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【图片】流式细胞仪做的周期图片如何看
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右边的参数，都是什么意思，请各位朋友帮忙指导，谢谢哈。
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最重要看各个时期的比例，G1：47 S：26 G2 24C.V(Coefficient of Variance)变异系数，10以下是最好的，你这个稍微大了一点。其他的信息不实很重要~
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谢谢你，CV一般多少合适。
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哦，那超过10，影响大吗，说明什么问题？还有发文章有影响吗
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变异系数大就是数据在周期拟合的算法的时候距离均值的差距，就是标准差除以均值，统计学的指标~
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意境 变异系数大就是数据在周期拟合的算法的时候距离均值的差距，就是标准差除以均值，统计学的指标~ 你好，请教CV大于10，是不是说明数据不可靠？发论文是不是不行呢
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这要看你的实验设计对于数据的要求了，不同的实验，数据不一样。周期检测本来就要重复几次，你再多做几次看看就行了~
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是请人做的，还有在低中高三个浓度下都显示凋亡且浓度dependence，但是同样三个浓度下周期上没有sub-G1，怎么回事，请教。
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骨髓间质干细胞分离培养的经验总结
骨​髓​间​充​质​干​细​胞
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本周热点话题---骨髓间质干细胞分离培养纯化经验交流!!希望同志们踊跃发表自己实验心得体会.这是本栏目初步尝试,想依此推动动态交流!将给予2-3分的奖励!!欢迎参与!下周话题--骨髓间质干细胞诱导分化MSCs的分离与纯化 1968年，Friedenstein等利用自然贴壁法获得的骨髓基质细胞中首先证明了骨髓间充质干细胞的存在。用单纯直接贴壁法获得的骨髓基质细胞主要包含成纤维样间质干细胞、小的非粒性细胞（循环干细胞，RS－1）、小的粒性细胞（RS－2）以及内皮细胞等多种细胞成分[2]。为进一步研究骨髓间充质干细胞的生物学特性和分化特点，人们一直试图利用某种方法获得更为纯净、单一的间充质干细胞[3]。梯度离心是目前应用最多的一种方法，Manas等人分别利用1.073g/ml的Percoll和1.077g/ml的Ficoll对同一来源的骨髓进行分离获得两组细胞，分别培养于含10％FBS的DMEM和LTBMCi培养液内，他们发现：细胞传一代后，流式细胞仪检测发现经Percoll分离的细胞表现为均一的间质干细胞标志物SH－2和SB－10双阳性，造血标志物CD14和CD45阴性，而Ficoll分离的细胞中SH－2和SB－10双阳性的仅占21.2%，相反CD14和CD45双阳性的比例却接近了10％，所以他们认为经Percoll（1.073g/ml）分离的细胞为单一的间质干细胞（MSCs），而经Ficoll（1.077g/ml）分离的细胞为基质细胞和造血细胞等多种细胞的混合体[4]。 上述三种分离方法中自然贴壁法和Ficoll法获得的是混和细胞，在细胞成分方面两者无区别，但贴壁法获得细胞更多，而且增值速度更快。通过Percoll法，我们可以获得高度特异的成熟的骨髓间充质干细胞（成纤维样），但获得量远没有以上两种方法多，而且其中不含有RS细胞，同时增值速度远较前2种方法慢，已有研究表明MSCs增值能力与RS－1有密切的关系，即RS－1细胞的存在与否对维持MSCs的增值能力有着非常重要的作用，而MSCs分泌的各种细胞因子又调节着RS－1细胞的循环。所以有人认为RS－1细胞实质上就是进入循环的非定向的骨髓间充质干细胞[5]。 MSCs的特征 骨髓基质细胞目前还没有明确的表型分类，骨髓间充质干细胞目前也还没有高度特异的表面抗原。目前研究表明骨髓间充质干细胞的表面表达了多种特异性抗原，以及多种细胞因子和生长因子的受体。如SH－2、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、Stro－1等，其中的CD71被认为是成熟间充质干细胞的标志[6][7]，而作为造血细胞典型的表面抗原CD45，CD34和CD14则表达阴性。见表－1[6][7][8][9][10]。 表－1 MSCs的表面抗原以及分泌的细胞因子、生长因子、粘附分子 和细胞外基质 标记物类型
标记物 特异性抗原
SH2，SH3，SH4，STRO－1，MAB1740，α－平滑肌肌动蛋白， 细胞因子和生长因子受体
IL－1R，IL－3R，IL－4R，IL－6R，IL－7R，LIFR，SCFR，G－CSFR，IFNγR，TNFIR，TNFIIR，TGFR，bFGFR，PDGFR，EGFR 细胞因子和生长因子
ILs：1α，6，7，8，11，12，14和15 LIF，SCF，GM－CSF，G－CSF，M－CSF Fit－3配体 粘附分子
整合素：αVβ3，αVβ5 ICAM－1，ICAM－2，VCAM－1，ALCAM－1，LFA－3，L－选择素，endoglin，CD44 细胞外基质
胶原：Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ和Ⅵ型 纤维连接素（fibronectin） 层粘连蛋白（laminin），hyaluronan，proteoglycans 从表－1中我们可以看出骨髓间充质干细胞的表面抗原非常复杂，MSCs也能分泌种类众多的细胞因子和生长因子以及粘附分子和细胞外基质，这就提示MSCs在骨髓微环境的构成以及维持骨髓微环境的功能中有着非常重要的作用。而在骨髓的组成中起着重要作用的骨桥蛋白和透明质酸的受体CD44在MSCs表面的高表达也证实了这一点[8][9]。1．
Marx JC, Allay JA, Persons DA, et al. High-efficiency transduction and long-term gene expression with a murine stem cell retroviral vector encoding the green fluorescent protein in human stromal cells[J]. Hum Ther, ):1163. 2．
Friendenstein AJ, Petrakova KV, Kurolesova AI, et al. Heterotopic transplants of bone marrow, Analysis of precursor cells, for osteogenic and hematotoxic tissues. Transplantation -247. 3．
刘晓丹，郭子宽，李秀森等。人骨髓间充质干细胞分离与培养方法的建立。军事医学科学院院刊。)：282－284. 4．
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纺锤形细胞细胞组织化学特征 碱性磷酸酶弱阳性 糖原染色强阳性 a-醋酸萘脂酶阳性 过氧化酶阳性 I型胶原表达阳性细胞表面特征：阳性：CD 44 50 54 56 58 102 106 166
3 4 5 14 15 34 45
HLA-DR等等书上说培养用低糖的DMEM,楼上说成骨诱导要用高糖的DMEM,难道向成骨诱导要改用高糖的DMEM？另细胞表面抗体检测全套抗体购买太贵，不知哪里可帮做呢max wrote:书上说培养用低糖的DMEM,楼上说成骨诱导要用高糖的DMEM,难道向成骨诱导要改用高糖的DMEM？另细胞表面抗体检测全套抗体购买太贵，不知哪里可帮做呢不错 的确要换 详见 杨志明《组织工程》P126－129抗体检测就要看不同的分子生化实验室购买的抗体情况了不过上面的多数比较常规 大型生化室应该有谢谢主任，直接早期贴壁分离纯化是很实用的，但是否有将这样处理的细胞作过表面标志测定呢，那样似乎更能说明该方法的优越。再谈谈个人的一些经验:1 在用等密度梯度离心法分离MSC时,一般取白膜样界面层细胞(单核细胞层)即可获得MSC, 其实在接近界面层的上层细胞(约1-2mm)仍然可以获得MSC,只不过相对较少而已;而在接近界面层的下层细胞就很难获得MSC了.这样,如果不想多做原代的战友就可以使用这种方法,多取些接近界面层的上层细胞进行培养.2关于兔MSC的获取:将新生日本大耳兔(10d左右)断颈处死，75%乙醇浸泡5min，无菌条件下取四肢长骨，在D-Hanks平衡盐溶液中清除骨表面的软组织及骨膜，去除骨骺，用α－MEM培养液清洗骨干部2次， 然后在α-MEM全培养液（含15%胎牛血清，青霉素100U／ml，链霉素100μg/ml，25mM HEPES，pH7.0～7.2）内，将骨干纵行刨开，轻刮骨髓腔至颜色变白，用尖吸管(5ml空针、25号针头)吸取培养液反复冲洗骨髓腔面，收集冲洗液，用细胞筛网过滤，去掉骨碎片， 1000rpm离心5min，沉淀物加10ml培养液悬浮，血细胞计数器计数，使悬液含细胞数为1×107个／ml接种,孵育80分钟后第一次换液,轻轻冲洗未贴壁细胞;以后每2-3天换液,7天后可以传代,2代以后细胞即可纯化.这样获得兔MSC细胞增殖分化能力都较好,可以传30多代,仍然保持干细胞特性3 关于山羊MSC的获取:采用Percoll离心,2400rpm,30min的效果最佳.干细胞研究进展
(ZT)尽管"干细胞"这个概念早在数十年前已经为世人所知了，但是直至今天，干细胞也仅限于功能上的定义, 而没有形态学和表型上存在的证据。干细胞可以自我更新, 繁殖产生更多的干细胞, 同时也可以分化成各种各样的祖细胞, 后者又可进一步成熟发展成许多有特定功能的细胞系。干细胞这种功能特性极大地吸引了来自基础医学和临床医学的研究者。这些关于干细胞的基本功能给基础科学的研究者们提供了一种模式, 利用这种模式,他们可以从细胞的原始阶段来研究发展生物学。干细胞所具有的修复、替代和再生的能力也为临床医学提供了一个发展新疗法的机会。鉴定因为干细胞仅仅是通过其具有的功能所定义的，所以鉴定和分离这类独特的细胞群将会成为一种非常具有挑战性的工作。胚胎干细胞（ES，一种从着床前的胚胎内细胞群中得到的一种细胞）被认为是最具有多能性的一类干细胞。随着人多能胚胎干细胞系和胚胎生殖细胞系的成功建立，这一领域成为热点。这些细胞可以在体外环境下无限制的、无差别的增殖下去,而且还能保留着向许多方向分化的能力。尽管胚胎干细胞有很大的发展潜力,但是围绕着来源于胚胎的细胞及组织的伦理学争论还是将其从试验和应用领域排除出去了。因此，成人干细胞将会成为未来治疗手段的首选。目前已经从成人组织中发现了多种干细胞系。其中一种成人干细胞系在人体造血活动中扮演着重要角色，称为造血干细胞（HSC）。这种干细胞可以终生增殖和分化，产生淋巴细胞和骨髓细胞。骨髓源性干细胞能够分化成各种细胞：脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、肝实质细胞、心肌细胞和神经元。在生长期和成熟的哺乳动物中枢神经系统有一种未分化的，可以产生多种子代的细胞，称为神经干细胞(NSC)。神经干细胞的发现和其广泛的发展前景也极大的激起了研究者的兴趣。利用神经干细胞的这种可塑性（即人们常说的nestin positive cells）可以产生出一个谱系，并且可以在神经移植上派上用场，比如替代受伤后或神经退行性变后的神经组织。来源于上皮和脂肪组织的多能干细胞也在被逐步认识。因为潜在的伦理学问题和组织相容性问题，自体成人干细胞移植将会成为今后组织工程战略中很有希望的方向。但是成人干细胞能否和胚胎干细胞一样的有效，依然不能定论。脐带血(UC可能是替代骨髓或外周血作为HSC的一个有效来源。关于脐带血干细胞的特性和应用潜力，目前还在广泛的试验当中。 分离理想情况下，一种真正的干细胞系在体外处理前必须在体内环境下来鉴别出来。但是，目前大多数分离干细胞的工作都是在体外模拟环境中进行的。体外分离技术是建立在对细胞表面标记物的识别基础上。已经用来纯化干细胞的标记包括CD34、AC133、STRO-1、神经营养受体p7520等。分离方法包括荧光标记细胞分选、免疫磁分离和免疫吸附柱分离。最近发现了一些新奇的细胞标记物阴性的干细胞，因此有些人对使用单一细胞标记物来分离干细胞提出了一些异议。例如，细胞膜上的CD34表达并不总和干细胞的活动有关。在小鼠身上有大量静止的干细胞系，它们缺乏CD34的表达，但是却拥有完全的再建能力。一种类似的静止CD34阴性的造血干细胞也在人体上被发现。因此，利用某些特定成熟细胞的表面标记物来去除成熟细胞而保留干细胞的方法将会在未来占据更大的优势。 扩增为克服干细胞数目少的局限性,研究人员致力于开发干细胞体外扩增技术.然而,要使干细胞在长期扩增中保持未分化状态和多系分化潜能,研究人员尚面临着巨大挑战。含已知细胞因子和生长因子的无基质无血清体外培养物最终目的是应用于临床,而造血细胞在临床上有广泛应用前景。目前科学家已成功开发体外培养人造血干细胞(HSC)技术以获得大量HSC。IL-3、干细胞因子(SCF)和Flt-3配体(FL)具有早期效应和细胞系非特异性造血刺激功能, 因而在干细胞扩增中颇受青睐。但目前为止,还没有获得这方面HSC体外扩增的确凿证据。在加入FL、TPO(thrombopoietin) 、IL-6 和IL-11条件下,脐血HSC得以最大程度地扩增。PDGF-BB和EGF则使人BMSC最大程度地扩增。神经元祖细胞已从人皮质培养物中成功分离,并在EGF和FGF-2条件下扩增,200天不到的时间内细胞数增加了150万倍。过去十年内这些体外干细胞和祖细胞扩增实验的开展归功于重组细胞因子和细胞筛选技术的进展,因此,发现新细胞因子和已有细胞因子的新功能可促进干细胞扩增研究。另外, 系统性分析生长因子受体的表达有助于设计干细胞体外扩增培养的新方法. 图1干细胞能增殖并产生其它干细胞,也能分化为各种祖细胞,进而发育为特定细胞系的成熟细胞. 分化干细胞研究的主要方向是使之分化为一个特定的目标细胞群,近年来有大量关于体外和体内干细胞分化为各类型成熟细胞的报道(图1).其中控制干细胞分化的细胞外信号之一是生长和分化因子的分泌. TGF-β家族成员对胚胎干细胞和神经原干细胞的分化有明显的导向效应. Wnt家族成员也在干细胞分化中发挥重要作用,但由于不能纯化Wnt功能蛋白,使得进一步研究其具体功能受到限制。除了分泌因子外,膜蛋白和细胞外基质构成了决定干细胞分化的微环境。曾有体外ES细胞分化实验证明:使用FGF-2、 VitC、SHH(sonic hedgehog) 和FGF-8能从小鼠ES细胞获得大量多巴胺能和5-羟色氨能神经元。也有体内和体外从小鼠ES细胞分离胰岛素表达细胞的报道。这些研究表明了在一定条件下从ES细胞获取具有一定功能的成熟细胞的可行性。同时这些实验模型有助于研究帕金森氏综合症和糖尿病等疾病发病的分子机制和治疗方案。还有体内体外实验证明, 某一组织来源的成人干细胞可以被诱导分化为另一种组织。这些发现说明在特异的环境下,组织特异性成人干细胞和ES细胞并无本质区别。鉴别和分离干细胞的一些常用标志当干细胞更适合作为一种功能学上的概念时，一些分子标志物已经被用来给不同的干细胞群体定性。尽管这些早期标志物的作用还有待确定，细胞独特的随发展阶段而变化的表面标志为初步鉴定并分离干细胞提供了有用的工具。现总结以下标记物单独或联合应用于干细胞研究以鉴别和分离细胞:胚胎干细胞标记物:Oct-4 ,SSEAs (特异性胚胎抗原)造血干细胞标记物:CD34,CD133,Sca-1 (干细胞抗原1, Ly-6A/E), ABCG2 (ATP-binding cassette superfamily G member 2)间质/基质干细胞标记物 : STRO-1神经干细胞标记物：Nestin, PSA-NCAM (多唾液酸-神经元黏附分子), p75 Neurotrophin R (NTR)
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植物细胞化学成分是什么?细胞间质又有那些成分?死细胞和活细胞的化学成分有没有不同?
植物细胞化学成分是什么?细胞间质又有那些成分?死细胞和活细胞的化学成分有没有不同?
植物细胞的化学成分主要有: 水、糖类、蛋白质（各种酶,结构蛋白,细胞骨架）核酸、脂类、多肽、氨基酸,此外还有 果胶、纤维素、半纤维素、淀粉以及一些游离的金属离子（K、Na、Ca、Fe、Mn等)解释一下：其中的水、糖类、蛋白质、脂肪以及核酸是生物体所需的基本成分,这个没什么好说的.多肽、氨基酸是合成蛋白质的中间产物和基本原料,这个也是存在的.果胶、纤维素、半纤维素是植物细胞壁的组成成分,淀粉的光合作用的产物.金属离子主要用来调节细胞的渗透平衡等,比如钾和钠,镁和锰是叶绿素的成分.细胞间质液含有细胞在代谢时所需要的全部物质,包括：水、二氧化碳、蛋白质、纤维素、糖类、无机盐、尿素以及一些激素等.解释：细胞间质是由细胞产生的不具有细胞形态和结构的物质,它包括纤维、基质和流体物质（组织液、淋巴液、血浆等）由于细胞凋亡的时候会发生自溶现象,死细胞和活细胞的化学成分有很大不同,最主要表现在核酸含量不一样,其次蛋白质的含量也有区别.
别看上楼的 他说的不对
：果胶，纤维素、半纤维素、β-葡聚糖是细胞壁的主要成分一、糖类 二、蛋白质 三、核酸 四、脂类 这些是细胞细胞膜的主要成分
生物都是由一定的化学元素（C，H，O，N，P，S，K，Ca，Mg，Fe，Mn，Zn，Cu，P，Mo，Cl，Ni等)然后由这些化学元素构成化合物，不管是植物细胞还是动物细胞，构成的化合物都包括一、糖类 （淀粉，纤维素，麦芽糖，蔗糖，果糖）二、蛋白质 三、核酸 四、脂质 五，水六，无机盐不过落实到具体的化合物上有一定的不同...
植物细胞的化学成分:
二、蛋白质
六，无机盐细胞间质成分：果胶，纤维素、半纤维素、β-葡聚糖、死细胞与活细胞的蛋白质活性，酶活性，核酸含量均有不同}