血清中甘油三酯的测定中吸光度负值值为负值

血清中谷丙转氨酶活性测定中,为什么不用空白管调零测定测定管的吸光度
刈风丶907N
血清谷丙转氨酶活力的测定1.原理:在氨基酸分解代谢中,联合脱氨基作用是大多数氨基酸的主要代谢方式,通过转氨基作用与谷氨酸氧化脱氨基作用偶联而完成.此过程可用下式表示:苯腙在碱性溶液中呈现棕色,其吸收光谱的峰为439—530nm,因此在波长520nm处吸光度度增加的程度与反应体系中丙酮酸与α-酮戊二酸的摩尔比基本呈线性关系,故可藉以测定谷丙转氨酶的活力.2. 器材与试剂:试管架,微量进样器,洗耳球,分光光度计,水浴锅,移液管牛血清,谷丙转氨酶底物,2,4-二硝基苯肼,氢氧化钠(0.4mol/ L),标准丙酮酸(500μg/ml)3. 操作:取6支试管,按下表操作:测定管(A) 标准管(S) 对照管(B) 空白管 底物(ml) 0.5 0.5 37℃水浴5min 牛血清0.1ml 丙酮酸0.1ml 牛血清0.1ml 水0.1ml 混匀后,37℃水浴准确保温30min 2,4-二硝基苯肼(ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 底物(ml) 0.5 0.5 混匀后,37℃水浴准确保温20min NaOH(ml) 5.0 5.0 5.0 5.0 混匀后,静置10min,在520nm下比色,读取A、B、S管的吸光度值.4.注意事项:1. 酶在37℃下与底物作用30min后,以能产生2.5μg的丙酮酸为一个活力单位.2. α-酮戊二酸也能产生苯腙,但在520nm下远较丙酮酸的低.3. α-酮戊二酸和2,4-二硝基苯肼对显色有一定干扰,注意添加量.5. 结果与分析:计算谷丙转氨酶活力.(A—B)×500 A—B谷丙转氨酶活力 = = ×200S×2.5 S
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实验4-血清甘油三酯含量测定
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3秒自动关闭窗口在血清谷丙转氨酶活性测定实验中,比色时以空白管调零,测测定管的吸光度值可不可以,为什么?_百度知道
在血清谷丙转氨酶活性测定实验中,比色时以空白管调零,测测定管的吸光度值可不可以,为什么?
提问者采纳
不可以,因为空管不能作为空白对照。应该用稀释血清所用的溶液做空白对照。
为什么不能
如果用空白的话会导致什么后果呢?实验数据会有什么样的误差?
麻烦能具体回答一下吗?
比如说,我要测一定浓度葡萄糖溶液的吸光度,我所用的空白对照必须是一管水,而不能是一个空管子。如果用空管子作对照,测出的值偏小,而样品的真实吸光度是测出的实际值减去水的吸光度,从而导致样品的吸光度偏大。
提问者评价
太给力了,你的回答完美地解决了我的问题,非常感谢!
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血清甘油三酯测定的意义及影响因素
&&&&&&&&&甘油三酯测定用于糖尿病、肾病、脂代谢紊乱及多种内分泌疾病的诊断和治疗效果的监测。本文介绍甘油三酯测定的临床意义及其影响因素。
  (Triglyceride,TG)&又称中性脂肪,是甘油中的3个羟基与3个长链脂肪酸形成的酯类。由于甘油骨架上可分别结合3分子、2分子或1分子脂肪酸,所以分别存在甘油三酯、甘油二酯和甘油一酯。血浆中的甘油酯90%~95%是甘油三酯,其结合的脂肪酸有油酸(44%)、棕榈酸(26%)、亚油酸(16%)和棕榈油酸(7%)。甘油三酯溶解度低,在血浆中与载脂蛋白结合形成脂蛋白复合体进行运输。体内富含甘油三酯的脂蛋白主要是乳糜微粒(来源于饮食的外源性甘油三酯)和极低密度脂蛋白(靠其转运内源性甘油三酯)。甘油三酯测定用于糖尿病、肾病、脂代谢紊乱及多种内分泌疾病的诊断和治疗效果的监测。本文介绍甘油三酯测定的临床意义及其。
  正常人的甘油三酯水平为&1.70&mmol/L
  美国国家胆固醇教育计划(NCEP)成人治疗组指南推荐甘油三酯<1.7&mmol/L是理想范围;1.7~2.25&mmol/L为边缘增高;2.26~5.64&mmol/L为增高;>5.65&mmol/L为很高。
  我国《血脂异常防治建议》中提出的判断标准为<1.7&mmol/L是理想范围;>1.7&mmol/L为升高。
  临床应用价值
  生理性变化
  受生活条件和饮食方式、年龄、性别等因素的影响,甘油三酯可有生理变动。例如,高脂饮食后甘油三酯会升高,一般在餐后2~4小时达高峰,8小时后基本恢复空腹水平;缺乏运动、肥胖也可使甘油三酯升高;成年后随年龄增长,甘油三酯水平也逐渐升高;此外,其还可受性别影响,中、青年男性的甘油三酯水平高于女性,50岁后女性则高于男性。
  与某些疾病或异常状态相关
  甘油三酯是冠心病的独立危险因素,是动脉粥样硬化发生的重要因素之一。甘油三酯可使血液的凝固性增强,并抑制纤维蛋白溶解,促进血栓形成,故与冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生有密切关系,约80%的心肌梗死患者甘油三酯增高。
  甘油三酯增高还可见于多种疾病或异常状态中,如原发性高脂血症(多有遗传因素)、动脉粥样硬化症、肥胖症、阻塞性黄疸、糖尿病、自身免疫性疾病、口服避孕药、严重贫血、肾病综合征、甲状腺功能减退等。
  此外,大量饮酒后亦可使甘油三酯假性增高。
  影响因素
  受检者准备
  患者抽血前2周应该保持平常的饮食习惯,禁止进食高脂肪食物。抽血前24小时不可饮酒,并要避免进行剧烈运动。应空腹12小时(可正常饮水)后再抽取静脉血。
  除监测降血脂药物的治疗效果外,抽血前均应停用可影响血脂水平的药物(如降脂药、避孕药、某些降压药、激素等)。
  由于甘油三酯的个体波动非常大,最好测2~3次(间隔1周)并取平均值。
  血液样本
  因体位可影响水分在血管内外的分布,进而影响到血脂水平,故建议坐位采血。
  测定甘油三酯时,可使用或血浆样本进行检测。但在使用血浆样本检测时,应使用肝素或乙二胺四乙酸(EDTA)作为抗凝剂,不可使用柠檬酸、草酸或氟化物。血清的测定结果约比血浆高3%。
  样本稳定性
  血浆或血清样本在4&℃下可保存5~7天,零下20&℃时可稳定保存3个月。但若样本长时间保存在室温下,可自发水解,生成游离甘油;因其来自于甘油三酯,因此如果采用两步法测定,不应从甘油三酯的值中减去甘油的量。
  干扰因素
  不同厂家的试剂抗干扰能力不同。若标本溶血,使血清或血浆中血红蛋白>2&g/L,则会引起甘油三酯水平增高。胆红素>342&&mol/L和抗坏血酸>30&mg/dl时会引起甘油三酯过低,因为其能和过氧化氢发生反应。
  检测方法
  目前国内外大多用于测定甘油三酯的商品试剂均采用一步测定法,即测定结果中包含了血清中游离甘油的量。在健康的正常个体中,血清中的游离甘油约为1.1&mmol/L,由此引起的误差是可忽略的。
  但有些标本中游离甘油的含量明显升高,如患糖尿病、情绪应激、服用了含甘油的药物或正在使用静脉营养等,此时若须计算来自甘油三酯的甘油含量,则应减去游离甘油的量。
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