感染性疾病的再次免疫应答的特点是与机体哪一类免疫反应有关

简述各种免疫细胞识别靶细胞的分子机制_百度拇指医生
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?简述各种免疫细胞识别靶细胞的分子机制
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免 疫 二、非特异性免疫(固有免疫) 机体针对致病微生物的三道防线: 1、物理屏障—皮肤、粘膜、皮肤及粘膜的分泌物、胃酸 2、非特异性免疫—炎症反应,吞噬细胞、NK细胞、抗菌蛋白 3、特异性免疫—淋巴细胞、抗体 三、特异性免疫 immunity (一)、免疫的概念 拉丁文immunis 是免除服役、免除课税 定义: 简单地说:是抵抗疾病(感染性疾病)的机制 具体地说:免疫是机体的一种生理反应,当抗原性物质进入机体后,机体能识别 “自己 ”和 “非己 ”,并发生特异性的免疫应答,排除抗原性的非己物质,或被诱导而处于对这种抗原物质呈不活化状态(免疫耐受) 免疫作为一种防护机制的特点  识别自我/非我:病原体、移植器官、肿瘤细胞  记忆性:疫苗的理论基础  特异性:能识别抗原间细微的差别  两面性:并非对机体都有利,有时甚至有很大的损伤  多样性:可以识别成千上万种不同结构的抗原 功能 (二)免疫学的研究历史 1、天花与牛痘 宋朝之初人痘防止小儿感染天花 18世纪末,英国Jenner发明了种牛痘防治天花 日,WHO宣布,人类消灭了天花 2 、菌苗的发明 19 世纪70 年代,德国的Koch 和法国的Pasteur 发现有些细菌经过多次传代培养后,失去了致病能力 Pasteur ,1880 年,发明了鸡霍乱杆菌菌苗 1881年,炭疽杆菌减毒株 1885年,狂犬病毒疫苗 3、吞噬现象的发现 俄国Metchnikoff,1883年发现吞噬细胞的吞噬作用,提出细胞免疫学说 4、毒素和抗毒素的发现 Emile和Yersin,1888年发现白喉菌产生外毒素,第一次人工被动免疫 Paul Ehrlich提出体液学说 1903年,Wright, Douglas将二者统一 5、补体的发现 1894年,Pfeiffer发现免疫溶菌现象, 1895年,Bordet证明了补体的存在 6、抗体生成理论 1897年Ehrlich提出侧链学说 1930s Haurowitz, Pauling 先后提出直接、间接模板学说 1959年 Burnet克隆选择学说 7、免疫病理和免疫耐受 1902年, Portier Richet 提出过敏反应 1903年,发现Arthus现象 1906年, Pirguet 提出变态反应 8、在20世纪得到了快速发展  免疫细胞  抗体与细胞因子  免疫遗传学——MHC  单克隆抗体  临床免疫学 (三)抗原(antigens) 定义: 任何进入人或动物体内后,能和抗体结合或和淋巴细胞的表面受体结合,引起人或动物免疫反应的物质。 细菌、细菌分泌毒素、疫苗、移植器官、组织、肿瘤抗原 特性: 免疫原性与免疫反应性 TD 抗原、TI 抗原 理化性质 是蛋白质或多糖类大分子,相对分子量在10,000以上,6,000以下的一般都没有抗原性 一般地蛋白质的抗原性强于多糖 半抗原或不全抗原: 没有免疫原性,但有免疫反应性,与载体蛋白结合后有抗原性。 吗啡 抗原决定子:抗原分子中能与抗体或与淋巴细胞表面受体结合的特定部分,即在分子构象上与抗体互补的部分,或者说是能与抗体分子嵌合的化学基团。一般由5~8个aa残基、短寡糖残基或核苷酸残基组成 多的达200种,少的只有2~3种。 抗原具有特异性 基因工程疫苗:乙肝疫苗 (四)免疫系统 淋巴器官:骨髓、胸腺、淋巴结、脾脏、扁桃体、阑尾等。 淋巴细胞的免疫功能直到20世纪50年代才发现。 证明免疫功能来自淋巴细胞。 根据免疫功能不同,分为B细胞和T细胞 B细胞与T细胞 (1)B细胞是体液免疫的细胞,T细胞是细胞免疫的细胞,两者在功能上是互相支援的(Th、Ts) (2)2种细胞在未被抗原活化时,形态相似,只是B细胞略大,表面绒毛样突起略多,但两者的细胞表面蛋白却很不相同。(分离) (3)寿命不同,B细胞的寿命很短,不过几天或1、2周;T细胞可以生活几年,甚至10年以上 (4)分布上,B细胞大多集中在淋巴结等淋巴器官中,血液中的淋巴细胞80%是T细胞。 数量很多,约2&# 个,十分活跃,时刻在监视外物的入侵。 表面带有许多受体分子,受体分子的构象与相应的抗原分子上的抗原决定子是互补的。 不同的淋巴细胞表面带有不同的受体分子,能分别和不同的抗原分子结合,发生免疫反应。 抗体 抗体: 免疫球蛋白,是游离在血液、淋巴液等体液中的一类特殊的球蛋白。由桨细胞分泌,能与特异的抗原结合,占血浆蛋白的20% 抗体典型结构 4个肽链,两个相同的短链(轻链)两个相同的长链(重链),四链互以S-S键相结合,形成Y形的四链分子。 每一链又分为两段: 恒定部分,确定类型的一个标准; 变异部分,氨基酸各不相同,并且多种多样,决定抗体的特异性,高变区 抗原结合部位(antigen binding site) 轻链和重链的可变部分的20~30个氨基酸组成的囊装或裂隙状分子构象。 抗体的特异性决定于结合部位的构象。 两臂为抗原结合片断,Y的柄部为结晶片断 免疫球蛋白的类别 根据重链氨基酸序列不同分为5类:IgM、 IgG、 IgD、IgA、IgE,每一类还可以分为多种IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 重链各不相同,分别以 、 、  、  、 表示 轻链只有两种: 、 。每个抗体的2 个轻链是相同的,都是 或都是 。 抗体的作用 (1)沉淀和凝集 可溶性抗原、细胞表面抗原(血液凝集) (2)补体反应 (3)K细胞的激活 Ag-Ab结合后,K细胞表面受体能和抗原表面的受体结合,将抗原杀死。 细胞因子 免疫细胞能合成和分泌小分子的多肽类因子 包括淋巴因子和单核因子、集落刺激因子等,已知白细胞介素(IL),干扰素(IFN)、集落刺激因子(CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)、转化生长因子(TGF-β),它们在免疫系统中起着非常重要的调控作用,在异常情况下也会导致病理反应。 (四) MHC—HLA 在机体内存在与免疫排斥反应相关的抗原系统多达20种以上,其中能引起强而迅速排斥反应者称为主要组织相容性抗原,其编码基因是一组紧密连锁的基因群,称为主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)。现已证明,控制机体免疫应答能力与调节功能的基因(immune response gene, Ir gene )也存在于MHC内。因此,MHC不仅与移植排斥反应有关,也广泛参与免疫应答的诱导与调节。在人类,MHC即为编码HLA(human leukocyte antigen)的基因群,称为HAL复合体。 HLA编码产物 1、HLA-A、HLA-B和HLA-C 等31个基因座,广泛分布于体内各种有核细胞表面 ,外周血白细胞和淋巴结、脾细胞所含Ⅰ类抗原量最多,其次为肝、皮肤、主动脉和肌肉。但神经细胞和成熟的滋养层细胞不表达Ⅰ类抗原 2、DR、DP和DQ近30个基因座,Ⅱ类抗原主要表达在某些免疫细胞表面,如B细胞、单核/巨噬细胞 在分子构象有一个特点,即它们的表面有一个沟。第一类MHC的沟较小,可接受12~20氨基酸的肽链,第2类MHC的沟可接受较长肽链。 3、36个基因座 ,补体、TNFA、B , Ⅲ类抗原均分布于血清中 HLA抗原多态性 HLA抗原具有多态性,不同的个体具有不同的HLA型,除了同卵双生外,个体间HLA表型全相同的可能性极小。其多态性的形成原因主要有: (1)基因位点多,目前已发现有229个基因,其中有128个功能位点; (2)共显性表达,同一个体内,每个基因位点都有1对等位基因,它们能同时表达,从而大大增加了人群中HLA表型的多样性,达到107数量级; (3)等位基因多,27个位点有复等位基因,共1340个等位基因(2001年1月),这是HLA高度多态性的最主要原因。由于各个座位基因是随机组合的,故人群中的基因型可达108之多 (五)免疫应答 抗原性物质进入机体后激发免疫细胞活化,分化和效应过程称之为免疫应答。 1.抗原识别阶段 此阶段可包括抗原的摄取、处理和加工,抗原的呈递和对抗原的识别,分别由Mφ、T和B细胞完成。 2.免疫细胞的活化和分化阶段 此阶段可包括抗原识别细胞膜受体的交联、膜信号产生与传递、细胞增殖与分化以及生物活性介质的合成与释放,主要由T和B细胞完成。 3.免疫应答的效应阶段 此阶段主要包括效应分子(体液免疫)和效应细胞(细胞免疫)对非已细胞或分子的清除作用,即所谓排异效应,及其对免疫应答的调节作用。此阶段除抗体和效应T细胞参予外,即非特异免疫细胞和分子参加才能完成排异和免疫调节作用。 免疫应答机制 1、体液免疫(humoral response) 2、细胞免疫(cell response) 3、补体反应 1、体液免疫 抗原多为相对分子量在10000以上的蛋白质和多糖大分子,病毒颗粒、细菌表面 B细胞 B细胞表面的受体种类非常多,每一种B细胞的表面只有一种受体分子,只认识一种抗原 (1)B细胞产生浆细胞和记忆细胞 B细胞表面的受体分子与抗原分子结合后,活化、长大,并迅速分裂产生一个有同样免疫能力的细胞群——克隆(clone)、无性繁殖。一部分成为浆细胞,一部分发展为记忆细胞(memory cell) 需要巨噬细胞和Th细胞的参与。 M带有MHCⅡ分子,抗原分子经M处理后表达在细胞膜上,夹在MHCⅡ分子的沟中,Th细胞表面带有不同的受体,能识别M表面MHC+特异的抗原分子结合物,B细胞表面带有MHC分子,可和特异的抗原分子结合,。。。 (2) 浆细胞产生抗体 每一个浆细胞每秒钟能产生2000个抗体,寿命很短,经几天大量产生抗体之后就死去,抗体进入血液循环发挥生理作用。 每小时释放1000万个抗体分子 不必改变抗体与之相结合的抗原,就能从一种同种型转换到另一种同种型,一种抗体的每种同种型都从C微基因的一种不同形式衍生物 在一天左右时间转变IgM--IgG (3) 记忆细胞与二次免疫反应 寿命长、对抗原十分敏感,能“记住”人侵的抗原。 当同样抗原第二次入侵时,能更快的做出反应,很快分裂产生新的浆细胞和新的记忆细胞,浆细胞再次产生抗体消灭抗原。 体液免疫的两个关键: (1)产生高效而短命的浆细胞,由浆细胞分泌抗体清除抗原 (2)产生寿命长的记忆细胞,发生二次反应立即消灭再次入侵的同样抗原 2、细胞免疫 器官移植、寄生原生动物、真菌等 T细胞 (1)细胞免疫的机制和过程 T细胞识别不同于自身的MHC I、识别细胞表面的MHCI+抗原复合物,识别后进行攻击。 三类T细胞,表面均有受体,有抗原特异性 胞毒T细胞(Cytotoxic T cells,Tc)、助T细胞(helper T cells, Th)、抑T细胞(suppressor T Cells, Ts) Tc 作用是消灭抗原 病毒感染细胞后,细胞表面呈现病毒表达的抗原,并结合到细胞表面的MHC I类分子的沟中,形成MHC-抗原结合物。被Tc细胞接触、识别后,Tc分泌穿孔素(perforin),使靶细胞溶解而死,病毒进入体液,被抗体消灭。 癌变细胞也是Tc攻击目标,免疫功能低下的人群容易患癌症。 Th细胞 又称诱导T细胞,对各种免疫细胞,Tc、Ts、B都有帮助作用,对于免疫具有重要作用。 Th的受体能识别和第Ⅱ类MHC结合的外来抗原。 MHC Ⅱ类分子存在于巨噬细胞和B细胞表面。巨噬细胞吞噬入侵的细菌等微生物,在细胞内消化、降解,抗原分子与MHC Ⅱ类结合呈现在细胞表面,将抗原传递给具有相同MHC Ⅱ类分子的Th,同时,M分泌白介素I,刺激Th,促使其分泌白介素Ⅱ,它促进Th,形成正反馈,刺激淋巴细胞分化出Tc,刺激B细胞 CD4受体 Ts 抑制淋巴细胞,包括B细胞和其他T细胞的活动,只有在Th的刺激下才发生作用。在外来的抗原消灭殆尽时,发挥作用而结束 “战斗 ” CD8受体 细胞免疫的全过程 抗原或带有不同I类MHC分子的外源细胞,在进入机体后,体内带有特异性受体的T细胞分裂产生大量新的T细胞,其中Tc有杀伤力,使外源细胞破裂而死亡。Th细胞分泌白介素等细胞因子使Tc、 M以及各种有吞噬能力的白细胞集中于外来细胞周围,将外来细胞彻底消灭。 在这一反应即将结束时,Ts开始发挥作用,抑制其他淋巴细胞的作用,终止免疫反应, 每次特异免疫反应产生记忆细胞。 细胞免疫和器官移植 器官移植在同卵双胞胎之间进行较易成功,这是因为两者的基因组是一样的,细胞表面的MHC分子也是一样的,2个个体都不排斥对方的器官。 免疫抑制:激素、放射线照射、药物(6-巯基嘌呤)等 环孢素(cyclosporin) 3、补体反应 补体(complement):存在于血清、体液中的蛋白质,分子量在,包括C1~C9、B因子、D因子,还有许多调节蛋白分子。 抗原抗体复合物激发的级链反应,最终产物是攻膜复合体,使细菌等抗原外膜穿孔而死。 (1)经典途径:经C1、C4、C2而激活C3的活化方式。抗原-抗体复合物 (2)替代途径:绕过C1、C4、C2而直接激活C3的活化方式。酵母多糖。 补体反应过程 分为识别阶段、活化阶段、和攻膜阶段。 1、识别阶段:Ab-Ag结合后,Ig构型改变暴露其Fc上的补体结合部位,与C1q结合导致C1构型改变,生成C1脂酶。C1q可以识别IgM、IgG 2、活化阶段:C1—C4—C2—C3—C5 (C3b—BD—C3—C5) 3、攻膜阶段: C5—C6—C7—C8—C9 C56789—攻膜复合物,附着在靶细胞膜上,一方面使靶细胞膜裂解,另一方面,C9分子还形成一些横穿膜的水溶性小管道,水进入细胞,使细胞涨落死亡 生物学功能 (1)溶解靶细胞,C1~C9 抗感染、变态反应性疾病、自身免疫性疾患 (2)促进吞噬过程 C3b、C4b (3)中和病毒和溶解病毒作用 C1、C2、C3、C4 (六)、克隆选择学说 克隆选择学说:淋巴细胞在与抗原接触前就已经存在多种多样的与抗原专一性结合的抗体,一种细胞带一种抗体,进入机体的抗原选择性的结合其中的个别淋巴细胞,使之火化,增殖产生大量带有同样抗体的细胞细胞群,分泌同样的抗体。 单克隆抗体(McAb) 通过注射抗体来预防或治疗——被动免疫 破伤风抗毒素治疗破伤风 通常抗体的获得来自动物血液,一方面成本昂贵,另一方面纯度不能保证,含有其他蛋白质分子,对人体来说是一种抗原,在体内产生抗体,用多后就会发生超敏反应。 McAb是来自同一种B细胞的同一类抗体群。 20世纪70年代建立了生产技术 用人工方法将产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合,成为B细胞杂交瘤,这种细胞具有大量无限繁殖的特性,又有B细胞合成与分泌特异性抗体的能力,对这种细胞进行体外培养,即可获得大量McAb McAb纯度高、特异性强、效价高,用途大。用于研究、临床诊断和治疗。 四、免疫系统疾病 1、自身免疫病 风湿性心脏病、风湿热、类风湿性关节炎、溶血性贫血 2、过敏 过敏性哮喘、青霉素过敏 3、免疫缺乏病(severe combined immune deficiency, SCID) 4、艾滋病(acquired immune deficiency syndrome, AIDS) 5、免疫系统和癌症 免疫监视 思考题 1、什么是免疫应答?有哪些典型特征? 2、巨噬细胞在免疫应答中的作用是什么? 3、抗体的结构、分类与生物学功能? 4、接种疫苗的生物学原理是什么? 5、体液免疫与细胞免疫的主要区别是什么? 6、什么是单克隆抗体,如何制备?
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单项选择题关于超敏反应的叙述哪项是正确的()
A.是由免疫反应引起的机体组织损伤和生理功能紊乱的病理过程
B.属于机体非特异性免疫应答
C.和免疫反应发生的机制是不同的
D.是机体针对变应原的初次免疫应答反应
E.是机体体液免疫应答过程
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分析:特异性免疫包括体液免疫和细胞免疫,其具体过程如下:
解:(1)据图示可知,结构A通过胞吞方式进入细胞,合并进入细胞器B后,被降解成特定的肽段,故细胞器B是溶酶体.物质a由细胞器C转运合并进入B,细胞器C是高尔基体;(2)图示中细胞L、M是同一个细胞,细胞K是T细胞,通过分泌淋巴因子杀灭病原体发挥免疫作用的.细胞G为记忆细胞,作用是发挥二次免疫反应.(3)根据上述图示过程阐述人体患相关疾病的主要原因是人体患病的主要原因是免疫系统不强.因为人体生活的环境充满了各种细菌与病毒(病原体),当人体免疫系统正常发挥作用时,病原体被体液免疫和细胞免疫等阻挡与杀灭,不能在体内大量繁殖;当人体免疫系统过弱不足以杀死病原体时,病原体入侵人体大量繁殖破坏机体细胞,引起疾病..(4)A、细胞F与细胞J均是通过增殖分化而来,A正确;B、细胞器C为溶酶体,内中含有蛋白水解酶,B正确;C、细胞器C呈递物质b与细胞膜的流动性有关,C正确;D、细胞M的免疫作用称为体液免疫,D错误.故答案为:(1)胞吞&&&&&&溶酶体&&&&高尔基体(2)同一个细胞&&&分泌淋巴因子杀灭病原体&&&&发挥二次免疫反应(3)人体患病的主要原因是免疫系统不强.因为人体生活的环境充满了各种细菌与病毒(病原体),当人体免疫系统正常发挥作用时,病原体被体液免疫和细胞免疫等阻挡与杀灭,不能在体内大量繁殖;当人体免疫系统过弱不足以杀死病原体时,病原体入侵人体大量繁殖破坏机体细胞,引起疾病.(4)A、B、C
点评:本题考查人体免疫系统在维持稳态中的作用,要求考生识记人体免疫系统的组成,掌握体液免疫和细胞免疫的具体过程,能运用所学的知识准确判断各选项,属于考纲识记和理解层次的考查.
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科目:高中生物
下列有关细胞癌变、凋亡等的说法正确的是(  )
A、病毒癌基因可整合到宿主基因组诱发癌变B、神经元凋亡是不受环境影响的细胞编程性死亡C、原癌基因或抑癌基因发生多次变异累积可导致癌症,因此癌症可遗传D、癌变细胞基因发生突变,细胞中核糖体减少导致细胞膜上的糖蛋白减少,癌细胞易扩散转移
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如图1为巨噬细胞炎症反应的新机制研究,巨噬细胞受细菌感染或细菌脂多糖&LPS&刺激后,升高血管内皮生长因子受体3(&VEGFR-3&)和信号分子VEGF-C&的表达.VEGFR-3形成反馈环路,抑制TLR4-NF-κB介导的炎症反应,降低细菌感染导致的败血症的发生.(1)细菌或细菌脂多糖&LPS在免疫学上相当于,TLR4的本质是.(2)过度或持续性的&TLR4&活化引起,在&VEGF-C&的刺激下,通过活化&PI3K-Akt1&通路,促进,从而抑制&NF-κB&活性,降低败血症的发生.(3)该细胞能够产生溶菌酶直接杀死病原菌,该过程属于免疫.吞噬细胞吞噬病菌后会发生死亡现象,该现象属于.(4)大多数抗原激发的体液免疫应答,第一种是必须有T细胞参与才能完成,第二种是有少数抗原物质,可单独刺激B细胞,为了探究细菌脂多糖LPS属于哪一类免疫应答,可以选择相同性别的同龄的小鼠进行LPS接种处理,如下表,实验组对应组小鼠,如果,则该抗原属于第二种.处理胸腺是否产生相应浆细胞是否产生相应的抗体甲组小鼠切除乙组小鼠不切除(5)一般情况下,接受抗原刺激的B细胞会增殖分化为,科学家用LPS分先后两次接种小鼠,并检测相应的抗体的产生量,如图2所示:该实验结果说明LPS能够.
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急性早幼粒细胞白血病是最凶险的一种白血病,发病机理如下图所示,2010年度国家最高科技奖获得者王振义院士发明的“诱导分化疗法”联合应用维甲酸和三氧化二砷治疗该病.维甲酸通过修饰PML-RARa,使癌细胞重新分化“改邪归正”;三氧化二砷则可以引起这种癌蛋白的降解,使癌细胞发生部分分化并最终进入凋亡.下列有关分析不正确的是(  )
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A、B、C、D、
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临床免疫学
一、选择题
【A1型题】
1.用抗人CD3单克隆抗体检测T淋巴细胞,其结果代表
T淋巴细胞总数
CD4+T细胞数
CD8+T细胞数
2.下列指标可以评价AIDS病人的细胞免疫功能的是
CD2/ CD3细胞比值
CD3/ CD4细胞比值
CD3/ CD8细胞比值
CD4/ CD8细胞比值
CD2/ CD4细胞比值
3.分离外周血单个核细胞,单次差速密度梯度离心法常用分层液是
Ficoll-Hypaque分层液
Percoll分层液
4. 已知细胞中的粘附能力最大的为
巨噬细胞或单核细胞
5. Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为
单个核细胞
、血小板和血浆、粒细胞、红细胞
血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞
血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞
血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞
血小板和血浆、红细胞、单个核细胞、粒细胞
6. 用于T细胞亚群分离的方法有
E花环沉降法
尼龙毛柱分离法
免疫磁珠分离法
Ficoll分离法
Percoll分离法
7. 细胞活力测定常用的简便方法是
台盼蓝染色
8. 密度法分离免疫细胞技术中分离各类细胞的关键是
9. 淋巴细胞分离方法中的贴壁粘附法是利用单核细胞的如下特点
贴壁生长特点
体积不同特点
形态不同特点
比重不同特点
抗原不同特点
10. 将T、B细胞进行分离时所采用的尼龙毛柱分离法利用B细胞和单核细胞的如下特点
体积不同特点
具有粘附于尼龙纤维表面的特点
形态不同特点
贴壁生长特点
具有吞噬性的特点
11. 分离纯化淋巴细胞亚群的基本原理是
相应细胞体积不同特点
相应细胞具有不同的表面标志
形态不同特点
相应细胞贴壁生长特点
相应细胞具有吞噬性的特点
12. 采用Ficoll密度梯度分离法分离得到的细胞主要为
单核细胞和粒细胞
淋巴细胞和单核细胞
淋巴细胞和粒细胞
13. 为B细胞所特有、是鉴定B细胞可靠的指标是
小鼠红细胞受体
14. 在进行受者血清中细胞毒性预存抗体测定时,运用台盼蓝染色法,下列叙述正确的是
着色者为死细胞,有细胞毒性预存抗体存在
着色者为活细胞,无细胞毒性预存性抗体存在
着色者为死细胞,无细胞毒性预存抗体存在
不着色者为死细胞,表明有细胞毒性预存抗体存在
不着色者为死细胞,表明无细胞毒性有抗体存在
【A2型题】
15.对淋巴细胞亚群测定的临床意义描述错误的是
了解机体的免疫状态
探讨免疫调节功能的状况
是自身免疫疾病和肿瘤发生发展的监控指标
了解体液免疫情况
诊断免疫缺陷或免疫增生病
16.免疫细胞分离中不是对分离液的基本要求为
对细胞无毒
不溶于血浆等分离物质
有一定的比重
一定是有色的液体
17.下列说法错误的是
进行细胞免疫的检测,一般须将待检淋巴细胞从血液中或组织中分离出来
外周血单个核细胞包括淋巴细胞、粒细胞和红细胞
利用外周血的细胞的理化特性的差异可以分离不同的细胞群体
淋巴细胞的理化特性与其他细胞差异很小,用简单的方法不易分离纯化
淋巴细胞的分离利用专门的淋巴细胞分离纯化技术
18.关于单个核细胞说法错误的是
单个核细胞包括淋巴细胞、单核细胞
单个核细胞的体积、形态、比重与其他细胞不同
可利用单个核细胞的体积不同,按照密度梯度来分离
在进行密度梯度分离时,单个核细胞比重比溶液的比重大
多核粒细胞比重比单个核细胞比重大
19. B细胞的重要表面标志不包括
膜免疫球蛋白(SmIg)
EB病毒受体
小鼠红细胞受体
20.从单个核细胞悬液中分离出单核细胞的方法不包括
E花环沉降法
贴壁黏附法
吸附柱过滤法
D 磁铁吸引法
E percoll分离液法
21.下列关于T细胞亚群的分离,说法错误的是
原理是根据相应细胞的不同标志加以选择性纯化
凡根据细胞的表面标志进行纯化得到所需要的细胞群是阳性选择法
选择去除不需要的细胞群,仅留下所需要的细胞为阴性选择法
尼龙毛柱分离法是常用的分离方法
FACS是最先进的细胞分选技术
22.T、B细胞分离的方法,不包括
E花环沉降分离法
自然沉降法
尼龙纤维分离法
亲和板结合法
流式细胞仪分离法
23.关于NK细胞及其表面标志的检测,说法错误的是
NK细胞表面少有受体
NK细胞参与免疫应答
过去主要检测NK细胞的活性来了解NK细胞的功能
目前临床采用荧光标记检测NK细胞
NK细胞表面存在CD2、CD16等多种抗原,是NK细胞特有
24.不能从单个核细胞中去除单核细胞的方法有
粘附贴壁法
吸附柱过滤法
磁铁吸引法
亲和板结合分离法
25.不能实现T、B细胞分离的方法有
E花环沉降分离法
自然沉降法
尼龙纤维分离法
亲和板结合法
流式细胞仪分离法
26.关于淋巴细胞分离的描述错误的是
A. Ficoll分离液法是一种单次差速密度梯度离心的分离法
B. 温度可影响Ficoll分离的细胞收率
C. 为获得较纯的单个核细胞,需根据待分离细胞的比重适当调整分离液的比重
D. 采用贴壁粘附法分离到的淋巴细胞群中不会损失B细胞
E. Percoll分离是一种连续密度梯度离心分离法,是纯化单核细胞和淋巴细胞的一种较好的方法
T、B淋巴细胞分离描述中错误的是
A. E花环沉降法利用T细胞有羊红细胞受体,将T细胞和B细胞分离。
B. 尼龙毛柱分离法利用B细胞和单核细胞对尼龙纤维表面的易粘附性,可将T和B细胞分开。
C. 磁性微球分离法中需要获得的细胞不与磁珠结合,而是游离于上清液中,即为负选法。
D. 利用CD分子可进一步对细胞亚群进行分析
E. B细胞表面的Fc受体是鉴定B细胞可靠的指标。
【B1型题】
(28-30题共用备选答案)
28.区分B细胞亚群的标志是
29.Th淋巴细胞的标志是
30. 单核-巨噬细胞的典型标志是
二、名词解释
1.单个核细胞
3. 细胞分离的正选法和负选法
4. 表面标志亚群
5. 免疫磁珠
三、简答题
1. 简述利用磁性微球分离淋巴细胞的原理。
2. 对淋巴细胞的计数和功能检测意义有何不同?
3. T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞的主要生物学标志是什么?
4. 细胞表面标志的检测方法有哪些?
5. 将细胞分离的原理有哪些?各有什么特点?
一、选择题
二、名词解释
1.单个核细胞:指淋巴细胞和单核细胞。
2.Ficoll液:一种聚蔗糖-泛影葡胺混合液,用于分离外周血淋巴细胞。
3.细胞分离的正选法和负选法:磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞为正选法;磁珠结合不需要的细胞,游离于上清液的细胞为所需细胞为负选法。
4. 表面标志亚群:通过一个或几个CD抗原定义出来的细胞亚群。
5. 免疫磁珠:指以免疫特异抗体或其它免疫物质包被的磁性塑料微球。
三、简答题
1. 简述利用磁性微球分离淋巴细胞的原理。
答:磁性微球是将磁性材料颗粒表面进行处理,核心外包裹高分子材料(聚苯乙烯、聚氯乙烯等),可结合不同的生物大分子物质(抗原、抗体、核酸等),若微球表面包被于免疫配基者称为免疫磁珠(lmmunomagntic bead, IMB),其兼有免疫配基的性质和磁响应性质,即在磁场中显示磁性,移出磁场时磁性消除。将包被有关抗体的磁珠与待分离细胞充分作用,这样借助于抗体磁珠,将与相应的细胞结合成细胞-抗体-磁珠复合物,该细胞在磁场中运动与其它细胞将产生明显的差别。可以采用层析的方法,将层析柱放于强磁场中,与磁珠结合的细胞运动将受限,而未与磁珠结合的细胞则将先被洗脱出来,再将该柱移出磁场,与磁珠结合的细胞也将被洗脱出来,达到分离的目的。
2. 对淋巴细胞的计数和功能检测意义有何不同?
答:淋巴细胞计数主要是T、B细胞及其亚群计数,通过计数可了解T、B细胞的数量与比值是否正常。淋巴细胞数量正常并不等于其功能正常,T、B淋巴细胞对抗原、丝裂原的刺激能否发生增殖反应是判定功能是否正常的一个检测标准。如淋巴细胞受丝裂原等物质刺激后能发生增殖反应即发生母细胞化,则说明其功能正常。CTL与NK 细胞的功能是否正常,以能否杀伤靶细胞来判定。由此可知,计数是对物质基础的定量,功能检测是对物质功能的定量,要把各种免疫细胞及亚群的数量与比值,各种免疫细胞功能的测定结果等进行综合分析后,才能判定机体的免疫功能是否正常。
3. T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞的主要生物学标志是什么?
答:外周血中成熟的T淋巴细胞主要属于TCRαβ+T细胞,T细胞功能复杂,表面标志也不单一,因此T细胞实质也是由多种细胞所组成的一类细胞,一般认为CD3是T细胞共有的标志。根据T细胞的免疫效应功能至少可以分为:辅助性T细胞(CD3+CD4+CD8-)、细胞毒性T细胞(CD3+CD4-CD8+)和调节性(CD4 +CD25 +)。
B细胞表面的膜免疫球蛋白为B细胞所特有,常用鉴定和研究的B细胞的CD抗原有:CD19、CD20等。近年发现CD5+CD19+B细胞,与免疫调节及自身免疫性疾病和某些恶性血液疾病关系密切。临床实验室经常对CD5+CD19+B细胞进行检测以对有关疾病做出诊断。
NK细胞是一类无典型T细胞和B细胞的表面标志的大颗粒淋巴细胞,目前多以CD3-、SmIg-、CD16+、CD56+ 作为NK细胞的典型标志。
单核-吞噬细胞的典型的典型表面标志是CD14。
4. 细胞表面标志的检测方法有哪些?
答:有抗体致敏细胞花环法、免疫细胞组织化学法和流式细胞计数法等。目前免疫细胞表面标志的检测主要采用流式细胞技术,结果客观准确,重复性好。CD抗原的鉴定是以流式细胞仪测量法为主要依据,其它方法仅为参考。
5.将细胞分离的原理有哪些?各有什么特点?
答:早期的免疫细胞分离技术主要是根据不同免疫细胞的物理属性(如比重不同)和生物学属性(如粘附力不同)进行分离的,用目前的标准看其分离的灵敏度或分辨率都不高,因为某种细胞与另一种细胞的比重或粘附力往往不是截然不同的,处于中间状态的细胞也很多,因此这类分离方法的收率和纯度往往不能兼顾,但作为一种传统的分离手段其分离效果已被某些实验认可,如用单个核细胞进行的某些实验,一般被认为可以代表淋巴细胞,如无特别需要一般并不采用分纯淋巴细胞的替代技术。做为富集某一类细胞的手段,传统的方法仍不失为简便和行之有效的技术。
近期发展起来的细胞分离技术大多是基于利用细胞表面标志(抗原或受体)进行分离细胞的,以较早出现的细胞亲和层析为代表。较早出现的有细胞固相包被技术,细胞淘洗技术,同时出现的还有流式细胞仪分离技术,随着合成磁性微球的发展,免疫磁性微球在分离细胞方面已经获得了快速的发展。这些技术的出现使细胞分离技术产生了实质性的进步。
以细胞表面标志物为分离标志的细胞分离技术依赖于对细胞表面标志的研究水平,对细胞表面标志研究未明的细胞进行分离时采用这类技术应当慎重,因此目前尚不能完全替代经典的细胞分离技术。}

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