您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
检测鸡传染性支管炎病毒抗体的hi试验与elisa相关性比较.pdf53页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
文档加载中...广告还剩秒
需要金币：280 &&
检测鸡传染性支管炎病毒抗体的hi试验与elisa相关性比较
你可能关注的文档：
··········
··········
扬州大学硕士学位论文 6 符 号说 明 心N a啊锄i11fluenzav岫 禽流感病毒
CPE e毹ct 细胞病变 cytopathjc il彘ctived0∞
EID50 medi觚emb巧o 鸡胚半数感染量
ELISA 酶联免疫吸附试验 enzymel砌湖im删mo∞rbent嬲say
hemaggllltin州on嬲say血凝试验
m iI“bition hemaggl锄ionassay
血凝抑制试验
IB iI彘ctiollsbroncllids 传染性支气管炎
mV ir彘ctiousbronCl埘s酒瑚 传染性支气管炎病毒
Ⅱ：：A 砌irect岫munonuorece弱say间接免疫荧光试验
n10le／liter 摩尔／升
Illl 血llili钯r 毫升
NDV m、 l戳哑ledise嬲e vin塔 新城疫病毒
ORF openreadiIlg蛔ne 开放性阅读框架
PBS saline phosplla：te-b硼衙ed 磷酸盐缓冲液
PCR p01 ，Imr缴ch抽rea撕0n聚合酶链式反应
印Im revolutio璐per舭 转／分
S seC0nd 秒
SDS sodiuIn Smfate dodecyl 十二烷基硫酸钠
specificpa：tllogen盘∞ 无特定病原体
m 而cmliter 微升 扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人声明：所莹交蠢孽学位论文是在导师攉导F独立遴行研究工作所取得静研
究成果。除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含其他个人或集体已经发表
的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。
本声明的法律结果融本人承担。 学位论文作者徘墨幺霸 o日、 签字日期：≯◇多年6月f 学位论文版权使用授权书 本人完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向
匡家有关部门或祝构送交学位论文的复窜律和电子文档，允许论文被查鼹和借阅。
本人授权扬州大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，
可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学
正在加载中，请稍后...鸡新城疫、传染性支气管炎（La Sota株+Jin13株）二联灭活疫苗_企业新药_兽药_兽药营销网
鸡新城疫、传染性支气管炎（La Sota株+Jin13株）二联灭活疫苗
一、研发背景1.立项目的及意义鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病，
一、研发背景
1.立项目的及意义
鸡传染性支气管炎(IB)&是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)&引起的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病，以咳嗽、喷嚏、气管啰音、肾脏肿大及产蛋下降和蛋品质下降为其特征。IBV血清型众多，至少有30&种之多，且不同血清型间缺乏有效的交叉保护，从而给IB&预防带来诸多困难。
IBV早期感染危害大，死亡率高，易造成假母鸡。临床表现为蛋鸡产蛋期没有产蛋高峰，通常高峰期产蛋率只能达到60%-75%，有的甚至更低，在40%左右；产蛋鸡群产蛋波动和蛋的品质不良，蛋壳品质下降，畸形蛋增多，蛋清稀薄如水。剖检输卵管不发育，或者输卵管、子宫内大量积液。
肉鸡和育雏鸡感染IBV&，发生呼吸道症状并伴有饮水量增加，拉稀的发病表现，剖检可见支气管堵塞，花斑肾居多。死淘率较高，因鸡的品种不同死亡率在8-40%之间。
除了传支病毒的威胁，新城疫也是养禽业的必须免疫的
2.研发历程
鸡传染性支气管炎病是影响当前养禽业的主要疫病之一，类4/91毒株(即用含有4/91毒株的疫苗对分离株具有良好的交叉保护作用)是当前的主要流行毒株。瑞普生物药业有限公司诊断研究中心对当前传染性支气管炎的分离毒株和疫苗毒株进行了S1基因的分子进化树分析，并对疫苗毒株和分离毒株进行了单因子血清鸡胚中和实验，具体结果见图1。
图1&&&基于S1基因的分子进化树
进化树结果表明30株分离株S1基因核苷酸同源性在76.9%-100%之间，分别属于A2(LX4)型和台湾型。其中27株属于A2(LX4)型，占比90%。他们之间核苷酸同源性为93.5%-100%，同源性很高。并且这27株可以分为2个亚型，其中13株属于A2(LX4)型ClusterⅠ亚型，14株属于A2(LX4)型&ClusterⅡ亚型。另有3株占10%属于台湾型，分别是BJ100306、JS121019和SD110329，他们之间的S1基因核苷酸同源性为87.5%-97.9%。说明近年来我国主要IBV分离株属于A2(LX4)型，并且彼此间亲缘关系较近，且与我国现用传支主要弱毒疫苗和国外参考株属于不同的基因型。
二、新兽药名称及主要成分
商品名：信之安
通用名：鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗（La&Sota株+Jin13株）
主要成份：每毫升疫苗含鸡新城疫病毒（La&Sota株）&2.0&108&EID50，传染性支气管炎病毒（Jin13株）&2.0&106&EID50。
三、新兽药特点
1.&精选最新流行毒株，可以提供对当前主要传支流行毒株交叉保护
瑞普公司诊断研究中心和河南农业大学禽病研究所共同合作，研究了最近几年流行的鸡传染性支气管炎病毒的生物学特性和分子特性后，筛选出鸡传染性支气管炎病毒流行分离株Jin13株，其免疫原性好、抗原谱广，交叉保护实验表明，可以有效地保护目前鸡传染性支气管炎的流行，保护鸡群免受传支病毒的侵袭。采用瑞普生物独特的病毒克隆纯化与复配技术，科学复配克隆纯化的NDV-La&Sota株、IBV-&Jin13株，疫苗的抗原谱广，抗原性能优良均一，可有效预防新城疫、传染性支气管炎疾病。
试验一&IBV单因子血清鸡胚中和试验结果
表1&&IBV单因子血清鸡胚中和试验结果
&&&&&&病毒
从表1中可以看出，血清中和试验研究结果证实了鸡传染性支气管炎病毒4/91毒株和Jin13株的血清对我国目前流行的传支病毒具有良好的中和效果；经试验证实Jin13&株可以提供优于4/91和H120毒株的中和保护效果。
试验二&&传染性支气管炎分离株灭活疫苗对SD1004株的保护作用研究
抗体的检测结果表明Jin13株抗体滴度较高，具有良好的反应原性，抗体上升的水平高且转阳率高。
免疫后攻毒保护率统计表
攻毒后14天，剖杀5只鸡，气管、肺脏、肾脏IBV病毒分离结果
攻毒后第14天各组织带毒情况
攻毒保护试验表明jin13株能够提供对当前流行的A2型的毒株JS121019株优秀的保护。&按照发病率统计M41灭活疫苗、H120活疫苗不能对流行毒株提供保护，通过攻毒保护试验获得一株免疫原性较好（LX4型）疫苗毒株Jin13株。Jin13株制备的灭活疫苗抗原性优良：抗体滴度高、抗体阳性率高、攻毒保护效果好、病毒分离率低等，对我国当前主要流行毒株有较好的保护作用，同时对M型有很好的保护。
2.&疫苗纯净，副反应小
采用连续流离心技术，，可快速有效地去除尿囊液中的异源蛋白及其他杂质等，纯化抗原，降低免疫副反应。
3.&超滤浓缩，抗原量高
应用进口浓缩设备生产，确保灭活前抗原含量为国标的10倍，抗体产生快，抗体滴度高，且维持时间长，无需加量使用。
4.&新型佐剂，吸收容易
采用进口新型佐剂，粘稠度低，易抽取、易注射、易吸收、且能激发良好的非特异性免疫反应。
5.&国际标准，质量稳定
瑞普生物与国际同步，严格执行欧盟GMP生产标准，确保产品批内一致，批间稳定，给您更高效的产品，更安全的保障。
四、用法与用量
颈部皮下或肌肉注射。两周龄内雏鸡每只0.2&ml，2-4周龄雏鸡每只0.3&ml，4周龄以上的青年鸡和成年鸡每只0.5ml。
五、注意事项
本品用于接种健康鸡。体质瘦弱、患有其他疾病者，不应使用；使用前仔细检查疫苗，如发现破乳、疫苗中混有异物等情况下，不能使用；使用前应先使疫苗恢复到常温并充分摇匀；疫苗启封后，限当日用完；本品不能冻结；注射针头等用具，用前须经消毒，注射部位应涂擦5%碘酒消毒；用过的疫苗瓶、器具和未使用的疫苗等应进行无害化处理；屠宰前28日内禁止使用。
本页关键字：鸡新城疫、传染性支气管炎（La Sota株+Jin13株）二联灭活疫苗,,企业新药
版权所有 & 兽药营销网　地址：河北省石家庄市槐安西路37号成功商务10号楼503室 热线电话：9 　传真：2 　发行：2 传真：2 邮编：050051 邮箱： 技术支持：您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
鸡传染性支气管病毒生产用种毒的分子生物学鉴定方法的研究.pdf65页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
文档加载中...广告还剩秒
需要金币：280 &&
鸡传染性支气管病毒生产用种毒的分子生物学鉴定方法的研究
你可能关注的文档：
··········
··········
摘要 Infectious 鸡传染性支气管炎 Avian
InfectiousBronchitis Virus，IBV 引起的一种急性、高度接触传染性疾病，其临床特征为病鸡咳嗽、
喷嚏、气管哕音；幼鸡流鼻液：蛋鸡产蛋数量和品质下降，是严重危害养禽业的主要传染病之一。
疫苗免疫是当前预防和控制鸡传染性支气管炎的主要措施，针对不同致病型或血清型的病毒，国 内外均有多种疫苗毒株和疫苗效力评价用强毒株。一些毒株用传统的种毒鉴定方法很难准确鉴
别，尤其是血清型相同的毒株，因此有必要建立分子生物学鉴别方法，进一步完善IBV特异性检
验方法，从而对IBV种毒进行鉴定，并对国内外疫苗进行纯净性检测。 本研究以中国兽医药品监察所菌种中心保存的不同年代的32株H120株、H52株和M41株
种毒为研究对象，采用自行设计的特异性引物经RT-PCR技术扩增得到病毒的S1蛋白基因片段。
序列与其他代次不同，但与M41株一致。查阅种毒原始记录，该批次种毒检定不合格，安全检
月冻干的种毒与其他几株相比，分别存在2个和9个核苷酸突变。H120种毒中未发现明显碱基
而76年、93年3月、06年冻干的种毒序列一致，与H120相似。
列 全长27．6kb 进行比对分析，从中找出他们之间序列差异较明显的区域，使用自行设计的四
对引物 引物对A、引物对B、引物对C、引物对D 对这四种毒株进行扩增。用引物对A时，
低病毒滴度为103
利用限制性内切酶Nae
断，而H52株的扩增产物由于不存在该酶切位点，所以无法切开。因此利用特异性引物对B并
列中长度为135lbp的目的片断，所需的4／91株最低病毒滴度为102。5EID50／mL，并结合使用引物
株，三对引物A、B、C均具有很好的特异性。 从全国疫苗企业中随机抽取了19个疫苗企业共75批
正在加载中，请稍后...}