小木虫 --- 500万硕博科研人员喜爱的学术科研平台
&&查看话题
接合转移具体操作过程，请大家看看步骤有没有不妥的地方。
一，大肠杆菌的复活就不谈了。。
二，链霉菌的热激和预萌发
　　１.链霉菌新鲜孢子悬浮于５ｍＬ预萌发液中。
　　２．５０℃水浴热激１０分钟后迅速放入冰中５分钟。
　　３.在加入等体积的孢子预萌发液
　　４．３７℃预萌发培养３小时。
　　５.用等体积无菌ｄｄ水洗涤孢子，１ｍｌｄｄ水重悬浮备用。
　　７.就是跟大肠杆菌按不同比例混合涂布了
　　８.用含有４０μｇ／ｍＬ萘啶酮酸和８μｇ／ｍＬ阿伯拉抗生素的１ｍＬ无菌水覆盖培养基。
那么我想问一下，覆盖的４０μｇ／ｍＬ萘啶酮酸和８μｇ／ｍＬ阿伯拉的浓度指的是什么？是萘啶酮酸和阿伯拉在一毫升无菌水里的浓度，还是指的是１ｍｌ培养基加４０μｇ的萘啶酮酸？再就是　这个方法，热激之后还要放在冰里５分钟，但是链霉菌操作手册上并没有这一步，有知道为什么的的　？
大哥。。。您终于来了。。。之前就是用这个方法做的。。成功了，只不过现在用的质粒和之前的不一样了。。。在就是2×YT培养基怎么配置啊 ？之前师姐说用蒸馏水洗就好了。。再就是洗完离心的时候 孢子总是有悬浮。。。这个怎么处理啊 ？
这和我的孢子悬浮液是一样的配方。。就是我的没有氯化钠。用的是氯化钙。。。用水洗可以不？
再就是既然配方是一样的，那那个2X是什么意思？我之前一直理解的是浓度翻倍。。。我本来是想把浓度翻倍的。。。看样子不用翻倍了
额。。。我洗孢子 是 预培养完了才洗的& &所以。。咱们的步骤是不是不一样啊 ？
好的。。谢谢。。萌发机理是什么&&您知道吗？我在这方面水平很低。。希望您能帮助一下。。。
再就是 国庆节前，我有一株菌用我写的方法已经做成功了，不过我还这么问是想让我的方法给完善一点，再就是让自己更明白一下原理或是理论方面的东西，让自己知其然，更知其所以然。。。嘿嘿。。。所以，还希望您能 不厌弃烦的指点一下。。。（不过做成过的那株菌不知道为什么，也许是转接次数太多吧，没有原来的抑菌活性了，，哎。。。不过我还有其他菌。。）
孢子萌发形成菌丝体，这样才长出性纤毛，结合转移才会发生，用菌丝体做结合转移也可以的，具体原理，您在查查。我在微生物所做链霉菌的，基本就了解这么多，哈...
好的。。谢谢
接合转移所获得的接合菌株产物没有活性的事我也遇见过，你也可以通过HPLC检测确定一下产物组分，如果确实没有产物了那就放弃吧！因为往菌里导入一个质粒不论是游离的还是整合的，对菌产生的影响都是未知的。
我意思是。。导入之前活性就没了，师姐做的时候还有，我做了以后就没有了。。。尴尬。。。再就是，接合转移率怎么算啊 ？就是大肠杆菌数量和孢子数量怎么计数啊？？问这个问题是不是显得我很低级啊。。。;););)
请问一下接合转移率怎么算啊 ？就是大肠杆菌数量和孢子数量怎么计数啊？？问这个问题是不是显得我很低级啊。。。;););)
不低级啊，这个我也不太清楚啊，见笑，首先长出来的克隆先确定有多少是结合转移阳性菌株，那些不是结合转移菌株；另外是不是大肠杆菌数量和孢子数量等比例混合后，长出结合转移个数，我一般做结合转移重组，鉴定是重组正确，就进行下步了 ...&&haha
差不多吧。。。再就是&&对于 序列比对什么的 你懂吗？就是DNA序列相似度达到多少的时候可以说同源什么。。。
浏览器进程
打开微信扫一扫
随时随地聊科研设备迁移方案_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
设备迁移方案
上传于||暂无简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用0下载券
想免费下载更多文档？
定制HR最喜欢的简历
下载文档到电脑，查找使用更方便
还剩2页未读，继续阅读
定制HR最喜欢的简历
你可能喜欢查看: 14439|回复: 25
[移动TD及固网]
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-11 15:52
大家有没有注意过移动的呼叫转移功能，在10086及网站上只能设置呼叫转移到本省的移动号码上，不能设置转移到固定电话或其他运营商手机上，
这个功能以前是有的
投诉10086说要在客户自己的手机上可以设置转移到固定电话或其他运营商手机
如果自己手机带着需要设置转移到固定电话或其他运营商手机
求如何解决，
声望0 精华0帖子八豆3519 积分3899注册时间最后登录
卖盗版光盘的
<em id="authorposton14-2-11 18:09
功 能& && && && && &设 置& && && && && && & 取 消& && && && && && &&&查 询
无条件转移 **21*电话号码#& && & ##21#& && && && && &*#21#
无信号转移&&**62*电话号码#& && &##62#& && && && && &*#62#
无应答转移 **61*电话号码*10*响铃时间#& &##61#& &*#61#
遇忙转移 **67*电话号码#& && && & ##67#& && && && && & *#67#
声望5 精华0帖子八豆12205 积分15049注册时间最后登录
电脑公司总经理
<em id="authorposton14-2-12 09:52
那就在手机上设置好了。除非你不喜欢把卡随身带着
http://vcups.in/cAt
声望0 精华0帖子八豆2544 积分2666注册时间最后登录
珠江路上卖盒饭的
<em id="authorposton14-2-12 09:58
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 13:38
blizzard 发表于
那就在手机上设置好了。除非你不喜欢把卡随身带着
手机带着需要设置呼叫转移么，手机忘带的时候需要呼叫转移，你手头只有固定电话，怎么办啊
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 13:57
lycswty 发表于
声望0 精华0帖子八豆6492 积分14370注册时间最后登录
柜台小老板
<em id="authorposton14-2-12 14:30
rockwell 发表于
移动手机 的 呼叫转移 计费 视同本机呼出, 而且不在任何套餐内
声望0 精华0帖子八豆2451 积分2533注册时间最后登录
珠江路上卖盒饭的
<em id="authorposton14-2-12 15:14
计费每分钟1毛钱
声望5 精华0帖子八豆9314 积分10460注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 17:08
呼叫转移每分钟3毛吧
小型机、存储、数据库等巡检优化、应急抢修
声望5 精华0帖子八豆9314 积分10460注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 17:08
我记得手机不带可以直接在网上营业厅设置，我以前搞过的
小型机、存储、数据库等巡检优化、应急抢修
声望5 精华0帖子八豆12205 积分15049注册时间最后登录
电脑公司总经理
<em id="authorposton14-2-12 17:11
rockwell 发表于
手机带着需要设置呼叫转移么，手机忘带的时候需要呼叫转移，你手头只有固定电话，怎么办啊 ...
偶尔还真需要，比如有时候我会手机放那充电，然后呼叫转移到别的电话。
不过你说的情况还真不好办，或者你设置语音信箱，让人家给你留言。不过也不是太完美
http://vcups.in/cAt
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 17:16
易讯 发表于
移动手机 的 呼叫转移 计费 视同本机呼出, 而且不在任何套餐内
功能设置免费，通话收费
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 17:17
njrq 发表于
我记得手机不带可以直接在网上营业厅设置，我以前搞过的
以前是在网厅可以的，现在不行了
我以前也设置过
声望6 精华1帖子八豆10862 积分17665注册时间最后登录
电脑公司总经理
<em id="authorposton14-2-12 17:18
明白楼主意思，大前提是手机忘带了
絮絮叨叨半天没有说，呼叫转移极少用，网厅确实只能转移动，貌似电信网厅可以随意转
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 17:22
sooyun 发表于
明白楼主意思，大前提是手机忘带了
絮絮叨叨半天没有说，呼叫转移极少用，网厅确实只能转移动，貌 ...
电信和联通的网厅都可以设置，
移动的以前也可以
现在阉割了，不知出于什么目的
投诉移动，移动说这样设置起到保护用户号码资信息，我问他如何保护，举个例子看看，他就一直说很抱歉给你使用带来不便，
声望6 精华1帖子八豆11773 积分14240注册时间最后登录
柜台小老板
<em id="authorposton14-2-12 17:30
此外，难道你们不知道可以呼转到短信呼吗，，查岗利器啊
声望5 精华0帖子八豆8751 积分11751注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-12 19:03
我有天晚上sim卡坏了，想转移到老婆联通号上，10086硬不给转，7456
声望0 精华0帖子八豆1670 积分1723注册时间最后登录
珠江路上卖盒饭的
<em id="authorposton14-2-13 07:37
本帖最后由 默岩 于
07:42 编辑
在国内使用呼叫转移：
在归属地，呼叫转移至归属地的手机、固话的资费为1毛每分钟。
在非归属地，有条件呼叫转移至手机、固话的资费为6毛每分钟。
在非归属地，无条件呼叫转移至归属地手机、固话的资费仍然为1毛每分钟。
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-13 08:57
tomcat_ 发表于
我有天晚上sim卡坏了，想转移到老婆联通号上，10086硬不给转，7456
是的啊，碰到这种情况是死循环啊
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-13 08:58
已去**投诉移动，参照的是日信息产业部令第9号《公用电信网间互联管理规定》的要求
声望0 精华0帖子八豆7599 积分7870注册时间最后登录
电脑公司销售员
<em id="authorposton14-2-13 11:20
我有过两次手机忘带，致电10086，验证了个人信息后，帮我呼转到固定电话。
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-13 13:41
xcqvip 发表于
我有过两次手机忘带，致电10086，验证了个人信息后，帮我呼转到固定电话。 ...
以前确切是可以的，我13年11月份有此手机没电，我想呼叫转移到我联通的手机上，发现就不行了
声望6 精华1帖子八豆58287 积分60140注册时间最后登录
<em id="authorposton14-2-13 17:10
声望5 精华0帖子八豆8301 积分11186注册时间最后登录
头像被屏蔽
<em id="authorposton14-2-13 20:03
提示: 作者被禁止或删除 内容自动屏蔽
声望0 精华0帖子八豆8009 积分9789注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-13 23:11
以前可以 现在被限制了 我上次带了电信手机 忘带移动手机 10086不给转电信号 气的一笔
声望5 精华0帖子八豆9205 积分9768注册时间最后登录
电脑公司部门经理
<em id="authorposton14-2-14 08:54
坚决投诉移动！！！！！霸王条款
论坛元老，论坛创始到2004年间注册且发帖数大于200的论坛用户。
累计在线时长超过1000小时
国货当自强
国产车主，用户在指定帖子中申请获得
十二生肖o马
参加神秘活动获得
江苏电信翼友会会员
文艺马叉虫
法系车主，用户在指定帖子中申请获得
别逼我变形
美系车主，用户在指定帖子中申请获得
Powered by}