【求助/交流】求助关于荧光定量PCR的CT值问题_imooo软件程序bug解决方案
【求助/交流】求助关于荧光定量PCR的CT值问题
最近做荧光定量PCR实验，有一个疑问：CT值与DNA的稀释浓度有什么关系，是不是DNA浓度相差10倍，相对应的CT值就差1，他们之间有什么具体的对应关系吗？小弟初次做这实验，不太了解，请各位大虾帮帮忙！ 下载 tion+of+quantitative+real-time+PCR+experiments.pdf------解决方案--------------------1Ct值＝2倍------解决方案--------------------先看看再说:like:------解决方案--------------------2的N次方等于稀释倍数，N为Ct值------解决方案--------------------谢谢哦，赞一下------解决方案--------------------你好，我用了一个内参基因VATP16，ct值在27左右，这样能用吗
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淘豆网网友近日为您收集整理了关于荧光定量PCR技术1的文档，希望对您的工作和学习有所帮助。以下是文档介绍：主要内容?定量PCR与常规PCR的区别?荧光定量PCR的原理?常用的热循环仪?定量的方法?重复性和敏感度?应用?如何设计荧光定量PCR的方案荧光定量PCR与常规PCR的区别?常规PCR技术:?对PCR扩增反应的终产物进行定性及定量分析?荧光定量PCR技术:?对PCR扩增反应中每一个循环的产物?进行定量分析实时荧光定量PCR的特点?特异性更强?灵敏度高?可直接对产物进行定量?解决PCR污染问题?自动化程度高、操作简单realtimePCR的扩增曲线Ct值极具重现性PE公司在同一台PCR仪上对相同模板进行96次扩增的扩增曲线图Ct与初始模板的关系?固定循环数后,荧光信号与模板数成正比?固定荧光信号值后,模板数就与循环数成反比?初始DNA量越多,荧光达到阈值时所需要的循环数(Ct值)越少?起始模板的对数浓度与Ct呈线性关系,根据样品的Ct值就可计算出样品中所含的模板量0.000.501.001.502.002.503.363840CycleΔRnThreshold常用的荧光定量PCR试剂?SYBR GreenI?Taqman水解探针?分子信标SYBR GreenI?结合到双链DNA的小沟部位?只有和双链DNA结合后才发荧光1.正确认识自我,尊重自我——人职和谐的基础2.充分了解职场,努力做到人职匹配3.适应社会需求与发展,选择最能发挥自己能力特长的职业。没有最好的职业,只有最适合自己的职业,适合自己的才是最好的。1.职业生涯开发与管理的观点是:只要开始,永远不晚;只要进步,总有空间。2.在职业生涯的道路上,重要的不是目前所处的位置,而是迈出下一步的方向。1播放器加载中，请稍候...
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文档介绍：
主要内容?定量PCR与常规PCR的区别?荧光定量PCR的原理?常用的热循环仪?定量的方法?重复性和敏感度?应用?如何设计荧光定量PCR的方案荧光定量PCR与常规PCR的区别?常规PCR技术:?对PCR扩增反应的终产物进行定性及定量分析?荧光定量PCR技术:?对PCR扩增反应中每一个循环的产物?进行定量分析实时荧光定量PCR的特点?特异性更强?灵敏度高?可直接对产物进行定量?解决PCR污染问题?自动化程度高、操作简单realtimePCR的扩增曲线Ct值极具重现性PE公司在同一台PCR仪上对相同模板进行96次扩增的扩增曲线图Ct与初始模板的关系?固定循环数后,荧光信号与模板数成正比?固定荧光信号值后,模板数就与循环数成反比?初始DNA量越多,荧光达到阈值时所需要的循环数(Ct值)越少?起始模板的对数浓度与Ct呈线性关系,根据样品的Ct值就可计算出样品中所含的模板量0.000.501.001.502.002.503.363840CycleΔRnThreshold常用的荧光定量PCR试剂?SYBR GreenI?Taqman水解探针?分子信标SYBR GreenI?结合到双链DNA的小沟部位?只有和双链DNA结合后才发荧光1.正确认识自我,尊重自我——人职和谐的基础2.充分了解职场,努力做到人职匹配3.适应社会需求与发展,选择最能发挥自己能力特长的职...
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【求助】荧光定量PCR扩增曲线问题
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我用Taqman做的荧光定量，扩增曲线很奇怪，大家帮我看看怎么回事，帮忙分析一下，谢谢！查看完整版本请点击这里：
H2O ( 18:10:13)
我用的是八联管做的，不用贴膜，开始也怀疑盖子没盖紧，后来反复做了几次也是这样，所以应该不是漏气的原因。
H2O ( 18:10:29)
问题解决了，模板浓度太高，稀释一下就正常了。谢谢大家的意见
utt0989 ( 18:10:46)
这个是软件的问题，跟你的实验关系不大，因为你的样本浓度较高，在15个CT之前就已经抬头，所以会出现这种问题。你可以将软件的阈值计算从原来的3-15个CT，改到2-8或者1-6个CT，然后重新计算。
hold住 ( 18:11:16)
这个是软件的问题，跟你的实验关系不大，因为你的样本浓度较高，在15个CT之前就已经抬头，所以会出现这种问 ...
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我想问问样品提取后用nanovue plus测定浓度大约在800左右，但是经过qPCR后，Ct值都在35了，这样我还有补救的办法么？试验中哪步会引起样品浓度降低？谢谢啦，愁死啦
kuohao17 ( 18:11:32)
7楼正解，选择3-8就行了，将3至8的荧光设为本地荧光即可。
bojitu ( 18:12:00)
问题解决了，模板浓度太高，稀释一下就正常了。谢谢大家的意见
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正解，我们这实习生不知道情况的加模板多了经常会出现这种情况先上升再下降
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