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α-黑素细胞刺激素类似物对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的治疗作用
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白血病相关基因的功能研究
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上海交通大学硕士学位论文
Palladin 稳定敲减HeLa 细胞株的成功构建 30
4. Palladin 的缺失引起有丝分裂的缺陷 (mitotic defects) 30
5. Palladin 的缺失导致纺锤体的错误定向 (spindle misorientation)
5. Palladin 的缺失在体外导致细胞分裂平面的异常 (misorientation of the plane of
cell division) 37
6. Palladin 的缺失降低星极微管 (astral microtubules)
的稳定性 40
7. Palladin 的缺失在体内导致神经组细胞纺锤体的错误定向 44
慢病毒载体介导HK1 基因沉默增加白血病细胞对化疗药物的敏感性49
实验材料与方法 54
实验材料 54
药物配置 54
质粒载体 54
仪器、耗材和试剂 56
实验方法 57
构建靶向人HK1 基因的shRNA 慢病毒载体 57
2.1.1 设计与合成人HK1 基因shRNA 寡核苷酸序列 57
2.1.2 制备双链DNA Oligo
2.1.3 慢病毒载体酶切 57
2.1.4 制备克隆 58
2.2 靶向慢病毒的包装 58
细胞增殖与活性检测 58
蛋白质印迹 (Western blot)
统计学处理 59
实验结果 60
阳性克隆行测序分析 60
上海交通大学硕士学位论文
Western blot 检测各组 U937 细胞中HK1 蛋白表达量 61
HK1 基因沉默增强急性髓细胞白血病细胞对化疗药物阿糖胞苷 (Ara C)
参考文献 64
上海交通大学硕士学位论文
第一部分 Palladin 参与调节纺锤体定向的功能研究
Palladin 也称RIG-K (Retinoic Acid Induced Gene K) 是一个微丝骨架相关蛋白，
我们发现细胞进入有丝分裂期后，palladin 蛋白在PAGE 胶上的泳动速率减慢，这提
示palladin 在有丝分裂期发生了某种
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