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【求助】关于Realtime-PCR的数据分析、作图的问题
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这个帖子发布于4年零109天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我做的相对定量PCR 采用RQ＝2-△△CT 进行计算相对表达量现在做数据统计分析画图的时候遇到了几个问题，请教如下：1、既然是相对定量，那么对照组的表达就默认为是1，实验组的表达量是相对于对照组是1的情况下的表达倍数（分数）关系，那么在绘图的时候 我理解的对照组就应该只是1 没有sd的，但是我看了一些文献的对照组是1 但是也有sd 请问这是怎么得来的？2、同样的情况，我也有在文献中看到对照采用此种RQ的计算方法，但是对照组并不是1，有的是0.5 等这样离1很远的数，也有sd 请问在这是中怎么得来的？例如下图，sc为对照组，并且请问（AU）是表示什么？3、在用SPSS软件进行统计分析的时候，我想既然是两组，应该用独立T检验吧，但是如果是这样的话，就如我上面所说的情况，对照组是1，且没有sd值，那么统计的时候对照组可以每个值都填1 ，使得第二组的sd为0，统计两组差异么？或者可以用单样本t检验 检验值设置为1么？非常非常期待各位战友的帮助解惑，非常感谢！
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kxy1212 edited on
急求高手指导！~~~各位高手 ~~~
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美女我有问题想问问你，你的mRNA相对表达量是用哪个数据统计的？不是用△CT值来统计的么？sd值是什么意思？
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wybysvivi 美女我有问题想问问你，你的mRNA相对表达量是用哪个数据统计的？不是用△CT值来统计的么？sd值是什么意思？用RQ统计的 sd是标准差
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LZ,问题解决了吗？急需跟你交流这样的问题呀！
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同样的问题亟待回答，楼主怎么联系？我最近做PCR，结果是有了，也遇到数据统计，不知如何下手了。如果问题解决，可否联系下，交流下统计方法？QQ：，万分感谢！！！急等发文章咧。。
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同样的问题，楼主我也不知道如何下手了，可否请教下，也急发文章。万分感谢！
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如果是RQ统计的，是不是对照组的RQ值都是1呢？但看有的文章中对照组RQ值也都大于1 啊？求指导，拜托了！
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遇到同样的问题啊 有没有解决呢 楼主
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急求大神应贴!!!!!
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kxy1212 我做的相对定量PCR 采用RQ＝2-△△CT 进行计算相对表达量现在做数据统计分析画图的时候遇到了几个问题，请教如下：1、既然是相对定量，那么对照组的表达就默认为是1，实验组的表达量是相对于对照组是1的情况下的表达倍数（分数）关系，那么在绘图的时候 我理解的对照组就应该只是1 没有sd的，但是我看了一些文献的对照组是1 但是也有sd 请问这是怎么得来的？2、同样的情况，我也有在文献中看到对照采用此种RQ的计算方法，但是对照组并不是1，有的是0.5 等这样离1很远的数，也有sd 请问在这是中怎么得来的？例如下图，sc为对照组，并且请问（AU）是表示什么？3、在用SPSS软件进行统计分析的时候，我想既然是两组，应该用独立T检验吧，但是如果是这样的话，就如我上面所说的情况，对照组是1，且没有sd值，那么统计的时候对照组可以每个值都填1 ，使得第二组的sd为0，统计两组差异么？或者可以用单样本t检验 检验值设置为1么？非常非常期待各位战友的帮助解惑，非常感谢！
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同求 ，纵坐标 是什么 ？？
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相同的疑惑，不知楼主后来是怎么处理的呢
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biyuxiaoai 遇到同样的问题啊 有没有解决呢 楼主请问你的这一块是怎么处理的啊？我遇到相同的问题，好捉急
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zzhdongshuling kxy1212 我做的相对定量PCR 采用RQ＝2-△△CT 进行计算相对表达量现在做数据统计分析画图的时候遇到了几个问题，请教如下：1、既然是相对定量，那么对照组的表达就默认为是1，实验组的表达量是相对于对照组是1的情况下的表达倍数（分数）关系，那么在绘图的时候 我理解的对照组就应该只是1 没有sd的，但是我看了一些文献的对照组是1 但是也有sd 请问这是怎么得来的？2、同样的情况，我也有在文献中看到对照采用此种RQ的计算方法，但是对照组并不是1，有的是0.5 等这样离1很远的数，也有sd 请问在这是中怎么得来的？例如下图，sc为对照组，并且请问（AU）是表示什么？3、在用SPSS软件进行统计分析的时候，我想既然是两组，应该用独立T检验吧，但是如果是这样的话，就如我上面所说的情况，对照组是1，且没有sd值，那么统计的时候对照组可以每个值都填1 ，使得第二组的sd为0，统计两组差异么？或者可以用单样本t检验 检验值设置为1么？非常非常期待各位战友的帮助解惑，非常感谢！楼主，我也有这个问题，RQ＝2-△△CT算出来不是一个比值吗？
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问题解决中
问题提出时间： 18:18:14
如何分析real time PCR的数据结果
标准偏差(SD)
ACTIN1 WT1 18.26 18.50 0.276
ACTIN1 WT1 18.80 18.50 0.276
ACTIN1 WT1 18.44 18.50 0.276
OsEF1 WT1 16.73 16.86 0.259
OsEF1 WT1 17.16 16.86 0.259
OsEF1 WT1 16.68 16.86 0.259
ACTIN1 Osef1-1 19.76 19.60 0.141
ACTIN1 Osef1-1 19.48 19.60 0.141
ACTIN1 Osef1-1 19.58 19.60 0.141
OsEF1 Osef1-1 30.90 31.59 0.603
OsEF1 Osef1-1 32.04 31.59 0.603
OsEF1 Osef1-1 31.82 31.59 0.603
请问我如何分析得到的结果,我想做相对定量,还有最后那个误差的正负值如何计算??
注,每个样品做了三次重复,其中ACTIN1是设置的control
行业分类：生物、医药
回答时间： 11:50:39
绝对定量是是根据扩增结果计算待测基因Ct值与β-actin Ct值之比值, 即为待测基因mRNA的相对表达量，一般可以比值0.8-1.2表示无变化，>1.2或1.5或<0.7表示有显著差异。同时，绝对定量是用已知的标准曲线来推算未知样本的量，将标准品稀释至不同浓度，作为模板进行PCR 反应。以标准品拷贝数的对数值为横坐标， 以测得的CT值为纵坐标，绘制标准曲线，对未知样品进行定量时，根据未知样品的CT值， 即可在标准曲线中得到样品的拷贝数。请参考有关专著和附件
共0条评论&
回答时间： 12:18:14
绝对定量是是根据扩增结果计算待测基因Ct值与β-actin Ct值之比值, 即为待测基因mRNA的相对表达量，一般可以比值0.8-1.2表示无变化，>1.2或1.5或<0.7表示有显著差异。同时，绝对定量是用已知的标准曲线来推算未知样本的量，将标准品稀释至不同浓度，作为模板进行PCR 反应。以标准品拷贝数的对数值为横坐标， 以测得的CT值为纵坐标，绘制标准曲线，对未知样品进行定量时，根据未知样品的CT值， 即可在标准曲线中得到样品的拷贝数。请参考有关专著和附件
实时荧光定量PCR的发展和数据分析.pdf
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回答时间： 15:44:11
绝对定量是是根据扩增结果计算待测基因Ct值与β-actin Ct值之比值, 即为待测基因mRNA的相对表达量，一般可以比值0.8-1.2表示无变化，>1.2或1.5或<0.7表示有显著差异。同时，绝对定量是用已知的标准曲线来推算未知样本的量，将标准品稀释至不同浓度，作为模板进行PCR 反应。以标准品拷贝数的对数值为横坐标， 以测得的CT值为纵坐标，绘制标准曲线，对未知样品进行定量时，根据未知样品的CT值， 即可在标准曲线中得到样品的拷贝数。请参考有关专著和附件
实时荧光定量PCR的发展和数据分析.pdf
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这个问题已提出一个月以上，回答功能关闭，如需求助可重新
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