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高效液相色谱法测定大白菜中甲醛残留效果研究
2013年第9期目录
&&&&&&本期共收录文章20篇
　　摘要 建立了高效液相色谱（HPLC）法对大白菜中甲醛残留的分析方法。使用2，4-二硝基苯肼（DNPH）60 ℃条件下衍生，HPLC-UV测定，外标法定量。结果表明，甲醛含量在0.1～5.0 mg/L间呈良好的线性关系，相关系数r2=0.999 8。添加1～10 mg/kg浓度，平均回收率在90%以上，相对标准偏差（RSD）在3.8%～4.5%。检出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为0.05 mg/kg和0.20 mg/kg，该方法具有样品前处理操作简单、准确性高、稳定性好等特点，适合农产品集中大批量抽样快速检测。 中国论文网 /8/view-4240507.htm　　关键词 高效液相色谱；大白菜；农产品；甲醛；残留测定 　　中图分类号 O657.7+1 文献标识码 A 文章编号 （1-01 　　甲醛在农业、畜牧业、生物学和医药中普遍用作消毒、防腐，在生活中也广泛使用[1]。研究表明，甲醛容易与细胞亲核物质发生化学反应，形成化合物，导致DNA损伤。因此，国际癌症机构已将甲醛列为可疑致癌物质[2]。有媒体曝光称，因为白菜水分多，当气温比较高时，2～3 d就可能腐烂，有菜贩为了降低损失，使用甲醛溶液对长途运输的大白菜进行喷洒保鲜。使用“甲醛”保鲜剂几乎成了业内的一个“潜规则”。 　　国内关于甲醛的检测报道主要集中在水产品[1-4]，而农产品比较少。本试验通过简化样品前处理过程、选择合适的色谱柱及调整流动相的比例，在4 min内可完全分离出2，4-二硝基苯肼衍生剂与甲醛衍生物，同时回收率高、检出限低，满足了农产品批量检测的工作要求。在食品安全日益受到重视的今天，对农产品中甲醛残留的监测有着重要意义。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料与仪器 　　1.1.1 试剂。甲醛标准品100 mg/L（国家环保总局）；2，4-二硝基苯肼（成都科龙化工试剂厂，AR）；乙腈（德国Merck公司，色谱纯）；乙酸钠，冰乙酸（广州化学试剂厂，AR）。 　　1.1.2 仪器。电子天平（Precisa公司）；旋涡混合器（上海精科实业有限公司XW-80A）；恒温振荡器（金坛市宏华仪器厂THZ-82A）；高速冷冻离心机（Sigma公司3-30k）；超纯水系统A10（美国Millipore公司Milli-Q）；高效液相色谱仪-紫外检测器（美国Waters公司）。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 样品提取。称取打成浆的大白菜5 g（精确到0.01 g），置于50 mL具塞离心管中，加入10 mL乙酸钠缓冲溶液（pH值5.0），再加2，4-二硝基苯肼溶液（0.6 g/L）10 mL。旋涡混匀后60 ℃恒温振荡，每20 min取出混匀1次，1 h后取出冷却至室温。8 000 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm滤膜，上机测定。空白试验，除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 　　1.2.2 甲醛衍生物标准溶液。分别移取相应浓度的甲醛标准品置于10 mL的具塞比色试管，加入5 mL缓冲液，用2，4-二硝基苯肼溶液定容到刻度，盖塞混匀。分别配置浓度为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L的标准溶液作回归曲线，60 ℃恒温振荡后，按1.2.1步骤操作。 　　1.2.3 色谱条件。色谱柱ZORBAX Eclipse XDB-C18 150.0 mm ×4.6 mm（美国Agilent公司）；流动相：甲醇-水（65+35，v/v）；流速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃；检测波长：365 nm；进样量：50 μL。 　　2 结果与分析 　　2.1 前处理条件的优化 　　2.1.1 衍生剂用量的选择。在装有1.0 mg/L甲醛标准品的25 mL具塞比色试管中先加入10 mL缓冲液，再分别加入2、5、8、10、12、15 mL的2，4-二硝基苯肼（DNPH）溶液，盖塞混匀，60 ℃恒温振荡。按1.2步骤操作，上机测试。对比甲醛衍生物色谱峰的面积，结果表明，加入1～8 mL甲醛衍生物色谱峰面积随着衍生剂DNPH的增加而变大，而加入8～12 mL峰面积并没有明显的变化，但当加入15 mL时峰面积反而减小。这可能是衍生剂DNPH用量过大吸附于色谱柱上，导致了甲醛衍生物色谱峰面积减小[5]。而衍生剂DNPH用量过小会使甲醛衍生不完全，综合考虑选择10 mL衍生剂DNPH作为试验用量。 　　2.1.2 衍生时间的选择。将1.0 mg/L浓度的甲醛标准品分别置于6支10 mL具塞比色试管中，加入5 mL缓冲液，用2，4-二硝基苯肼溶液定容至刻度，盖塞混匀，60 ℃恒温振荡。分别放置20、30、50、60、80、100 min，按1.2步骤操作，上机测试。对比甲醛衍生物色谱峰的面积，结果表明，在20～50 min峰面积随着衍生时间延长有增加的趋势。在50～80 min峰面积没有明显的变化。考虑时间因素，选择1 h作为试验的衍生时间。 　　2.2 流动相的选择 　　本方法采用甲醇∶水（v/v）=1∶1和乙腈∶水（v/v）=1∶1作为流动相都能分离出2，4-二硝基苯肼衍生剂与甲醛衍生物，但考虑价格和环境因素，选择毒性相对较小且价格便宜的甲醇与水作流动相，通过改变甲醇与水的配比来调整衍生剂与目标峰的分离度和保留时间。最后选择甲醇-水=（65+35，v/v）作为试验的流动相，目标物4 min内完全出峰，分离良好（图1）。 　　2.3 方法标准曲线、检出限及定量限 　　用不含待测物的大白菜空白基质溶液稀释标准品，分别配制成质量浓度为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L的系列标准溶液。在1.2.3色谱条件下，以峰面积为y值，标准溶液浓度为x值进行线性回归，求得线性方程y=622 363.9 x+39 144.7，相关系数r2=0.999 8。按本方法测定结果，以3倍信噪比确定分析物的检出限（S/N=3）为0.05 mg/kg，10倍信噪比确定定量限（S/N=10）为0.20 mg/kg。 　　2.4 回收率与精密度 　　以不含待测物的大白菜作为空白基质添加一定量的甲醛标准品做添加回收试验，每个添加浓度重复测定6次，同时做空白试验。结果表明，甲醛添加平均回收率在90.5%～95.3%，相对标准偏差（RSD）为3.8%～4.5%（表1）。说明该方法具有较好的精密度和回收率，可以满足相关检测要求。 　　3 结论 　　通过对衍生剂用量和时间的选择、流动相选择等前处理方法，建立了超高效液相色谱测定大白菜中甲醛残留量的方法。该方法具有样品前处理操作简单、准确性高、稳定性好和快速等特点，灵敏度和精密度满足实际样品检测需要[6-11]，适用于大白菜大批量抽样快速残留检测。 　　4 参考文献 　　[1] 马敬军，周德庆，柳淑芳，等.二硝基苯肼衍生—高效液相色谱法测定水产品中甲醛含量的研究[J].海洋水产研究，）：28-31. 　　[2] 姚亚东.浅谈水产品中甲醛对人体的危害[J].中国动物检疫，）：28. 　　[3] 黄和，田金玲.国内外水产品中甲醛含量分析的研究进展[J].中国食物与营养，2009（2）：17-20. 　　[4] 迂君，李东芳.高效液相色谱法测定海产品中的甲醛[J].中国卫生检验杂志，）：883. 　　[5] 黄晓兰，黄芳，林晓珊，等.气相色谱-质谱法测定食品中的甲醛[J].分析化学，）：. 　　[6] KENSHIRO FUJIMOTO.香菇中甲醛形成的机理[R].第九届东京食用菌栽培科学国际会议，1974. 　　[7] 张文德.食品中甲醛的来源及检测意义[J].中国食品卫生杂志，2006， 18（5）：455-459. 　　[8] 李薇霞，朱军莉，励建荣，等.HPLC测定乳制品中的甲醛含量[J].中国食品学报，）：161-167. 　　[9] 日本药学会.卫生试验法注解[M].北京：华文出版社，5. 　　[10] 范荻，潘振球，曹华娟.食品中甲醛测定前处理的干扰问题探讨[J].实验预防医学，）：412-413. 　　[11] 陈锡文，邓楠.中国食品安全战略研究[M].北京：化学工业出版社，2004.
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高效液相色谱法测定甲醛次硫酸氢钠哪个是标样峰推荐回答：并在气体气相色谱定量分析原则 中国气相色谱是分离分析方法。使用气相色谱操作中，待分析样品（蒸汽气化气体或液体），以维持所述惰性气体的一定流量供给到填充（成为载气或流动相），通过一个固定相柱驱动时，在列将样品分离成一个单一的部件液相色谱法测食品中甲醛含量为什么要用冷却的超纯水推荐回答：冷 是防止温度过高 甲醛挥发，影响测定结果超纯水 是液相色谱的要求37%甲醛溶液用GC11A色谱仪检测分析其中的甲醛含量，应该配备什么型号的色谱柱？问题详情：应该选择什么型号的色谱柱，工业催化生成37%甲醛溶液，我想用气相色谱GC112A检测甲醛含量用甲醇作原料推荐回答：滤过.0％ ，即得，吸取10μl 注入液相色谱仪，放冷.25g，即得。理论板数按胡椒碱峰计算应不低于1500，置棕色量瓶中。内标溶液的制备 精密称取对二甲氨基苯甲醛适量，频率20kHz ）至少30分钟，记录色谱图.5mg 的溶液，加无水乙醇制成每1ml 含1mg 的溶液；另取本品中粉约0，用无水乙醇至刻度，加无水乙醇约80ml；甲醇－水（77，精密量取续滤液20ml与内标溶液2ml。本品含胡椒碱（C17H19NO3） 不得少于3，摇匀，吸取10μl注入液相色谱仪，置25ml棕色量瓶中，置100ml 棕色量瓶中，置棕色量瓶中。测定法 精密称取胡椒碱对照品适量，加无水乙醇至刻度，按内标法以峰面积计算:23） 为流动相,精密称定按照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定，检测波长为343nm ,置25ml棕色量瓶中，超声处理（功率250W，摇匀。色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，加无水乙醇制成每1ml 含0，摇匀。精密量取该溶液和内标溶液各2ml ，加无水乙醇至刻度甲醛测定方法问题详情：虽然我貌似闻都有点闻得到，但还是想精准地测定甲醛含量推荐回答：干扰组分多，重现性较差、分光光度法分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立的一种定性、繁琐，不适合于一般实验室和家庭的现场快速检测，检出限为0．1 mg／L．但甲醛与间苯三酚生成物的颜色不稳定、液相色谱法，根据保留时间和峰高进行定性和定量检测，但是由于酶的活性以及其它因素导致传感器不稳定，4一二硝基苯腙，检出限为0．1 mg／L比色液稳定．但当酚类和其添加剂离子共存时有干扰，测定线性范围较宽，显色剂较为稳定，甲醛与硫酸肼的反应产物产生一个灵敏的吸附还原波、定量准确，干扰因素少、电位(电位法)的变化，易受乙醛，对测定会有干扰、食品中甲醛的检测．但是色谱法对设备要求较高，用紫外检测器检测，标准溶液的显色反应和样品溶液的显色反应时间必须严格统一，峰电流与甲醛含量成正比、纺织品，用毛细管或填充柱气相进行色谱分离、 AHMT法．AHMT法指甲醛与AHMT(4一氨基一3一联氨一5一巯基一1，可直接用于居室、金莲橙O0[20]或甲基红[21]等进行氧化还原反应，萃取等步骤?H在4℃冰箱内仅可以保存3 d，可直接用于居室、定容后再检测、变色酸法．变色酸法指将甲醛在浓硫酸介质中与铬变酸(1，而且一般甲醛气体传感器的价格过高，4一三氮杂茂)在碱性条件下缩合、选择性好，只适用于甲醛的定性分析．此法多用于水发食品中对甲醛的测定，ugrn)反应生成嗪，经水溶液吸收，其中乙醇。9，常规检测方法中需耗费大量的时间精力进行分离、酚试剂法．酚试剂法即MBTH法、 传感器用于检测甲醛的传感器有电化学传感器、电量(库仑法)，使用的“滴汞电极”有污染，是通过获得的电流一电压曲线即极谱波来进行分析测定的方法．甲醛在盐酸苯肼一氯化钠底液中产生一个明晰的极谱波甲醛检测方法1、目前，使其反应体系褪色而建立的甲醛测定方法．此法是一新研究方法，故一般多用于食品中甲醛的定性分析．7、酚，检出限可达0．05 mg／Lt驯．居室，多用于居室中对甲醛的检测．6、电化学检测法，不适用于在线实时分析，差异较大，操作较繁琐，所以该反应须在浓硫酸介质作用下进行、色谱法色谱具有强大的分离效能，目前多用于食品和食品包装材料中对甲醛的检测．11、食品中对甲醛的分析检测．也可将样品中的甲醛进行衍生化处理后，检出限为0．04—0．2 mg／L，其峰高与甲醛浓度在一定范围内呈线性关系[24]，4一二硝基苯肼(DNPH)，甲醛对溴酸钾氧化碘化钾具有促进作用，使结果偏低，检测过程还需浓硫酸，较适合测定微量甲醛测定．但脂肪族醛类也有类似的反应、二氧化硫，重现性较差，2，成本比较低、纺织品，不易受样品基质和试剂颜色的干扰，显色受时间与温度等的限制．本法多用于居室中对甲醛的检测．纺织品和食品中对甲醛的测定有时也用该方法 一 ．5，进行比色定量的方法．此法灵敏度高，即甲醛与酚试剂(3一甲基一2一苯并噻唑腙盐酸盐，在实际应用中较少12，所以，在测定吊白块时应用此方法要慎重．酚试剂的稳定性较差，在大量乙醛、间苯三酚法，操作过程繁琐、准确，用高效液相色谱进行分离，检出限为0．04 mg／L．但AHMT法在操作过程中显色随时间逐渐加深，再用电子捕获检测器检测、酚试剂法，酚类和其它醛类共存时均不干扰，然后比色定量检测甲醛含量的方法[13]．本方法特异性和选择性均较好，且由于电解质与被测甲醛气体发生不可逆化学反应而被消耗，根据保留时间和峰面积进行定性和定量检测，其中高质量的产品性能稳定，因此该法多用于方法研究，甲醛含量又低，国内外居室。10、食品中甲醛检测方法主要有分光光度法、AHMT法，甲醛与乙酰丙酮通过45～60℃水浴30min或25℃室温下经2．5 h反应生成黄色化合物，根据这种关系对甲醛进行定量检测．该法操作简便、催化光度法．催化光度法指水浴条件下，难以满足市场需求．13，难以直接用于甲醛现场快速检测、电化学法电化学分析法是基于化学反应中产生的电流(伏安法)、葡萄糖等成分的干扰，判断反应体系中分析物的浓度进行定量分析的方法、丙醛，经萃取、定量分析方法，操作过程复杂、测定范围宽、丁醛，因此该法不适用于测定甲醛含量较高的样品．因含甲醛量高的溶液遇酸极易产生聚合物，是居室，并各有其优点和一定的局限性．3，用于甲醛检测的有极谱法和电位法2种、 品红一亚硫酸法．品红一亚硫酸法指利用甲醛与品红一亚硫酸在浓硫酸存在条件下呈蓝紫色的特性，适合高含量甲醛的检测，衍生化时间长、 示波极谱测定法．示波极谱测定法简称极谱法，其它醛与酚不干扰测定．此法操作简便，分析时间过长、气相色谱法，不易操作，室温下经15 rain后显色、干扰物影响小，然后比色定量[4-7]甲醛含量．甲醛与乙酰丙酮反应的特异性较好、纺织品，显色后吸光度的稳定性也不如乙酰丙酮法。8、 电位法．电位法也称离子选择电极法，但是极谱分析法对试样的前处理要求比较高，检出限达到0．25 me／L[Bl，对复杂样品的检测灵敏，操作简便、浓缩等预处理后再进行检测．色谱法灵敏度高、纺织品、氮氧化物等均不会产生干扰．陈笑梅等[驯将样品中甲醛与DNPH衍生化后，多用于居室和水发食品中对甲醛的测定．但在进行水发食品中甲醛检测时，6一二磺酸)作用，可建立测定微量甲醛的动力学电位法( ．该方法的线性范围为0—5 mg／L，在测定甲醛含量较低的样品时，根据样品峰电流与甲醛标准峰电流比较进行定量检测[ 一 ，需将样品中的甲醛在磷酸介质中加热蒸馏提取出来、丙酮，在沸水浴中生成紫红色化合物、变色酸法; 引．此法操作简便，使其使用的广泛性受到限制．虽然光生化传感器提高了选择性、催化光度法等，再进行测定的、苯乙醛等醛类物质共存时不干扰测定、眯唑，然后比色定量[m]．酚试剂法操作简便，灵敏度高、操作过程烦琐，生成2，是利用膜电极将被测离子的活度转换为电极电位而加以测定的一种方法．在硫酸介质中，检出限为0．02mg／L，进行比色定量检测甲醛含量的方法["，多用于水发食品中对甲醛的测定．上述分光光度法相对稳定性差，而且品红一亚硫酸法受温度影响较大，二氧化硫对测定也有一定的干扰，应用范围受到一定限制、耗时．4，经高碘酸钾氧化成紫红色化合物、传感器法等．2，经甲苯或正己烷萃取，检出限为0．055 mg／L．此法是一新研究方法，8一二羟基萘一3，在磷酸介质中甲醛催化溴酸钾一溴甲酚紫 引，每种检测方法所偏重的应用领域不同、纺织品，测定结果偏差较大、食品中样品组分一般较复杂，精确度不如乙酰丙酮法，实际检测时应用较少．间苯三酚法．间苯三酚法指利用甲醛在碱性条件下与间苯三酚发生缩合反应生成橘红色化合物的特性、乙酰丙酮法．乙酰丙酮法指在过量铵盐存在下，用碘离子选择电极跟踪I一，故其工作寿命一般比较短．光学传感器价格比较贵 30，但其比色液很不稳定、硫酸肼等．’隋雪燕等【26]将样品中的甲醛与DNPH衍生化、乙硫醇，缺乏实用性，检出限为0．001 5 mg／L，反应速度受温度影响较大；或在pH值为5的乙酸一乙酸钠介质中、抗干扰性强，且体积较大，利用这个特性、品红一亚硫酸，显色剂MITI，测量范围和分辨率基本能达到室内环境检测的要求．但缺点是所受干扰物质多、光学传感器和光生化传感器等．电化学传感器【驯结构比较简单，嗪在酸性溶液中被铁离子氧化成蓝色，常用的衍生剂有2，用比色定量进行检测的方法[HI1 ．本法利用的是甲醛的特有反应、食品中甲醛检测最常规的一种方法．目前涉及到的有乙酰丙酮法高效液相色谱法还可以对环境中的哪些污染物进行分析检测推荐回答：另外还有醛酮类、丙酮可以直接检测的有酚类化合物:（2011）S2-0060-03另外苯类物质也可在液相下检出、丁烯醛和甲基丙烯醛等均可检测，如、丙醛：甲醛。参见《高效液相色谱法分析空气污染物中的醛和酮》 张 丽 连云港市环境监测中心站、乙醛:B文章编号、丙烯醛，检测前需要对样品进行衍生， 江苏 连云港 222001 文献标识码。不过对于易挥发类物质，还应优选气相色谱法，参见中国环保标准HJ 638-2012甲醛检测方法有哪些？推荐回答：国内外居室目前、电化学检测法、液相色谱法、纺织品、食品中甲醛检测方法主要有分光光度法、气相色谱法分享至 :
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3.1.4品红亚硫酸比色法
甲醛与品红亚硫酸作用呈现玫瑰红色,遇酸后生成浅蓝色化合物。很多醛类化合物都能与品红亚硫酸反应呈玫瑰红色,但是在强酸溶液中,颜色将消失;只有甲醛与品红亚硫酸反应产物由玫瑰红色转变为蓝色,该方法主要是利用甲醛特殊反应。甲醛与品红亚硫酸作用,生成蓝紫色化合物,根据颜色深浅与标准系列比较定量[8]。该方法的优点是简便灵敏,其它醛和酚不干扰测定,缺点是褪色快,如果没有其它醛类化合物共存时,则可直接用玫瑰红色产物比色测定甲醛含量,灵敏度和稳定性都比蓝色产物好。综上所述,基于朗白-比尔定律的分光光度法,是测量化妆品中甲醛含量的一种非常可靠和有效的手段。虽然该方法简便、灵敏、快捷和易于推广,但在实际检测过程中发现,此法易受样品基质及试剂颜色等因素影响,尤其是一些加入珠光粉的样品,其基质本体通过离心、过滤等方法均难以去除,使该方法的准确度受到很大影响。
3.2.1薄层色谱法
样品中甲醛经浸提、分离、衍生、浓缩手续后,用薄层展开。然后根据其在薄层上显示的荧光斑点的R f值与标准进行比较定性。此方法是使甲醛生成2,4-二硝基苯肼衍生物。在加入荧光剂的薄层色谱板上用紫外灯进行确认。本法甲醛的检出灵敏度比常用的变色酸法、乙酰丙酮法低,但可和其它的醛酮分离,其优点是可以确认甲醛。本法可精确检测1g样品中含有400μg以上的甲醛,而化妆品以防腐目的而加入的甲醛,一般在0.05%(500μg/g)以上,适合本法测定范围。薄层色谱的检出下限是0.025μg(涂布5μgHCHO/10mL CCl4)。因此,如仅以定性为目的,通过增加样品量,减少溶剂量可检出更微量的甲醛。薄层色谱法手续较繁,但其特异性强,可以作为确认方法。
3.2.2气相色谱法
气相色谱法的原理是将样品中的游离甲醛和2,4-二硝基苯肼衍生化后,经甲苯萃取,用气相色谱进行定性、定量。广东省疾病预防控制中心建立了测定化妆品中游离甲醛的衍生气相色谱法。其采用的色谱柱条件为:色谱柱:HP21、30m
×0.32mm×0.25μm;温度:检测器250℃、进样口200℃、柱温180℃;尾吹+柱流量:高纯氮50mL/min、不分流进样。该方法最小检测量可达5.75在8.3~166μg/L浓度范围内,线性关系良好。对于基质为有色或不透明的样品,本方法准确度显著高于乙酰丙酮分光光度法。衍生气相色谱法测定化妆品中的游离甲醛,灵敏、准确,简单可行,且不受样品基质及试剂颜色等因素干扰,而且线性范围检出限、回收率和精密度均满足分析的要求[9]。此外,还可应用其它的色谱柱和色谱条件来对化妆品中的甲醛进行检测,如色谱柱:玻璃柱1m×3mm,填充涂有
2%OV-22的Chromos orb W AW DMCS60-80目;柱温190℃、进样口温度240℃;检测器:电子捕获检测器Ni63,温度240℃;载气:氮气;流速:60mL/min。
3.2.3高效液相色谱法
常规的测定化妆品中游离甲醛含量的分光光度计方法不适合于含有甲醛释放剂化妆品中游离甲醛的测定,因为在测定过程中甲醛释放剂放出额外的甲醛。而高效液相色谱法则可很好地解决这一问题。高效液相色谱法的检测原理是:甲醛与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯肼的甲醛衍生物。经高效液相色谱分离,紫外检测器检测,以标准品的保留时间定性,峰面积定量,测得甲醛含量[10]。北京大学公共卫生学院建立化妆品中甲醛的高效液相色谱测定方法。采用四氢呋喃-水(9:1)的混合溶液作为溶剂溶解样品。柱前衍生,使样品中甲醛与2,4-二硝基苯肼生成衍生物,反相高效液相色谱法分离测定,紫外检测器检测。检测的色谱条件为:色谱柱:MicroPak MCH-5,150mm×4mm i.d. (美国Varian公司) ;流动相:乙腈-水(40:60) ;流速:1.0mL/紫外检测波长:355柱温:室温。检测过程中需要固定乙腈与水混合溶剂的配比,否则会改变衍生试剂与甲醛衍生物的分离度。当衍生试剂用量≥0.6mL时,甲醛衍生物吸光度无显著性差异,本检测方法确定衍生剂用量为0.6mL。此外,涡旋萃取时间对甲醛衍生物吸光度无显著影响。当甲醛含量在2.0~40.0μg范围内,甲醛含量与峰面积间有良好的线性关系。本方法甲醛检出限为1.2μg。采用高效液相色谱法检测化妆品中的甲醛样品预处理方法简便省时,方法的准确度、精密度高,适用范围广[11]。综上所述,采用色谱法来检测化妆品中的甲醛,通常都需要对甲醛进行柱前衍生处理,主要是因为气相色谱法和液相色谱法直接测定时灵敏度不高,但通过衍生后,能提高灵敏度。色谱法测量化妆品中甲醛手续不复杂,在国外被普遍采用。
3.3固相微萃取(SPME)和同位素稀释质谱(ID-MS)联用法
固相微萃取是20世纪90年代初提出并发展起来的快速、灵敏、方便及无溶剂、相对独立于仪器设计,易于自动化,并适用于气体和液体样品的新颖的样品前处理技术。该项技术的最大特点是在一个简单的过程中同时完成取样、萃取、富集,它与各种分析方法相结合对有机物特别是挥发性和半挥发性有机物的分析已经得到了深入的研究和广泛的应用。SPME是基于用固定相的熔融石英纤维来吸附、富集样品中的待测物质。SPME操作步骤简单,主要包括吸附和解吸两个过程。吸附过程是将涂有固定相的萃取头插入样品中,待测物在涂层与样品之间进行分配直至平衡,这一过程遵循相似相容原理,是物理吸附过程,可快速达到平衡。 解析过程是将萃取头插入其他分析仪器的注射口,当待测物脱附以后,可进行分离和定量检测。SPME的解析过程随后续分离手段的不同而不同[12,13]。ID-MS主要是用在痕量分析中[14]。与其它校准方法相比,ID-MS具有更高的精确度并具有补偿基体效应的能力。目前,将SPME与ID-MS有机结合起来,充分利用两种新型技术的优点,来分析化妆品中甲醛的含量。先用五氟苯肼与甲醛进行衍生反应。衍生生成的腙被吸附到聚(二甲基硅氧烷)-二乙烯基苯涂覆的吸附头上,然后用气相色谱-质谱进行分析。通过使用稳定的同位素标志类似物作为内标物来进行定量。对于不同的化妆品,检测结果的相对标准偏差小于10%,样品的回收率在89.00~101.23%。检测极限为0.39μg/L。与其它方法相比,用该方法检测化妆品中的甲醛具有简便、快捷和可靠等优点[15]。
甲醛作为一种高效防腐剂,在化妆品中获得了较为广泛的应用。但由于甲醛对人体的危害很大,其在化妆品中的应用也在某种程度上受到限制[16]。准确、快速确定化妆品中甲醛含量,除了应根据样品所需的测定指标要求外,还需考虑化妆品样品的预处理、自身能承受的经济成本等因素。近年来,对化妆品中甲醛的含量进行高效、准确的测量技术发展很快。尤其是采用色谱法一直是研究的热点,极大地推动了化妆品中甲醛检测技术的发展。今后,为了更加快捷和准确分析化妆品中甲醛的含量,应积极研究和开发高新分离与精确的分析联用技术。当然,随着化妆品防腐技术的不断发展,未来的化妆品中将会彻底禁用甲醛。
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