尼康te2000倒置荧光显微镜原理观察fitc荧光怎么调制

TE2000尼康活细胞工作站、尼康倒置荧光显微镜
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NIKON尼康 倒置荧光显微镜 上海德茹一级代理[详细参数]
产&&&&地: 日本
产品价格: 139000 套
运费说明: 买家承担
NIKON尼康 倒置荧光显微镜 上海德茹一级代理[详细内容]
尼康推出的新型TE2000系列倒置显微镜超越时代步伐,适用于所有活细胞的先进应用,为的孕育诞生为活细胞研究提供了水平的光学成像,为活细胞多维成像提供了理想平台。CFI60光学系统确保了镜头的长工作距离和高数值孔径;新型DIC系统清晰再现了标本的微小结构,包括三种DIC棱镜可供选择:标准型、高衬度型、高分辨率型;所有机型都可以选配电动功能。
多端口、分层结构设计
1.分层结构设计:确保显微镜可以自由地增加激光设备。
2.多端口设计,支持多种显微观察和测量,提供了三种主机:
3.TE2000-S:包括观察和侧接口两个端口。
4.TE2000-U:包括观察和左/右侧、前端四个端口。
5.TE2000-E:包括观察和左/右侧、前端、底端五个端口。
1.TE2000-E作为标准的电动机型提供了全面的电动控制,通过PC软件进行控制。
2.带有高精度的线性编码器和光路切换消震机构,有利于3D图像的捕获。
3.物镜防碰撞机构有利于标本的更换。
4.外部微调焦机构:桌面上任何位置都可以进行微调焦操作。
TE2000-PFS:在TE2000-E机型的基础上增加了红外对焦功能&&在添加试剂或样品延时观察时可以校正焦点的漂移;通过光学补偿特征,整个标本的任何一个感兴趣的焦平面都可以连续校正;聚焦精度可以达到物镜焦深的1/3以下;红外发光二级管探测器波长不干扰荧光观察的波长,高衬度地再现了单分子的荧光。通过数码相机可以长时间地自动记录活细胞的生长过程。
TE2000-U/S机型可以有选择地选配电动附件。
典型应用&&&
TE2000-U倒置荧光、DXM1200C冷CCD相机
1.TE2000-U主机:多图像端口
2.独特的消杂光机构,六工位荧光转盘,100W高压汞灯激发,配备B、G、UV三种标准荧光滤块。
显微操作系统
1.TE2000-U主机:配备HMC或DIC成像技术
2.显微操作系统:电动粗定位、液压手动定位;气压式吸持注射器,油压式微量注射器。
3.选配件:电动注射器、电动可编程注射器。
4.选配件:CCTV闭路电视监视系统。
5.选配件:MHW-3水压式电生理显微操作器。
用于单分子荧光的TIRF系统
1.TIRF显微术具有可提供发微弱荧光分子的极高信噪 比图像的优点,使用尼康独创的可彻底消除入射杂散光的&噪声消除器"机构之后,该优点得到极大的增强。
2.专用的60X/100X平场复消色差物镜(油镜)数值孔径达到1.49,温度较正环限度地消除了温度变化造成的像差缺限。
1.具有明场、相差、数码摄照(500万以上有效像素)、电脑图象采集和分析处理系统、自动测光功能,显微影象摄录功能。
2.CFI60无限远光学系统;
3.&六孔物镜转盘;
4.光源:12V&100W&卤素灯泡;
5.宽视野&(视野数为&22mm);
6.大面积载物台:台面尺寸:载物台环可更换;
7.相差附件:4X、10X、20X、40X;
8.长工作距离聚光镜:N.A.0.52,W.D.30mm;&
9.荧光系统:长寿命型:130W汞灯G、B、UV、GFP激发;
10.研究级专用平场荧光物镜:长工作距离型:4&、10&,20&,40&;100X油镜(N.A.1.30);
11.500万以上有效像素专业CCD,包含USB传输线、控制器等附件,35%、1%、0.1%三种测光方式;自动、超级荧光、手动三种曝光模式;自动黑白平衡;灰度/彩色两种采集方式。
供应商简介
上海德茹主营压力开关、压力传感器、压力表、温度计、温度开关、温度传感器、流量开关、液位开关、低温槽等自动化仪表及实验室仪器耗材。
上海德茹是德国BAR-CONTROL压力开关中国总代理和德国ADZ压力传感器总代理,同时也经营以下欧美品牌:德国JUMO、德国WIKA、德国FISCHER、德国BALLUFF、德国armatherm、德国electrotherm、德国VOGEL、德国IHNE&TESCH;意大利Fratelli-Giacomello、意大利GEMELS、意大利SiTi-bt、荷兰STIKO、丹麦PRelectronics、美国ASHCROFT、美国Conax等。
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荧光显微镜的使用+倒置荧光显微镜原理
    一、荧光显微镜标本制作要求
载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。
盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涩盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的光起不同干涉作用的物质(如氟化镁)的盖玻片,它可以使荧光顺利通过,而反射激发光,这种反射的激发光可激发标本。
组织切片或其他标本不能太厚,如太厚激发光大部分消耗在标本下部,而物镜直接观察到的上部不能被充分激发。另外,细胞重叠或杂质掩盖,影响判断。
封裱剂常用甘油,必须无自发荧光,无色透明,荧光的亮度在PH8.5~9.5时较亮,不易很快褪去。所以,常用甘油和0.5mol/L PH9.0~9.5的碳酸盐缓冲液的等量混合液作封裱剂。
一般用暗视野荧光显微镜和油镜观察标本时,必须使用镜油。最好使用特制的无荧光镜油,也可用上述甘油代替,液体石蜡也可用,只是折光率较低,对图像质量略有影响。
二、荧光显微镜基本操作
1.关闭房间内的电灯,开启显微镜汞灯;
2.根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片;
3.放好样品,找到合适的视野;
4.如需拍照,请确认照相机内已装好彩色胶卷(最好使用27定胶卷);
5.开启自拍装置,选择手动档,通常拍摄速度在0.5-10秒内;
6.使用结束,关闭所有电源并做好使用记录。
三、荧光图像的记录方法
荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察。作为一般定性观察,基本上可靠的。随着技术科学的发展,在不同程度上采用客观指标记录判断结果,如用细胞分光光度计,图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果,也必须结合主观的判断。
荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶片即可。因紫外光对荧光猝灭作用大,如FITC的标记物,在紫外光下照射30s,荧光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。
四、使用荧光显微镜的注意事项
1.严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作,不要随意改变程序。
2.应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。
3.防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。
4.检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱;所以,最多不得超过2~3h。
5.荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时,须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。
6.标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发。
7.荧光亮度的判断标准:一般分为四级,即“-”指无或可见微弱荧光。“+”指仅能见明确可见的荧光。“++”指可见有明亮的荧光。“+++”指可见耀眼的荧光。
收录时间:日 17:50:55 来源:中国显微图像网 作者:匿名
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Annexin Ⅴ-FITC / PI 双染 倒置荧光显微镜观察
想用 Annexin Ⅴ-FITC / PI 测药物诱导Hela细胞凋亡,目前有倒置荧光显微镜,想观察一下荧光强度变化,小试了一下,发现绿光很弱,哪位高手做过这样的实验,不惜赐教,定会不胜感激……
我是这样做的,将hela细胞从六空培养板上消化下来,PBS洗两次,染Annexin Ⅴ-FITC / PI10min,又洗了2次,滴几滴到载玻片上,盖玻片,上镜观察,肯定哪个步骤有问题了,恳请高手来帮忙:arm::arm::arm:
谢谢你的回复 我们买的试剂盒上没有标明胰酶不加EDTA 不过我买了不加EDTA的胰蛋白酶 我还是用流式细胞仪做吧 这个实验好做吗:hand:
不好意思,前段时间没有上小木虫,对于hela细胞还是挺好做的,祝你顺利
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