用primer5引物设计教程设计引物时参数都有什么作用

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品评校花校草,体验校园广场请问如何用Primer5设计扩增全长cDNA?(引物) - PCR实验 - 生物秀
标题: 请问如何用Primer5设计扩增全长cDNA?(引物)
摘要: [请问如何用Primer5设计扩增全长cDNA?(引物)] 他设计的引物好像是扩增的目的片段多长的都有? 关键词:[引物]……
他设计的引物好像是扩增的目的片段多长的都有?
回复在设计这样的引物时,不需要再去search了,只要直接截取全长c上游的一段序列以及与下游反向的一段序列即可,然后根据显示的各项参数情况使用编辑功能对引物的长度进行更改直到满意了为止!回复哦,这样呀,那什么时候才要scearch呢?回复在需要扩增特定的片段时引物在模板上的位置就已经基本确定了,最多只能通过调整其长度来达到较满意的结果(也可以根据实验的需要在其5‘端加接酶切位点);不用扩增特定片段时就可以用scearch来搜索比较好的引物对,比如做半定量表达时。回复哦,那调整引物长度可以用primer premier5吗?怎么用呢?我在其5‘段加酶切位点,可是到了序列末端他就不支持了?加不上去?分析引物的时候是不是要加完酶切位点再分析亚?回复可以的,只需要利用edit功能就可以实现,在需要加酶切位点时,可以在设计好一定长度的引物之后人为地加上去,若不放心可再用oligo软件分析一下,或者在primer preimer5.0中在你模板序列的末端人为补齐你需要设计的酶切位点的互补序列,然后对完整的引物的优劣进行分析; 需要学习使用引物设计,建议到以下页面下载primer preimer5.0中文说明书!
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