、X线所见很难与肺结核病区别，而大多数非典菌对主要抗结核药耐药，故该菌的感染和发病已成为流行病学和临床上的主要课题，与发达国家一样，我国近年来发现率也有增高趋势。以第Ⅲ群鸟-胞内分枝杆菌和第Ⅳ群偶发分枝杆菌及龟分枝杆菌为多。　　三、麻风分枝杆菌　　麻风分枝杆菌（M Leprae）简称麻风杆菌，是麻风病的病原菌。首先由Han-senl937年从麻风病人组织中发现。麻风分枝杆菌亦为抗酸杆菌，但较结核杆菌短而粗。抗酸染色着色均匀，呈束状或团状排列。为典型的胞内寄生菌，该菌所在的细胞胞质呈泡沫状称麻风细胞。用药后细菌可断裂为颗粒状，链状等，着色不均匀，叫不完整染色菌。革兰阳性无动力、无荚膜和芽胞。　　麻风分枝杆菌是麻风的病原菌，麻风是一种慢性传染病，早期主要损害皮肤、黏膜和神经末梢，晚期可侵犯深部组织和器官，此菌尚未人工培养成功，已用犰狳建立良好的动物模型。人类是麻风分枝杆菌的唯一宿主，也是唯一传染源。本病在世界各地均有流行，尤以第三世界较为广泛。　　麻风病根据机体的免疫、病理变化和临床表现可将多数患者分为瘤型，结核样型和界线类综合征。　　治疗原则：早发现，早治疗。治疗药物主要有砜类、利福平、氯苯吩嗪及丙硫异烟胺。一般采用二或三种药物联合治疗。麻风病目前尚无特异性预防方法。
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肺结核患者痰标本分枝杆菌培养方法分析
第５ 卷 第０ ２ 期　
人 工破 膜 引产 时不要 行 剥 膜 术 ，因为 剥 膜 有可 能 损 伤 颈　 看 管 。掌握 剖 宫 产 术 的施 行 指 征 ，手 术 切 开子 宫 后 及 时　 管 内及 子 宫 下 段 的 血 管 ，破 膜 后 羊 水 直 接 接 触 受 损 静　 吸 出 羊水 ，特 别 要避 免羊 水 进 入创 口 内开放 的血 窦 内 ， 　 脉 ，在
宫缩 增 强 时容 易 使 羊 水进 入 母 血 循 环 。严 格 掌 握　 放 弃 高 、 中位 产 钳及 创 伤 性 阴道 手 术 产 ，避 免 宫 颈及 产　
缩 宫素 引产 、催产 的指 征 ，强调 采 用低 浓度 ，需 有 专 人　 道裂 伤 。 　
参考文献　 ［ １ ］乐杰 ． 妇 产科 学 ［ Ｍ ］． ６版 ． 北京 ：人 民卫生 出版 社 ，２ ０ ０ ３ ：２ ２ ７ ― ２ ３ ０ 　
［ ２ ］曹泽毅 ． 中华妇产科 学 ［ Ｍ ］． ２ 版． 北京：人 民卫生版社 ，２ ０ ０ ４ ：８ ４ ７ ． 　
肺 结 核 患者痰 标 本 分 枝杆 菌培 养 方法分 析　 ｆ 闰晓琳 Ｉ 　 黑龙江省中 医研究所 ，黑龙江 哈尔滨 １ ５ ０ ０ ３ ６ 　
【 摘要 】 　 目的 探讨肺结核患者痰标本 中分枝杆茵培养方法的临床效果。 　 方法 对 ６ ０例肺 结核 患者痰 标本进 行检 测 。 　
结果 快速 培 养法检 测 的 阳性 ２ ３ 例 ，阳性 率 ３ ８ ． ３ ３ ％。 　
结论 痰分枝杆菌培养抗酸杆菌鉴定主要用于结核分枝杆菌感染症的诊断，病原学的分 离、鉴定和药敏试验。 　
【 关键词 】 肺结核 ； 分枝杆茵 ； 痰培养　 【 中图分类号 】 Ｒ５ ２ １【 文献标识码 】 Ｂ 【 文章编号 】 １ ６ ７ ４ － ９ ３ １ ６（ ２ ０ １ ４ ） ０ ２ ― ０ ０ １ ７ ― ０ ２ 　 Ｄ０Ｉ：１ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ Ｊ ． Ｉ Ｓ Ｓ Ｎ． １ ６ ７ ４ － ９ ３ １ ６ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ２ ． ０ ０ ９ 　
肺 结 核 是 结 核 分 枝 杆 菌 引 起 的肺 部 慢 性 传 染 性 疾　
肺 结 核 患者 ６ ０ 例 痰标 本 均 来 自本 院住 院 患者 。其 中 　 男３ ８ 例 ，女２ ２ 例 ，年 龄 ８ ～ ８ ３ 岁 ，平均 ３ ４ 岁。 　 １ ． ２痰 标本 前处 理　 （１） 酸 处 理 法 ： 用 于 碱 性 Ｌ． Ｊ 培 养 基 。 取 痰　
病 。结 核 菌 属分 枝 杆 菌属 ，对 人 类致 病 主 要 是 人型 菌 ， 　 其 次 为 牛 型菌 ，具 有 抗 酸染 色 的 特性 。结 核 菌 素试 验 是　
判 断 机 体是 否 感 染 过 结核 分 枝 杆菌 的主 要 手 段 ，结 核 菌　
素 强 阳性 反 应 提 示 机 体 处 于 结核 超敏 感 状 态 … 。选 取　 标 本 数 毫 升 ，根 据 黏 稠 度 的 不 同 ，加 入 ２ ～ ４倍 量 的　 ％～ ４ ％Ｈ 　 ２ Ｓ Ｏ４ ，振 荡 ，混 匀 ，放 室 温 处 理 ２ ０ 　 ｍｉ ｎ，其　 ２ ０ 　 １ 　 ２ 年６ 月～ ２ ０ 　 ｌ 　 ３ 年６ 月６ ０ 例 肺 结 核患 者 痰 标 本进 行 快 速　 ２
培养，系统检测提高结核分枝杆菌的检出率。 　
间振 荡 ２ ～ ３ 次 ，促 进 液 化 。 （ ２）碱 处 理 法 ：用 于 酸 性　
对 102 例培养涂阳的结核痰液标本和 45 例非结核感染者的痰标本,应用荧光定量 PCR 法、痰 涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌。 结果 荧光定量 PCR、抗酸染色法...结果 256 例痰阳性 菌株经罗氏培养, 人型分枝杆菌 247 株(96.48%), 牛型...1. 2. 2 方法 采集患者清晨未服用抗结核药物, 漱口后深部咳嗽出的痰为标本...2 结果 肺结核病人痰结核菌培养阳性的标本 135 株中,人结核分枝杆菌 126 株,为 93.3%;牛分枝杆菌 2 株,为 1.5%;非典型分枝杆菌 7 株,为 5.2%。 见表...咳痰患者的痰 标本进行 PCR 扩增及 ABI―7300 仪器荧光检测结核分枝杆菌 DNA ...方法为结核分枝杆菌的痰涂片和改良罗氏培养法, 然而, 涂片的阳 性率低、培养...用痰标本培养结核分枝杆菌,最好选用哪种前处理液处理标本 A.0.5%硫酸B.1%硫酸C.2%硫酸D.4%硫酸E.0.5%氢氧化钠_答案解析_2016年_一模/二模/三模/联考_...用痰标本培养结核分枝杆菌,最好选用哪种前处理液处理标本 A.0.5%硫酸 B.1%硫酸C.2%硫酸 D.4%硫酸E.0.5%氢氧化钠 _答案解析_2016年_一模/二模/三模/...肺结核患者痰标本不合格原因分析及对策 姚小红 田芮华 西安市结核病胸部肿瘤医院...经抗酸染色, 通过痰涂片可以检查出结核分枝杆菌; 也可以通过痰细菌培养出结核...实验方法: 基因型分型方法:①肺结核患者痰标本进行结核分枝杆菌培养;②CTAB(溴...统计学分析方法:采用 Epidata3.02 录入数据,核对后转入 SPSS18.0 进行统计分析...最终诊断:肺结核。 病例分析 该病例中, 微生物学检验的完整性,离不开对患者...临床上结核分枝杆菌培养常用的标本 为痰液(痰标本采集:自然咳痰最好留取晨痰,...SWOT分析法在新入院初治... 4人阅读 2页 ¥1.00 做药敏试验痰标本正确留...肺结核是结核分枝杆菌引起的肺部慢性传染性疾病, 排菌肺结核病人为重要传染源,...
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