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分子生物学基础
　　分子生物学是研究和阐述生物大分子结构与功能的学科，是当代生物科学的重要分支，是一门迅速发展的基础学科。在本书编写中，参考了国内外近年来的优秀教材，并在1994年编写的《分子生物学基础》的基础上，保持原有框架的长处，结合多年的教学实践，进行扩充、重写。& 分子生物学全书从蛋白质、核酸、基因及基因组结构开始，沿着中心法则的主线，阐述生物大分子在复制、转录、翻译、信息传导、基因表达调控中的相互作用和功能。编写时着重分子生物学的基本概念和理论，尽量使叙述确切，能更好地反映分子生物学的发展趋向。全书分12章，包括蛋白质分子结构、核酸的结构、基因和基因组、生物大分子的相互作用、基因工程原理、DNA的复制、基因的转录、转录后加工、蛋白质生物合成和翻译后加工、细胞信息传导、原核生物基因表达的调控、真核生物基因表达的调控。通过本书的学习，使学生能了解当前分子生物学的概貌、基本思路、方法、与生命科学其他学科的联系。
　　本书可作为生物学、生物技术、医学等专业以及农林相关专业的本科生、研究生的分子生物学课程的教材或参考书。
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信息内容：【标准品名称】2ｘ GC-rich PCR MasterMix(含染料 )【标准品产品规格】1ml
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PCR Master
Mix&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
2&Taq PCR MasterMix
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PBZ0111-1&&&&&&&&&&&
1ml&&&&&&&&&&&&&&&&&
150.00&&&&&&&&&&&&&&&&&
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PBZ0111-2&&&&&&&&&&&&&
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150.00&&&&&&&&&&&&&&&
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTP和优化的反应缓冲液，浓度为2&。该制品具有强的扩增能力。DNA扩增时，只需加入模板，引物和水，使Taq PCR
MasterMix溶液的浓度为1&即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行PCR扩增可以减少操作时间，避免因多步操作带来的污染，特别适宜高通量筛选基因的扩增，其扩增产物3&
端带“A” 碱基。扩增产物可以直接上样电泳。
PBZ0111-1 &2xTaq PCR
Master Mix（含红色染料） &&1ml&&&
灭菌ddH2O&&&&&&
PBZ0111-2& 2xTaq PCR
Master Mix（不含染料） &&&&1ml&&&&
灭菌ddH2O&&&&&&
保存条件及有效期
-20℃，有效期6个月。避免反复冻融，以免影响扩增效果。 为保证扩增效果，建议分装成小量使用。
50mmol/LTrisHCl，20mmol/LKCl，0.08U/μl Taq DNA
polymerase，4mmol/LMgCl2，500μmol/L dNTPs，稳定剂及红色染料。
以25μl反应体系为例，在一个无菌PCR反应管中加入以下成分
MasterMix&&&&&&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&12.5μl
上游引物 (10
μmol/L)&&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1
下游引物 (10μmol/L)&&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1
模板（基因组0.1-1 μg， 质粒DNA1-10ng）&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&
加灭菌ddH2O至终体积为&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&25μl
实际操作中为防止交叉污染计算好需补加水的量后，建议先加水，然后按上述顺序添加其它成分。充分混匀后，离心数秒使反应混合物沉到管底。然后将反应管置于PCR仪中进行扩增。如果需要扩大体系，可以按比例放大。
PCR反应循环条件设置
在PE9600型PCR仪上，扩增1.0 kb
DNA片段的反应循环条件：94℃预变性5 min，然后按照下参数扩增25-35个循环：94℃变性30
sec，42-65℃退火30 sec，72℃延伸1-2
min，完成后，72℃后延伸5-10 min。具体的退火温度由引物的Tm值决定。各个温度持续的时间由扩增产物长度而定。循环数主要取决于起始模板量。Taq DNA polymerase的合成速度较快，每分钟延伸1-2 kb。
反应结束后，5μl扩增产物用含0.5μg/ml溴化乙啶（或合适浓度的其它DNA染色试剂），合适浓度的琼脂糖凝胶电泳检测，电泳完成后在紫外透射仪下观察结果。
引物溶解及稀释方法
首先确定引物量：找到合成引物离心管标签上的nmole值（例如其读值为7.82nmols），或OD数（先算出OD和μmol转化系数（OD/μmol）＝（
#A&15.3）+（#T&9.3）＋（#C&7.4）＋（#G&11.8）。例：一条长22个核苷酸的引物其中有8个A，4个T，5个C和5个G。算的转化系数为255.6，那么每个OD的nmole值为3.91，合成量为2.0OD，该次合成量为7.82nmole。）
2. 引物储存液：建议您将引物储存液浓度配制为100μmol/L，那么溶解引物所需加入无菌水或TE的量7.82&10=78.2μl。
3. 引物工作液：根据储存液浓度稀释配制到您所需要的浓度即可。
用质粒为模板来扩增DNA时，为了最大限度地降低突变，可以采用高浓度模板和低循环数的策略，再用凝胶回收片断
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