紫外分光光度法和蒽酮-硫酸法测定参芎葡萄糖注射液中总糖含量--《贵阳医学院学报》2015年04期
紫外分光光度法和蒽酮-硫酸法测定参芎葡萄糖注射液中总糖含量
【摘要】：目的:建立参芎葡萄糖注射液中总糖含量的良好测定方法。方法:采用紫外分光光度法和蒽酮-硫取法,以葡萄糖为对照品,对参芎葡萄糖注射液中总糖进行含量测定。结果:建立了以葡萄糖为对照品,紫外分光光度法测定参芎葡萄糖注射液中总糖的含量测定方法,且浓度在0.008~0.03 g/L范围内与吸光度线性关系良好,A=35.50C-0.041 80,r=0.999 3,平均回收率为103.1%,RSD为2.9%。结论:蒽酮-硫酸法测定参芎葡萄糖注射液中总糖含量,测定方法简便、准确可靠,可用于该制剂的质量控制。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R286.0;O657.3【正文快照】：
“参芎葡萄糖注射液”为上市的中药注射剂品种,由丹参和盐酸川芎嗪配伍组成,具有抗血小板聚集,扩张冠状动脉作用,临床用于闭塞性脑血管病及其它缺血性血管疾病的治疗[1-3]。参芎葡萄糖注射液现行质量标准仅对丹参素和盐酸川芎嗪进行定量控制,难以全面控制产品内在质量。为进一
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京公网安备75号川芎挥发油化学成份的初步研究--《北京医学院学报》1983年03期
川芎挥发油化学成份的初步研究
【摘要】：正 川芎为伞形科植物川芎(Ligusticum Chuanxiong Hort)的干燥根茎,又名芎(艹穷),主治头痛、胸肋痛、经闭腹痛、跌打损伤等。是常用中药之一。近来,川芎生物碱在临床上作为治疗冠心病心绞痛。 关于川芎的化学成份,文献曾报导从国产
【作者单位】：
【关键词】：
【正文快照】：
川芍为伞形科植物川芍(Ligustieum Ch-uanxiong Hort)的干燥根茎(”2,,又名芍劳,主治头痛、胸肋痛、经闭腹痛、跌打损伤等。是常用中药之一。近来,川芍生物碱在临床上作为治疗冠心病心绞痛‘”,。 关于川芍的化学成份,文献曾报导从国产川芍分离出易挥发的油状生物碱(CZ:H3了N
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京公网安备75号参芎葡萄糖注射液药效物质基础及作用机制研究--《贵阳医学院》2015年博士论文
参芎葡萄糖注射液药效物质基础及作用机制研究
【摘要】：目的:参芎葡萄糖注射液临床广泛用于治疗心脑血管疾病且疗效确切,但其发挥临床效用的药效物质基础、体内过程及作用机制尚不明确,无法为其临床疗效提供科学依据,从而限制了参芎葡萄糖注射液的产业化与现代化进程。本研究针对贵州省名优大品种参芎葡萄糖注射液的“药效物质基础、质量控制、药代动力学、药物相互作用以及作用机制”等进行系统的基础研究,以期明确本品的药效物质,提高产品质量控制水平,并对作用机制进行探讨,为确保临床用药安全、有效、质量稳定可控提供科学依据。方法:1.采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器-串联四级杆飞行时间质谱法(UHPLC-DAD-Q/TOF)对参芎葡萄糖注射液中主要化学成分进行全面系统的表征;同时进一步将心肌细胞萃取技术和超高液相色谱–电喷雾–三重四级杆串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)分析技术相结合,对参芎葡萄糖注射液中活性成分进行筛选;采用液相色谱建立以指纹图谱为特征的多指标定性定量控制方法,对多个活性成分进行含量测定,并对药材、半成品与制剂指纹图谱的相关性进行考察。2.建立测定大鼠血浆中参芎葡萄糖注射液中主要有效成分原儿茶醛、丹参素、盐酸川芎嗪以及迷迭香酸的UPLC-ESI-MS/MS分析方法,并分别考察丹参提取物、盐酸川芎嗪以及参芎葡萄糖注射液在大鼠体内的药动学过程,对单方及复方的药动学参数进行比较。3.采用“cocktail探针药物法”分别研究参芎葡萄糖注射液对人肝微粒体和大鼠CYP1A2、CYP2D6、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4酶活性的影响;体外实验中,将参芎葡萄糖注射液和Cocktail探针底物在人肝微粒体中共同孵育,采用UPLC-MS/MS同时测定孵育液中混合探针药物代谢物的浓度,并计算其IC50值,考察其对CYP450酶的抑制程度;体内实验中,将SD大鼠分别尾静脉注射给予参芎葡萄糖注射液与生理盐水,连续给药7天和14天,第8天和第15天尾静脉注射混合探针药物,UPLC-MS检测探针药物的血药浓度,计算其药动学参数;从体内外角度分别考察参芎葡萄糖注射液对CYP450酶6种亚型的作用,预测发生药物相互作用的可能性,以确保其临床应用的安全性与有效性。4.建立H9c2心肌细胞H2O2氧化损伤模型,以细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和细胞内活性氧(ROS)含量作为考察指标,探讨参芎葡萄糖注射液对H2O2所致心肌细胞氧化损伤的保护作用;通过分析线粒体膜电位(△ψm)、细胞形态变化,应用实时荧光定量PCR技术(q RT-PCR)和蛋白质印迹技术(western blotting)分析H9c2心肌细胞中Bcl-2,Bax和Caspase-3表达的情况,考察参芎葡萄糖注射液对H2O2所致H9c2心肌细胞凋亡的影响。并利用Rat Genome 230 2.0 Array基因芯片,考察其对H9c2心肌细胞的表达谱的影响并寻找其抗凋亡信号转导途径,从而探究参芎葡萄糖注射液对H2O2所致心肌细胞氧化损伤的保护作用机制。结果:1.全面分析了参芎葡萄糖注射液中的化学成分,对其中13个化合物进行了鉴定,通过心肌细胞萃取和分析技术筛选出丹参素、盐酸川芎嗪、丹酚酸I/H、紫草酸、丹酚酸D、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸C等8个具有心肌保护作用的丹酚酸类活性化合物;参芎葡萄糖注射液多指标含量测定结果表明,制剂中丹参素、盐酸川芎嗪、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的总量为1.295mg/m L~1.387 mg/m L,平均含量为1.336 mg/m L,RSD为1.6%;各批次制剂指纹图谱的相似度均大于0.98,且制剂与药材、半成品的指纹图谱有良好的相关性,实现了从药材、中间体到最终产品的全程质量监控,完善了参芎葡萄糖注射液质量控制标准,为准确全面地评价参芎葡萄糖注射液的质量提供了科学依据。2.以统计矩模型处理,丹参中各测定成分及川芎嗪的MRT有剂量依赖性,其体内代谢存在非线性动力学特征。且川芎嗪与丹参组成参芎方后,各药动学参数变化较为明显,复方中川芎嗪AUC明显增大,MRT、CL和V显著降低。该结果表明丹参的存在,显著使川芎嗪在体内的停留时间缩短而分布程度降低,提示临床使用应对给药剂量及合并用药进行严格监控以保证安全。3.在人肝微粒体体外孵育体系中,参芎葡萄糖注射液对CYP450酶6种亚型的IC50值均大于15%,说明其不会产生竞争性抑制作用;大鼠体内实验中,咖啡因、咪达唑仑、奥美拉唑和美托洛尔连续给药7天和14天后与空白组比较无统计学差异;甲苯磺丁脲的重要参数AUC、MRT、T1/2、Cmax值在给药7天和14天后显著性增大,CLz值显著性降低。说明参芎葡萄糖注射液对CYP2C9活性的抑制作用与给药疗程有关,而对CYP1A2、CYP2D6、CYP2E1、CYP2C19和CYP3A4无影响。提示需特别注意与经CYP2C9代谢且治疗窗窄的药物(如华法林)联合使用,以免发生药物相互作用导致不良反应。4.参芎葡萄糖注射液对H2O2所致心肌细胞氧化损伤的具有保护作用,可明显提高H2O2损伤后H9c2心肌细胞的存活率和超氧化物歧化酶(SOD)活性、减少乳酸脱氢酶(LDH)漏出、降低细胞内丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量;可将H2O2损伤后的细胞回复到正常形态,并抑制线粒体膜电位降低。参芎葡萄糖注射液可上调H9c2心肌细胞中抗凋亡因子Bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax值升高;且明显下调凋亡执行效应子Caspase-3的表达,从而抑制H2O2诱导的细胞凋亡;基因芯片实验发现了138个有差异表达的基因。pathway分析表明这些基因涉及了p53、Jak-STAT、m TOR和PI3K/Akt等与凋亡紧密相关的信号通路。在这些凋亡相关通路中,均有PIK3CA的参与,并且其表达差异达到了3.5倍多。PIK3CA表达的增加可上调PI3K的活性,使Akt发生磷酸化,从而激活PI3K/Akt通路,起到抗凋亡作用。这提示我们PI3K/Akt信号通路可能是参芎葡萄糖注射液抗H2O2诱导细胞凋亡的重要信号转导机制。结论:本研究建立了基于靶细胞萃取结合UPLC/Q-TOF MS技术的中药药效基础研究方法,阐明了参芎葡萄糖注射液的药效物质基础;建立了参芎葡萄糖注射液科学的质量控制方法,能够确保产品的均一性和稳定性,提升了产品的质量控制水平;研究明确了参芎葡萄糖注射液在体内的药动学特征,分析预测了与临床常用药物合用的相互作用,揭示了抗心肌氧化损伤作用及机制,为指导临床合理用药和完善药品说明书提供了科学依据;通过上述研究,为确保参芎葡萄糖注射液临床应用安全、有效、质量稳定可控奠定了坚实的理论基础,并对全面阐明“参芎葡萄糖注射液”发挥临床功效的科学内涵提供重要依据。
【关键词】：
【学位授予单位】：贵阳医学院【学位级别】：博士【学位授予年份】：2015【分类号】：R96【目录】：
摘要6-10Abstract10-16英文略缩词表16-18引言18-24第一部分参芎葡萄糖注射液药效物质基础研究24-63 1 材料与仪器25-26 2 方法与结果26-59 3 讨论59-62 4 小结62-63第二部分参芎葡萄糖注射液药代动力学研究63-87 1 材料与仪器64-65 2 方法65-68 3 结果68-83 4 讨论83-86 5 结论86-87第三部分参芎葡萄糖注射液对P450酶的影响87-119 1 材料与仪器89-90 2 方法90-96 3 结果96-114 4 讨论114-118 5 小结118-119第四部分 参芎葡萄糖注射液抗氧化损伤保护作用及机制研究119-161 1 仪器与材料123-124 2 方法124-135 3 结果135-156 4 讨论156-159 5 小结159-161全文总结161-164参考文献164-172综述172-190 参考文献186-190作者简历190-194致谢194-195学位论文数据集195
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