医学上常给肿瘤患者采取“化疗”的办法来治疗，其实质就是用化学药剂抑制肿瘤细胞的DNA复制，那么患者在“化疗”期间，其肿瘤细胞就停留在
A．前期B．中期C．后期D．间期
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扫描下载二维码（1）胰蛋白酶（2）线粒体核糖体（3）DNA复制（4）①将相同的培养液分为相等的两份，一份加药物X，一份不加 ②将等量的肿瘤细胞置于两份培养液中 ③放在相同的条件下培养，观察肿瘤细胞分裂情况（5）单克隆抗体
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科目：高中生物
来源：2011届高考复习章节小练习：必修一6-2、3、4细胞分化、衰老、凋亡、癌变
题型：综合题
某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养，请回答：(1)培养之前，肿瘤组织必须先用__________处理成单个细胞。(2)与正常的细胞相比，在肿瘤组织中明显增多的细胞器是__________(填两项)。(3)治疗癌症的途径之一是用药物抑制__________，从而将癌细胞的周期阻断在分裂间期。(4)某单位研制出一种新型药物X，对此类肿瘤有较好疗效，请你设计一个方案验证。(写出实验步骤)①________________________________________________________________________。②________________________________________________________________________。③________________________________________________________________________。(5)若上述药物X真有较好的疗效，我们可将其与__________连接制成“生物导弹”，实现绿色治癌。
科目：高中生物
来源：学年广东省江门市高三模拟考试（一模）生物试卷（解析版）
题型：综合题
(16分)黄曲霉毒素AFB1存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并累积，引起癌变；某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。
（1）AFB1属于&&&&&&&&&&
类致癌因子。
（2）黄曲霉毒素诱发肝癌发生的原理是基因突变。研究发现，黄曲霉毒素会导致p53基因（阻止细胞不正常增值的基因）失去正常功能，所以p53基因属于&&&&&&
基因；肝癌细胞容易分散和转移的原因是细胞表面的&&&&&&&&&&
等物质减少。
（3）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图，检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用&&&&&&&&&&&&&&&&&
方法。
（4）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表，据表回答：
①本实验自变量为&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
。
②本实验中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是&&&&&&&&&
。
③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加&&&&
克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节约了成本。
（5）某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。培养之前，肿瘤组织必须先用&&&&&&&&&
（酶）等处理成单个细胞。
科目：高中生物
来源：学年高考复习章节小练习：必修一6-2、3、4细胞分化、衰老、凋亡、癌变
题型：综合题
某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养，请回答：
(1)培养之前，肿瘤组织必须先用__________处理成单个细胞。
(2)与正常的细胞相比，在肿瘤组织中明显增多的细胞器是__________(填两项)。
(3)治疗癌症的途径之一是用药物抑制__________，从而将癌细胞的周期阻断在分裂间期。
(4)某单位研制出一种新型药物X，对此类肿瘤有较好疗效，请你设计一个方案验证。(写出实验步骤)
①________________________________________________________________________。
②________________________________________________________________________。
③________________________________________________________________________。
(5)若上述药物X真有较好的疗效，我们可将其与__________连接制成“生物导弹”，实现绿色治癌。
科目：高中生物
某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养，请回答：
(1)培养之前，肿瘤组织必须先用__________处理成单个细胞。
(2)与正常的细胞相比，在肿瘤组织中明显增多的细胞器是__________(填两项)。
(3)治疗癌症的途径之一是用药物抑制__________，从而将癌细胞的周期阻断在分裂间期。
(4)某单位研制出一种新型药物X，对此类肿瘤有较好疗效，请你设计一个方案验证。(写出实验步骤)
①________________________________________________________________________。
②________________________________________________________________________。
③________________________________________________________________________。
(5)若上述药物X真有较好的疗效，我们可将其与__________连接制成“生物导弹”，实现绿色治癌。三种中药制剂促化疗增敏作用的体外实验--《郑州大学》2010年硕士论文
三种中药制剂促化疗增敏作用的体外实验
【摘要】：
背景和目的
癌症严重威胁人们的生命健康,其发病率近年来逐渐增加,近10年来增加更为明显。早期的肿瘤患者主要采取外科手术的治疗方法,但是许多患者发现肿瘤时已经发展到中晚期,不再适合手术切除,化疗成为主要的治疗手段。在肿瘤临床实践中我们经常发现：一些生长不快、病理分化好的恶性肿瘤对化疗药敏感性差；然而一些生长很快、病理分化级别低的恶性肿瘤对化疗药敏感性却很好。导致此种情况发生的一个重要因素就是病理类型不同的肿瘤细胞处于不同的细胞分裂周期,因而,单独使用周期特异性的化疗药不会达到全部杀死所有癌细胞的目的。目前恶性肿瘤的综合治疗已经被肿瘤临床医师广为接受,中医药的治疗手段也是肿瘤综合治疗方案中的重要一环。现代药理学研究证明中药可以通过促进肿瘤细胞凋亡、调节机体免疫功能和直接杀死肿瘤细胞等途径来达到抗肿瘤的疗效。杜仲、菟丝子和肉苁蓉都是常用的补益类中药。据报道,杜仲提取物可促进大鼠胶原蛋白合成和表皮细胞的增殖；菟丝子总黄酮对成骨细胞活性有促进作用,并且可促进小鼠免疫器官胸腺、脾脏增长,提高巨噬细胞的吞噬功能,促进淋巴细胞增殖反应；肉苁蓉多糖也能够明显提高巨噬细胞的吞噬和分泌功能,活化巨噬细胞,并可明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖。据此,我们是否可以推测这三位补益中药对肿瘤细胞也有一定促增殖作用呢?其是否具有一定促进肿瘤细胞代谢的作呢?补益中药是否具有改变肿瘤细胞周期时相的作用,使肿瘤细胞经中药作用后集中到某一细胞周期时相,如S期、G1期或者M期,然后再使用某一周期特异性化疗药物杀灭之,从而提高了肿瘤细胞对化疗药的敏感性?
1细胞培养将食管癌细胞Ec9706接种于含体积分数10%灭活胎牛血清的RPMI-1640培养液中。在37℃、体积分数5%CO2、相对湿度为95%的细胞培养箱中常规培养。1～2d换液一次,1～2d或2～3d传代。
2 MTT法初步筛选出最能促使食管癌细胞Ec9706生长的三位中药
3测定细胞生长增殖率取对数生长期的Ec9706细胞,制成单细胞悬液,接种于96孔板中。每孔大约个肿瘤细胞,体积100μl,培养24小时后,按预先设计将不同浓度中药试剂加入孔中,体积为100μl,每组设置若干重复孔,分别设置空白对照孔、调零孔和本底对照孔。在37℃、体积分数为5%CO2细胞培养箱中培养48小时后,利用噻唑蓝(MTT)还原法检测药物组细胞的生长增殖率。重复实验3次。
4绘制出三位中药的生长曲线取对数生长期Ec9706细胞,制成单细胞悬液,接种于96孔板中。每孔约个细胞,体积为100μl,培养24h后,分别将40mg/ml杜仲试剂、20mg/ml菟丝子试剂,30mg/ml肉苁蓉试剂加入板中,每孔100μl,每天取出一板,以MTT法进行比色检测,记录OD值,共记录6天,绘制生长曲线。
5流式细胞仪检测细胞周期
6用免疫细胞化学分析细胞周期蛋白D的表达情况S-P染色法分析实验组与对照组Ec9706细胞中cyclinD蛋白的表达情况。
7通过MTT法测定中药联合5-fu对Ec9706细胞的抑制作用取对数生长期的Ec9706细胞,制成单细胞悬液,接种于96孔板中。每孔约个细胞,体积为100μl,培养12h后,按实验设计将最佳浓度的中药制剂和5-fu加入孔中,体积为100μl,分别设单独5-fu组,5-fu加中药组和空白对照组,每组设置若干重复孔。在37℃、体积分数5%CO2细胞培养箱中分别培养24h、48h、72h后,采用噻唑蓝(MTT)还原法检测各组细胞的生长抑制率。重复实验3次。
8统计学分析采用统计软件SPSS13.0,采用单因素方差分析及χ2检验对数据进行分析,以α=0.05为检验水准。
1经MTT法测定出诸位补益类中药促增殖作用最明显的三位中药是杜仲、菟丝子、肉苁蓉。
杜仲、菟丝子、肉苁蓉在一定浓度范围内对食管癌细胞株Ec9706有一定促增殖作用。杜仲促增殖的浓度范围在1-40mg/ml,且40mg/ml时的增殖作用最明显。菟丝子的促增殖浓度范围在1-20mg/ml,且20mg/ml时增殖作用最明显。肉苁蓉促增殖浓度范围在1-30mg/ml,且30mg/ml时增殖作用最明显。以上各浓度组的增殖率与对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05)
2流式细胞仪检测细胞周期分布
药物作用于细胞72h后,实验组细胞周期各时相的细胞数占细胞总数的百分比与对照组比较有明显的不同。S期细胞百分率明显升高,G1期细胞百分率明显下降。实验组细胞S期百分率与对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05)。
3细胞免疫化学对Ec9706细胞周期蛋白D表达的检测
经药物作用后的实验组和空白对照组均有cyclinD蛋白表达,阳性部位位于胞核和胞浆。经杜仲作用后的Ec9706细胞cyclinD蛋白阳性表达率0.642±0.033,经菟丝子作用后的Ec9706细胞cyclinD蛋白阳性表达率为0.632±0.022,经肉苁蓉作用后的Ec9706细胞cyclinD蛋白阳性表达率为0.562±0.023,对照组细胞cyclinD蛋白阳性表达率为0.426±0.029。
4三种中药制剂的最佳浓度联合5-fu化疗提高了5-fu对Ec9706的抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。
1杜仲、菟丝子、肉苁蓉对食管癌Ec9706细胞均具有一定的促增殖作用。
2经杜仲、菟丝子、肉苁蓉作用后的食管癌Ec9706细胞各周期时相,S期细胞所占百分率显著增大,G,期细胞百分率明显下降。
3杜仲、菟丝子、肉苁蓉可能通过促进cyclinD蛋白的表达导致Ec9706细胞G,期百分数减少S期百分数增多,缩短了细胞增殖周期,并使较多的细胞处于代谢旺盛的S期,提高了细胞代谢水平。
4三位中药联合5-fu组与单独5-fu组相比,对食管癌Ec9706细胞的抑制作用明显增强,从而提高了Ec9706细胞对5-fu的敏感性。
【关键词】：
【学位授予单位】：郑州大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R285.5【目录】：
Abstract7-13
材料与方法15-22
1 材料15-16
1.1 细胞株15
1.2 药品与试剂15
1.3 主要器材与仪器15-16
2 实验方法16-22
2.1 药物制备16-17
2.3 细胞培养方法17-18
2.4 MTT比色法测定药物对肿瘤细胞的增殖促进作用18-19
2.5 MTT法绘制生长曲线19
2.6 流式细胞术检测细胞周期时相19-20
2.7 免疫细胞化学检测cyclinD1蛋白表达20-21
2.8 统计学分析21-22
1 补益中药制剂促Ec9706增殖作用的粗筛22
2 探索杜仲、菟丝子和肉苁蓉的最佳促增殖浓度22-25
3 流式细胞仪检测细胞周期时相25
4 免疫细胞化学染色结果25-26
5 探寻化疗药物的实验浓度26
6 MTT法检测中药联合5-fu对肿瘤细胞的抑制作用26-28
参考文献40-42
综述 中医药在肿瘤临床中的作用42-56
1 中药的抗肿瘤作用43-48
1.1 中草药可抑制肿瘤细胞的增殖和诱导细胞分化43-44
1.2 通过调节机体免疫功能而发挥抗肿瘤作用44-46
1.3 诱导肿瘤细胞凋亡46-47
1.4 抑制肿瘤血管的生成47-48
2.中药减轻放化疗的毒副反应48-50
3.中药对肿瘤细胞多药耐药性的逆转作用及对放疗的增敏作用50-53
4.针刺治疗癌痛53-56
参考文献56-61
英文缩写词索引61-62
在校期间论文发表情况62-63
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来源：学年广东省江门市高三模拟考试（一模）生物试卷（解析版）
题型：综合题
(16分)黄曲霉毒素AFB1存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并累积，引起癌变；某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。
（1）AFB1属于&&&&&&&&&&
类致癌因子。
（2）黄曲霉毒素诱发肝癌发生的原理是基因突变。研究发现，黄曲霉毒素会导致p53基因（阻止细胞不正常增值的基因）失去正常功能，所以p53基因属于&&&&&&
基因；肝癌细胞容易分散和转移的原因是细胞表面的&&&&&&&&&&
等物质减少。
（3）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图，检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用&&&&&&&&&&&&&&&&&
方法。
（4）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表，据表回答：
①本实验自变量为&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
。
②本实验中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是&&&&&&&&&
。
③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加&&&&
克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节约了成本。
（5）某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。培养之前，肿瘤组织必须先用&&&&&&&&&
（酶）等处理成单个细胞。
科目：高中生物
来源：学年高考复习章节小练习：必修一6-2、3、4细胞分化、衰老、凋亡、癌变
题型：综合题
某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养，请回答：
(1)培养之前，肿瘤组织必须先用__________处理成单个细胞。
(2)与正常的细胞相比，在肿瘤组织中明显增多的细胞器是__________(填两项)。
(3)治疗癌症的途径之一是用药物抑制__________，从而将癌细胞的周期阻断在分裂间期。
(4)某单位研制出一种新型药物X，对此类肿瘤有较好疗效，请你设计一个方案验证。(写出实验步骤)
①________________________________________________________________________。
②________________________________________________________________________。
③________________________________________________________________________。
(5)若上述药物X真有较好的疗效，我们可将其与__________连接制成“生物导弹”，实现绿色治癌。
科目：高中生物
题型：解答题
某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养，请回答：（1）培养之前，肿瘤组织必须先用__________处理成单个细胞。（2）与正常的细胞相比，在肿瘤组织中明显增多的细胞器是__________(填两项)。（3）治疗癌症的途径之一是用药物抑制__________，从而将癌细胞的周期阻断在分裂间期。（4）某单位研制出一种新型药物X，对此类肿瘤有较好疗效，请你设计一个方案验证。(写出实验步骤)①________________________________________________________________________。②________________________________________________________________________。③________________________________________________________________________。（5）若上述药物X真有较好的疗效，我们可将其与__________连接制成“生物导弹”，实现绿色治癌。癌细胞具有无限增殖的特点，故A、B正确。由图可知，每次给药后两类细胞数目都明显减少，说明药物对正常细胞也有杀伤作用。但正常细胞经过一定时间，回升数量多于癌细胞，有利于机体组织的修复，故C对。若大剂量给药或缩短给药周期，对正常细胞杀伤量过大，或者不能有足够时间恢复，就会造成机体组织器官损伤，引起强大的负作用。?
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科目：高中生物
来源：活题巧解巧练（高中生物　上册）
细胞到了一定时期会像树叶那样自然死亡，但是这种死亡是细胞的一种生理性、主动性的“自觉自杀行为”，而非病理性死亡，所以叫细胞的凋亡或“程序性细胞死亡”，正是由于发现了细胞凋亡的规律，英国的西德尼·布伦纳（Sydney Bren－ner），美国的H·罗伯特·霍维茨（H Robert Horvitz）和英国的约翰·E·苏尔斯顿（John E Sulston）三位科学家被授予了2002年的诺贝尔医学或生理学奖。他们的工作对于生物学和医学领域都产生了重大的影响。
（1）正常的生命都需以________的方式产生新细胞，同时也有细胞的死亡，从而维持机体细胞数目的动态平衡。
（2）细胞分化是生物体生长发育过程中必不可少的，蛙胚发育过程中原肠胚的主要特点是________。蛙体表部液腺和肝脏分别是由________和________分化来的。
（3）癌细胞是一类恶性增殖细胞，癌症就是该死亡的细胞没有死亡造成的，对于癌症目前医学上通常采用手术切除肿瘤，然后再“化疗”，“化疗”的基本原理是通过化学药剂作用于细胞周期的间期，即抑制________，达到终止________的目的，从而控制病人病情的恶化，未来可采用诱导细胞凋亡治疗癌症。
科目：高中生物
细胞到了一定时期会像树叶那样自然死亡，但是这种死亡是细胞的一种生理性、主动性的“自觉自杀行为”，而非病理性死亡，所以叫细胞的凋亡或“程序性细胞死亡”。正是因为发现了细胞凋亡的规律， 2002 年，英国的西德尼·布伦纳（ Sydney Brenner ）、美国的 H ·罗伯特·霍维茨（ H · Robert Horvitz ）和英国的约翰· E ·苏尔斯顿（ John. E. Sulston ）三位科学家被授予诺贝尔生理学或医学奖。他们的工作对于生物学和医学领域都产生了重大的影响。请回答：
（ 1 ）正常的生理活动都需以_________的方式产生新细胞，同时也有细胞的死亡，从而维持机体细胞数目的动态平衡。
（ 2 ）癌细胞是一类恶性增殖细偶然性，癌症就是应该死亡的细胞没有死亡而造成的。对于癌症目前医学上通常采用手术切除肿瘤，然后再“化疗”。“化疗”的基本原理是通过化学药剂作用于细胞周期的间期，即抑制_________，达到终止___________的目的 ，从而控制病人病情的恶化，未来可采用诱导细胞凋亡治疗癌症。
科目：高中生物
来源：2010年四川省泸州天立学校高二上学期期中考试生物试卷
题型：综合题
采用下列几种方法可以抑制细胞的有丝分裂，使细胞停留在细胞周期的某一阶段，如下表所示，“—”表示停留时期。据表回答：时&期处理方法间&期前&期中&期后&期末&期5-氟尿嘧啶—&&&&秋山仙素&&—&&低温（2～4℃）—————（1）医学上，对于癌症病人通常采取手术切除肿瘤，然后再进行“化疗”。“化疗”的基本原理是通过化学药物作用于细胞周期的间期、抑制癌细胞增殖，从而达到控制病人病情恶化的目的。“化疗”时可采用&&&&&&&&&&&&药物抑制________&& __终止_____&& ____增殖的目的。（2）为确定植株体细胞中染色体的数目，育种工作者选取幼苗的根尖分生区细胞为材料制作临时装片进行观察。实验基本步骤为取材&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&制片观察。观察发现只有少数细胞处于细胞分裂期，原因是&&&&&&&&&。
科目：高中生物
来源：2010年四川省泸州天立学校高二上学期期中考试生物试卷
题型：综合题
采用下列几种方法可以抑制细胞的有丝分裂，使细胞停留在细胞周期的某一阶段，如下表所示，“—”表示停留时期。据表回答：
5-氟尿嘧啶
低温（2～4℃）
（1）医学上，对于癌症病人通常采取手术切除肿瘤，然后再进行“化疗”。“化疗”的基本原理是通过化学药物作用于细胞周期的间期、抑制癌细胞增殖，从而达到控制病人病情恶化的目的。“化疗”时可采用&&&&&&&&&&&&
药物抑制________&& __终止_____&& ____增殖的目的。
（2）为确定植株体细胞中染色体的数目，育种工作者选取幼苗的根尖分生区细胞为材料制作临时装片进行观察。实验基本步骤为取材&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
制片观察。观察发现只有少数细胞处于细胞分裂期，原因是&&&&&&&&&
。
科目：高中生物
题型：阅读理解
癌症是癌细胞在机体内恶性增殖形成的恶性肿瘤及其相关症状的一种疾病，严重危害着人类的健康。攻克癌症是当前医学上的重要研究课题，在过去的几十年中出现了多种癌症治疗方法，主要包括手术治疗、放射治疗、化学治疗、激素治疗、基因治疗和免疫治疗等。请回答下列有关癌症及其治疗的问题。
(1)在二次大战后，导致日本广岛生活的人癌症发病率很高的致癌因子是__________。
A．物理致癌因子　　 B．化学致癌因子
C．病毒致癌因子　　 D．煤焦油
(2)在体外培养10个癌细胞，36 h后，癌细胞数目达到80个，据此推测这种癌细胞的细胞周期为__________。
(3)在正常生理条件下，人体血管内壁细胞的倍增时间约为1年，而持续的和不受调节控制的血管生成则出现于大量病态的、肿瘤转移的和内皮细胞的异常生长中，这种血管的生成速度十分迅速，它们对于癌细胞的生命活动的作用是______________________________________。这种机制为我们通过药物抑制血管的生长即“饿死肿瘤”法来治疗癌症提供了理论基础。
(4)癌症又叫“细胞周期病”，目前医学上除用化疗来治疗癌症外，还有放疗。放射治疗是利用射线如α、β、γ射线和各类X射线、电子流、中子束、质子束及其他粒子束等照射患处，直接作用于肿瘤细胞，损伤肿瘤细胞中的__________，抑制DNA复制达到终止肿瘤细胞增殖的目的。
(5)在具分生能力的细胞中，游离的核糖体数目较多，且分布均匀，此特点已被用来作为确认癌细胞的标志之一，是因为
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