Phospho-PKCδ/θ (Ser643/676) Antibody #9376-Cell Signaling Technology
Product Pathways - Ca / cAMP / Lipid Signaling
Phospho-PKCδ/θ (Ser643/676) Antibody #9376
PhosphoSitePlus
protein, site, and accession data:
Applications
Species-Reactivity
Sensitivity
Human,Mouse,Rat,Monkey,Xenopus,
Endogenous
Species cross-reactivity is determined by western blot.
Applications Key:
W=Western Blotting,
IHC-P=Immunohistochemistry (Paraffin),
Specificity / Sensitivity
Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676) Antibody detects endogenous levels of PKCdelta only when phosphorylated at serine 643, and PKCtheta only when phosphorylated at serine 676. This antibody does not cross-react with the phosphorylated PKC isoforms alpha, beta, gamma or epsilon.Phospho-PKCδ/θ (Ser643/676)抗体识别内源性的Ser643位点磷酸化的PKCδ蛋白和Ser676磷酸化位点的PKCθ蛋白。此抗体与其它磷酸化的PKC亚型α, β, γ或ε没有交叉反应。
Source / Purification
Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Ser643 of rat PKCdelta. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.该多克隆抗体用与大鼠PKCδ中Ser643位点附近的氨基酸序列对应的人工合成磷酸化的肽段免疫动物制备。该抗体使用蛋白A和蛋白亲和层析纯化而得。
Phosphorylation of PKCdelta. PKCdelta的磷酸化
IHC-P (paraffin)
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human breast carcinoma, using Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676) Antibody.对石蜡包埋的人乳腺癌使用Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676)抗体进行免疫组化分析。
Western Blotting
Western blot analysis of Baculovirus expressed PKC isoforms alpha, beta, gamma, delta and epsilon, untreated or lambda protein phosphatase-treated, using Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676) Antibody (upper) or PKCalpha, -beta, -gamma, -delta and -epsilon antibodies (lower).对Baculovirus表达的PKC亚型alpha, beta, gamma, delta和 epsilon，未处理或λ磷酸酶处理，使用Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676)抗体（上图）或PKCalpha, -beta, -gamma, -delta and -epsilon抗体（下图）进行Western blot分析。
Western Blotting
Western blot analysis of extracts from U-937 cells, untreated or TPA-treated (0.2 uM), using Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676) Antibody.对U-937细胞，未处理或0.2uM TPA处理，使用Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676)抗体进行Western blot分析。
IHC-P (paraffin)
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human lung carcinoma, using Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676). Antibody.对石蜡包埋的人肺癌使用Phospho-PKCdelta/theta (Ser643/676)抗体进行免疫组化分析。
Background
Activation of protein kinase C (PKC) is one of the earliest events in a cascade that controls a variety of cellular responses, including secretion, gene expression, proliferation, and muscle contraction (1,2). PKC isoforms belong to three groups based on calcium dependency and activators. Classical PKCs are calcium-dependent via their C2 domains and are activated by phosphatidylserine (PS), diacylglycerol (DAG), and phorbol esters (TPA, PMA) through their cysteine-rich C1 domains. Both novel and atypical PKCs are calcium-independent, but only novel PKCs are activated by PS, DAG, and phorbol esters (3-5). Members of these three PKC groups contain a pseudo-substrate or autoinhibitory domain that binds to substrate-binding sites in the catalytic domain to prevent activation in the absence of cofactors or activators. Control of PKC activity is regulated through three distinct phosphorylation events. Phosphorylation occurs in vivo at Thr500 in the activation loop, at Thr641 through autophosphorylation, and at the carboxy-terminal hydrophobic site Ser660 (2). Atypical PKC isoforms lack hydrophobic region phosphorylation, which correlates with the presence of glutamic acid rather than the serine or threonine residues found in more typical PKC isoforms. The enzyme PDK1 or a close relative is responsible for PKC activation. A recent addition to the PKC superfamily is PKCμ (PKD), which is regulated by DAG and TPA through its C1 domain. PKD is distinguished by the presence of a PH domain and by its unique substrate recognition and Golgi localization (6). PKC-related kinases (PRK) lack the C1 domain and do not respond to DAG or phorbol esters. Phosphatidylinositol lipids activate PRKs, and small Rho-family GTPases bind to the homology region 1 (HR1) to regulate PRK kinase activity (7).蛋白激酶C（PKC）的激活是最早的级联事件之一，控制各种细胞反应，包括分泌、基因表达、细胞增殖和肌肉收缩（1,2）。PKC亚型属于基于钙依赖性和活化的三个群体。经典PKCs都是钙依赖性的，通过它们的C2结构域，由磷脂酰丝氨酸(PS)、甘油二酯(DAG)和佛波酯(TPA, PMA)通过其富含半胱氨酸的C1结构域激活。新型和非经典型PKCs都是非钙依赖性的，但只有新型PKCs可以被PS、DAG和佛波酯激活(3-5)。这三种PKC群的成员包含一个假底物或自抑制结构域，可以与催化区域的底物结合位点结合，以防止在缺少辅酶因子或激活剂的情况下激活。PKC活性的控制通过三个独特的磷酸化事件调节。在体内，通过自身磷酸化，磷酸化活化环中的苏氨酸500位点，641位点，和羧基末端的疏水性丝氨酸660位点（2）。非经典型PKC缺乏疏水性区域的磷酸化，与谷氨酸而不是在更多典型PKC亚型中发现的丝氨酸或苏氨酸残基有关。 PDK1或相关酶负责PKC的激活。最近PKCμ（PKD）成为PKC超家族新的一员，通过其C1结构域受DAG和TPA调节。PKD的特点是有一个PH结构域，并有其独特的底物识别和高尔基体定位（6）。PKC相关激酶（PRK）缺少C1域，不响应DAG或佛波醇酯。磷脂脂质激活PRKs，小Rho-家族GTP酶结合同源性区域1（HR1），以调节PRK激酶活性（7）。
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Tris Buffered Saline with Tween(R) 20 (TBST-10X)
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Cell Signaling Technology(R) is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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尊敬的老师您好，非常抱歉我们的在线订购功能还未开放，。PMA/TPA(PKC激活剂)
PMA/TPA(PKC激活剂)
&产品编号: S1819
&产品包装: 1mg
&产品价格: 409.00元
产品简介：
&&&&PMA也称TPA，全称为Phorbol-12-myristate-13-acetate(PMA)，或12-O-Tetradecanoylphorbol&13-acetate(TPA)，是一种最常用的佛波酯(phorbol ester)。PMA可以结合PKC，并激活PKC，随后导致一系列的细胞响应。PMA可以抑制Fas诱导的细胞凋亡，但又可以诱导HL-60细胞的凋亡。PMA在肝细胞中可以诱导iNOS的表达。PMA可以增强forskolin诱导的cAMP形成。PMA是一种促瘤剂，可以促进小鼠皮肤的成瘤。
&&&&PMA的分子量为616.84，分子式为C36H56O8，CAS Number：。本产品纯度大于99%。
&&&&本产品为进口分装，用DMSO配制，浓度为10mg/ml，共0.1ml。
包装清单：
PMA/TPA(PKC激活剂, 10mg/ml)
保存条件：
&&&&-20℃避光保存，半年有效。
注意事项：
&&&&本产品对人体有刺激性，操作时请注意适当防护。无直接致癌性报道，但有促进肿瘤形成的作用，需注意适当防护。
&&&&本产品在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
&&&&为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. PMA常见使用浓度范围为0.1-10μM，最常见的使用浓度为1μM。具体的最佳工作浓度请参考相关文&& 献，或根据实验目的，以及所培养的特定细胞和组织，通过实验进行摸索和优化。
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使用本产品的文献：
1. Zhang Q, Lu YQ, Jiang JK, Gu LH, Mou HZ
&& Chin Med J (Engl). ):2163-7.
2. Cheng ST, Hou W, Li SP, Yang SH, Liu YY, Jiang Z, Wang YH, Xiao J, Guo HL, Wang ZR
&& Biological Rhythm Research,2012Aug
3. Wang C, Li YJ, Zheng YQ, Feng B, Liu Y, Cao JM
&& Respir Physiol Neurobiol. 2012 Jul 31;183(1):10-4.细胞库/细胞培养
ELISA试剂盒
实验室仪器/设备
原辅料包材
体外检测试剂
&&PMA (TPA)/佛波酯/PKC activator/tumor promoter
PMA (TPA)/佛波酯/PKC activator/tumor promoter
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供应商信息
商家诚信度：
成立时间：2007年
入驻丁香通年限：9年
商家等级：金牌客户
产品信息完整度：55%
联系人：前尘生物
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电话：021-
传真：021-
地址：上海市徐汇区南丹东路18号12楼A座
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DXY All Rights Reserved.佛波酯到底是TPA还是PMA_百度知道
佛波酯到底是TPA还是PMA
提问者采纳
PKC是TPA的受体，反而影响细胞的信号传递;或phorbol-12-myristate-13-acetate，生理浓度的钙离子才起作用,PMA）是一种促肿瘤剂。PKC的活性依赖于钙离子和磷脂的存在，当TPA插入细胞膜后可以替代DAG而直接活化PKC，在激活PKC过程中与DAG起协同作用,TPA，可在很低尝试下模拟DAG，使PKC亲和力增至10-7M。乙酸豆塞外佛波酯（12-o-tertradecanoylphordol-13-acetate，但只有在磷脂代谢中间产物二酰基甘油（DAG）存在下，由于基结构与DAG相似。磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸（PIP2）在磷脂酶-C作用下水解生成DAG和IP3。IP3促进细胞内钙离子的释放。，活化PKC。当过高剂量TPA处理细胞可使靶细胞中PKC迅速耗竭。还是B，这是由于DAG能增加PKC对底物亲和力的缘故
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大鼠Th17/Treg流式检测
各位老师好！新手想问几个问题，谢谢！
1、Th17细胞都是要刺激的产生的，那会不会刺激出来的Th17细胞占CD4+的比值都是一样的多的？还是会根据疾病的不同，刺激出来的细胞量也有不同的？
2、我看到需PMA、离子霉素、莫能霉素刺激Th17细胞，请问需要三种一起刺激吗？还是可以选其中一或两种？
3、Th17细胞需要刺激，也就是说明我要分开测Th17、Treg细胞的，那么大鼠需要多少外周血量？（大鼠和人的血细胞压积相近吗？）
4、同型对照的问题：我看了倪老师之前一个回帖说“CD4+CD25+Foxp3+细胞不需同型，只需要再加一个CD45，有助于设门”是这样子的吗？还是要针对不同的实验有所不同？还有IL-17A抗体需要同型对照吗？
1、Th17不刺激当然也会有，但非常微量，太难测，所以还是需要刺激，至于刺激出的量，肯定不同的。
2、PMA和离子霉素是刺激，莫能霉素是阻断剂，按顺序使用：/bbs/thread-716-1-1.html
3、可以分开，最好分开，具体方案参见上面的链接。
4、对于这类低表达的指标，建议用FMO对照，例如你用CD4+CD25+Foxp3测Treg，那么用CD4、CD25作为FMO对照，同样IL17A也一样设置。 ...
1、Th17不刺激当然也会有，但非常微量，太难测，所以还是需要刺激，至于刺激出的量，肯定不同的。
2、PMA和离子霉素是刺激，莫能霉素是阻断剂，按顺序使用：
3、可以分开，最好分开，具体方案参见上面的链接。
4、对于这类低表达的指标，建议用FMO对照，例如你用CD4+CD25+Foxp3测Treg，那么用CD4、CD25作为FMO对照，同样IL17A也一样设置。
本帖最后由 倪shunlan 于
10:16 编辑
1、Th17不刺激当然也会有，但非常微量，太难测，所以还是需要刺激，至于刺激出的量，肯定不同的。
2、PMA和 ...
倪老师，请问PMA是佛波酯，还是丙二醇甲醚醋酸酯？应该是佛波酯，对吗？
佛波酯也称十四烷酰佛波醇乙酸酯，TPA或PMA是。、皮肤粘膜潜在致癌剂。应用：用于体外刺激T淋巴细胞增殖。经TPA刺激后，某些细胞转录因子，或膜表面分子表达增加。
老师，大鼠的细胞内因子也是由PMA和离子霉素刺激，莫能霉素阻断的，是吗？
老师，大鼠的细胞内因子也是由PMA和离子霉素刺激，莫能霉素阻断的，是吗？
谢谢！ ...
可以参考BD网站上的相关protocol，该Protocol是检测IL-4和IL-10的，但应该还是适用IL-17的：IL-4+ and IL-10+ rat cells:
Purified splenic CD4+ cells from an adult rat are stimulated with plate-bound anti-rat CD3 (clone G4.18, 25 ug/&&) and soluble anti-rat CD28 (clone JJ319, 2 ug/&&) for 2 days in culture together with recombinant rat IL-2 (10 ng/&&) and rrIL-4 (50 ng/&&), followed by a 3 day incubation with only rrIL-2 and rrIL-4. This is followed by a 4-6 hr stimulation with PMA (5 ng/ Sigma,) and ionomycin (500 ng/ Sigma) in the presence of a protein transport inhibitor. Alternatively, can restimulate with plate-bound anti-rat CD3 and soluble anti-rat CD28 for 4-6 hr in the presence of a protein transport inhibitor (either GolgiStop , or GolgiPlug ).
倪老师，请问PMA是佛波酯，还是丙二醇甲醚醋酸酯？应该是佛波酯，对吗？
佛波酯也称十四烷酰佛波醇乙酸酯 ...
PMA是佛波酯
PMA是佛波酯
谢谢你了！请问师兄（或师姐）你是做哪个细胞因子的的流式的？是做大鼠的吗？PMA、离子霉素、莫能霉素是多少量的？求指教。谢谢！
谢谢你了！请问师兄（或师姐）你是做哪个细胞因子的的流式的？是做大鼠的吗？PMA、离子霉素、莫能霉素是 ...
我做的是小鼠脾细胞，PMA终浓度0.025μg/ml,离子霉素终浓度1μg/ml。阻断剂买的是BD固定破膜试剂盒里自带的，BD555028,按照说明书里的参考用量。
我做Treg，标记有CD4、CD25、Foxp3。& &&&
对照能否加CD4，CD25同型对照，Foxp3就不加了，这样可以吗
我做Treg，标记有CD4、CD25、Foxp3。& &&&
对照能否加CD4，CD25同型对照，Foxp3就不加了，这样可以吗 ...
1管CD4、FoxP3
1管CD4、CD25
不用同型。
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