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试剂名称：人透明质酸结合蛋白1(HABP1)ELISA试剂盒
英文名称：ELISA Kit for Angiostatin (ANG)
国产/进口：进口
产地/品牌：美国USCN
参考报价：800-5000
总点击数：105
本半年点击数：4
产品类别：
使用前彻底阅读说明书。本酶联免疫试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。【工作原理】。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。【每套试剂盒中内容】(96T)材料 数量标准品 96T(2vial)预包被抗体的96孔板 96T（8×12）生物素标记人ANG抗体 96T (1:100)ABC（亲和素-过氧化物酶复合物） 96T (1:100)样品稀释液 96T×2抗体稀释液 96T×1ABC稀释液 96T×1TMB显色液A 96T×1TMB显色液B 96T×1TMB终止液 96T×1ELISA专用洗涤液 96T×1(1:25)【需要而未提供的试剂和器材】1． 37℃恒温箱。2． 标准规格酶标仪。3． 自动洗板机。4． 单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。5． 蒸馏水，容量瓶等6． 干净的试管和Eppendof管。【注意事项】1. 从-20℃取出的试剂盒，最好在4℃解冻过夜。盒内每一瓶解冻的溶液在开启瓶盖之前都要轻轻摇匀，避免解冻时出现的分层，否则会出现浓度不均一的现象。2. 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。3. 配制各种试剂时，切记混匀！4. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。5. 建议所有标准品、样本都做双份检测。6. 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活！7. 为免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试管。【洗板方法】手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的PBS或TBS洗涤缓冲液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。【样品的准备和保存】样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存，且避免反复冻融。血清――用干净试管收集血液，室温凝固2小时或4℃过夜，离心1000×g 10分钟，收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。细胞培养、组织匀浆、体液――离心去除沉淀，立即分析或分装后-20℃冷冻保存。【样品稀释的一般原则】用户须查阅文献了解标本内待测因子的含量，决定适当的稀释倍数，以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。【试剂的准备和保存】A. 标准品的稀释和使用：在使用前2小时内准备。将冻干品管内加入1ml样品稀释液，彻底溶解后做倍比稀释。8稀释后的标准品在2小时内使用。B．生物素标记抗体工作液：在使用前2小时内准备。1． 根据每孔需要0.1ml计算总的用量（实际配制时应多配制0.1-0.2ml）。2． 按10ul生物素标记抗体稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。C．亲和素-过氧化物酶复合物（ABC）工作液的准备：在使用前1小时内准备。1． 根据每孔需要0.1ml计算总的用量（实配时应多配制0.1-0.2ml）。2． 按10ul亲和素-过氧化物酶复合物（ABC）加ABC稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。D. TMB显色工作液的准备：在使用之前30分钟，按TMB显色液A 9份加 TMB显色液B 1份的比例配制TMB显色工作液。【操作程序】1． 确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目。2． 将倍比稀释的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。3． 酶标板加上盖，37℃反应90分钟。4． 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。5． 将准备好的生物素抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次，每次浸泡1分钟左右。7． 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次，每次浸泡1-2分钟左右。9． 按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液，37℃避光反应，反应过程中，要经常的观察，当肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔差别不明显时，即可加入TMB终止液0.1ml/孔。（显色反应最长不要超过30分钟）。10． 用酶标仪在450nm测定O.D.值。11． 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍，其实际浓度应该×N。【操作程序总结】：准备试剂，样品和标准品加入准备好的样品和标准品，37℃反应90分钟洗板2次，加入生物素化人ANG抗体工作液，37℃反应60分钟洗板3次，加入ABC工作液，37℃反应30分钟洗板5次，加入TMB显色液，37℃反应加入TMB终止液30分钟之内读OD值计算标本待测因子含量【特异性】： 系统和其它细胞因子无交叉反应。【保存】： -20℃ [短期内（如两周）可4℃【有效期】： 12个月（-571℃）。【用途】： 用给我留言于体外定量分析液体标本（通用型）。
上海北诺生物科技有限公司成立于2007年,是由留美生物医学界专家与国内生命科学界知名专家共同创办，由中科院健康科学研究所、上海市免疫学研究所、上海市内分泌研究所、上海市血液学研究所、上海交通大学、上海交通大学医学院附属瑞金医院等生命科学研究专家提供技术支持和理论指导。
北诺生物精选国际一流品牌和国内经过认证的、质量较为可靠、有质量体系管理的产品供应商的产品，能够根据课题需要，提供基于免疫学、分子生物学和细胞生物学，微生物学产品组合。通过进口产品和国内精选、质量可靠的产品组合，保证您的课题能顺利、甚至高质量完成。
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&&&&公司初期的目标是建立国内生命科学研究提供快速供货系统，我们正在建设全备的生命科学研究试剂现货供应中心，为生命科学研究的快速发展服务。公司的最终目标是在生命科学和医学科学研究领域创造具有国际竞争力的自主知识产权品牌产品，力争打破欧美生物技术公司在生命科学领域一同天下的局面，促进中国生命科学研究领域产业化的发展，为中国生命科学的发展贡献一份力量。
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青海省第五人民医院（青海省肿瘤医院）始建于1960年，是青藏高原唯一的一所集医疗教学科研预防和康复为一体的省级肿瘤专科医院。附设青海省（高原）肿瘤防治研究所青海省肿瘤专家诊疗会诊中心健康体检中心防癌体检中心高原体检中心等机构，是省医保市医保铁路医保新农合海东地区海西州海南州城镇职工和城镇居民医疗保险定点医疗机构，海北州城镇职工在我院门诊及住院可直接刷卡。医院设有18个肿瘤单病种综合治疗中心，38个临床科室和17个医技科室，其中肿瘤科肿瘤放疗科肿瘤妇科乳腺疾病科肾内科为重点学科。学科优势主要体现在临床肿瘤手术放射治疗与化疗热疗的有机结合，以肿瘤放疗技术优势著称于省内外。拥有一批享受国务院特殊津贴的专家教授和享誉省内外的学科带头人，现有德国肿瘤标志物检测仪和我省唯一一台进口西门子肿瘤放疗直线加速器（省市级城镇职工居民新农合参保项目）荷兰后装机（近距离放疗机）美国可视化乳腺诊断仪等40余台国际先进的肿瘤专科检查治疗设备。医院在积极诊治高原病常见病及多发病的基础上，主要致力于乳腺癌胃癌肺癌结直肠癌肝癌食管癌恶性淋巴瘤妇科肿瘤头颈部肿瘤泌尿生殖系统肿瘤骨肿瘤等各种肿瘤的诊断和治疗。医院承担了卫生部乳腺癌宫颈癌两癌筛查以及国家省级多项科研课题，获得国家科技进步二等奖等多项科研奖励。医院医疗辐射整个高原，病人来源于尼泊尔等国外及我省甘肃宁夏西藏等周边省份。我院与国内著名的中国医科院肿瘤医院辽宁省肿瘤医院北京肿瘤医院天津肿瘤医院山东肿瘤医院为协作友好医院，通过专家亲诊远程会诊联合手术等方式造福我省广大患者，在家门口就能享受到国内著名肿瘤专家的亲自诊治，对解决我省群众看病难看病贵看病远发挥出积极的作用。我院愿以高原特色的肿瘤学专业人才先进的医疗设备精湛的医疗技术科学的医院管理舒适的就医环境和人性化的医疗服务，打造省内一流西北先进国内知名百姓满意的现代化肿瘤专科医院。地址：西宁东城东区为民巷24号健康热线：　(邱主任)专家门诊：周一到周六(上午)健康热线：　(邱主任)体检预约：　(何主任)专家咨询：(赵主任)　(潘主任)　(邢主任)
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结直肠癌患者血清白细胞介素18的水平检测及其临床意义的研究.pdf33页
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硕士学位论文
结直肠癌患者血清白细胞介素18的水平检测及其临床意义研究
姓名：王巍巍
申请学位级别：硕士
专业：临床医学（肿瘤学）
指导教师：韩俊庆
山东大学硕士学位论文
Interleukin--18 白细胞介素18
酶联免疫吸附法
肿瘤标志物
carcinoma--embryonicantigen癌胚抗原
●●。。_-。H“H“_”。--_’。。。。-_。‘。。。。“。‘。“。“。“1“。。。。”。。。‘。‘。…。’’’’。……‘‘“。‘…‘……一…一
carbohy--drateantigenl9--9糖链抗原19―9
antigen72--4糖链抗原72―4
carbohydrate
糖链抗原50
carbohy--drateigen50
糖链抗原242
carbohydrategen242
人绒毛膜促腺激素一B
gonadotroph
coloncancersecreted
结肠癌分泌蛋白一2
正在加载中，请稍后...HABP1在人卵巢癌细胞系中的表达及与紫杉醇敏感性的关系--《第五届中国肿瘤学术大会暨第七届海峡两岸肿瘤学术会议、国际肿瘤细胞与基因治疗学会会议、第二届中日肿瘤介入治疗学术会议论文集》2008年
HABP1在人卵巢癌细胞系中的表达及与紫杉醇敏感性的关系
【摘要】：目的探讨HABP1在人卵巢癌细胞系SKOV3、HO-8910PM、HO-8910LM、OVCA429和OVCA4 20中的表达和定位及其与紫杉醇敏感性之间的关系。方法应用荧光定量RT PCR技术和免疫荧光化学法结合激光共聚焦显微镜分别检测人卵巢癌细胞系SKOV3、HO-8910PM、HO-8910LM、OVCA429和OVCA420中HABP1 mRNA和蛋白的表达以及其在细胞中的定位, MTT法分析各卵巢癌细胞系对紫杉醇的敏感性。结果HABP1 mRNA在人卵巢癌细胞系SKOV3、OVCA429和HO-8910PM中的表达水平分别是OVCA420的3.7、2.8和2.1倍(P值均0.05),HO-8910LM和OVCA420中HABP1 mRNA的表达水平无统计学差异(P值0.05),激光共聚焦显示五种人卵巢癌细胞系中HABP1蛋白的表达变化趋势与mRNA水平基本一致,其中SKOV3、OVCA429和HO-8910PM细胞系中HABP1蛋白在细胞核周的表达量明显高于OVCA420和HO-8910LM,MTT分析显示,SKOV3、OVCA429、OVCA420、HO-8910PM和HO-8910LM细胞对紫杉醇的中效浓度分别是:0.047uM、0.221uM、0.723uM、0.092uM和0.672uM,相关分析显示HABP1 mRNA表达水平与卵巢癌细胞对紫杉醇的中效浓度之间的相关系数为-0.888,P0.05。结论HABP1的表达与卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性呈显著正相关,其机制可能是由于其在细胞中的分布位置不同所致,HABP1可作为筛选卵巢癌化疗药物的新指标。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R737.31【正文快照】：
HABP1在人卵巢癌细胞系中的表达及与紫杉醇敏感性的关系@王晶$哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇三科!哈尔滨150081
@雷利娜$哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇三科!哈尔滨150081目的探讨HABP1在人卵巢癌细胞系SKOV3、HO-8910PM、HO-8910LM、OVCA429和OVCA4 20中的表达和定位及其
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京公网安备74号山东医药 2011 年第 51 卷第 11 期HABP1 在人 卵 巢 癌细胞 中 的表达 及其对 紫 杉 醇 敏感性 的影响1 1 1 1 2* 雷利娜 ， 范丽丽 ， 邓巧子 ， 薛秀珍 ， 王 晶 ( 1 河南科技大学第一附属医院， 河南洛阳 471003 ; 2 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院)摘要: 目的 方法<b
r />探讨透明质酸结合蛋白 1 ( HABP1 ) 在 5 种人卵巢癌细胞系中的表达及其对紫杉醇敏感性的影响。 HABP1 mRNA 在人 卵 巢 癌细胞 系 SKOV3 、 OVCA429PCR 法检测各细胞系中 HABP1 mRNA 的表达 量， 采用荧光定量 RT激光 共 聚 焦 显 微 镜 观察 HABP1 蛋白的MTT 法检测各细胞系对紫杉醇的敏感性。结果 表达及定位，8910PM 中的表达 水 平 分别 是 OVCA420 的 3． 7 、 2． 8 和 2． 1 倍 ( P 均 ＜ 0． 05 ) ， HO8910LM 和 OVCA420 中 和 HOHABP1 mRNA 表达量差异无统计学意义( P 均 ＞ 0． 05 ) ， HABP1 蛋白在五种 卵 巢 癌细胞 系 中 的胞 质 中 均 有 表达， 在 SKOV3 、 OVCA429 和 HO8910PM 细胞中可见到明显的核周聚集， 8910LM 和 OVCA420 中 其 核 周 聚 集 量 明显 在 HOSKOV3 、 OVCA429 、 OVCA420 、 HO8910PM 和 HO8910LM 细 胞 对 紫 杉 醇 的 中 效 浓 度 分 别 为 0． 047 、 0． 221 、 减少， 0． 723 、 0． 092 、 0． 672 μM， 相关分析显示 HABP1 mRNA 表达 水 平 与 卵 巢 癌细胞对 紫 杉 醇 的 中 效 浓 度 之 间 的相 关系 P ＜ 0． 05 。结论 数为 － 0． 888 ， 化疗药物的新指标。 关键词: 透明质酸结合蛋白 1 ; 卵巢癌; 紫杉醇 中图分类号: R737． 31 文献标志码: B 266X( 2011 )
文章编号: 1002HABP1 高表达能增加人卵巢癌细胞对 紫 杉 醇 的 敏感性， HABP1 可作 为 筛 选 卵 巢 癌透明质酸结合蛋白 1( HABP1) 是线粒体凋亡信号 通路的一个重要调节因子， 其在多种腺癌组织中呈异 常表达。2009 年 3 月 ～ 2010 年 5 月， 我们检测了 HABP1 在卵巢癌细胞系中的表达及定位， 探讨 HABP1 的表达与卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的关系。 1 材料与方法 1． 1 HO8910PM、 材料 人 卵 巢 癌细胞 系 SKOV3 、 HO8910LM、 OVCA429 和 OVCA420 ( 黑 龙 江 省 肿瘤 研究所 ) ， 用 含 10% 胎牛血 清 的 RPMI1640 培养 基， 5% CO2 的 培养 箱 中 培养 ) 。 紫 杉 醇 ( 四川 于 37 ℃ 、 太极制药有限公司 ) ， 小 鼠抗 人 HABP1 单克隆抗 体 ( 美国 BD 公司 ) ， RNA 提取试 剂 盒 ( SK1362 ， 上海 Sangon 公司 ) ， 逆 转 录 试剂盒 ( TaKaRa 公司 ) ， 荧光 定量 PCR 试剂盒 ( 上海 科 技 开 放 发 展 有限公司 ) ， HABP1 及 GAPDH 引物( 上海 Sangon 公司合成 ) ， 噻 唑蓝( MTT， 美国 Sigma 公司) 。 1． 2 实验方法 1． 2． 1 HABP1 mRNA 水平测定 根据试剂盒说明进 ABI7000 行细胞总 RNA 的提取和逆 转 录 合成 cDNA， 荧光定量 PCR 扩增仪检测各卵巢癌细胞株中 HABP1 mRNA 表达量。25 μl 反应体系含 cDNA 1 μl， 上下游基金项目: 黑龙江省教 育 厅科 技 项目 (
) ; 黑 龙 江 省 自然 科 学 基金项目( D200858 ) 。 * 通讯作者Mix: 12． 5 μl， 引物各 0． 15 μl( 10 pmol / L) ， 加水至 25 95 ℃ 15 s， 60 ℃ 30 s， 72 μl。PCR 循环: 95 ℃ 15 min， ℃ 30 s， 共 40 个 循 环。HABP1 基因 扩 增 产 物 为 161 bp， 内参 GAPDH 扩增产物为 260 bp， 每次扩增均设阳 性对照和阴性对照。每一 样 本 均设 3 个 平 行 样。双 ［ 1 ］ 标准曲线法确定样本中目标基因的表达量 。 1． 2． 2 HABP1 蛋白的表达和定 位 细胞 爬 片 成 功 4% 多聚甲醛固定， 90% 甲醇 透 膜， 3% FBS 封 闭， 后，1∶ 100 稀 释 鼠抗 人 HABP1 抗 体， 4 ℃ 过 夜， 1 ∶ 50 稀 PI 释 FITC 标记的 马 抗鼠抗 体， 室 温 避 光孵育 1 h， Nikon TE2000E 激光共聚焦显微镜扫描 复染 1 min， 成像， 激发波长 488 nm 和 543 nm 分别 检测 绿 光 和 FITC 显 绿 色 荧 光， PI 显 红 色 荧 光， 红 光， 观察 HABP1 蛋白的表达及其在细胞中的定位。 1． 2． 3 各卵巢癌细胞 株 对 紫 杉 醇 的 敏感性 检测4 消化对数生长期细胞， 调 整 细胞 浓 度 为 5 × 10 / ml， 接种于 96 孔培养 板 中， 每 孔 200 μl， 置培养 箱 中 培养， 细胞贴壁后， 实验组每孔加 20 μl 工 作 浓 度 的 紫 1、 0． 1 、 0． 01 、 杉醇 溶 液 ， 使紫杉醇终浓 度 分别 为 10 、 0． 001 μM， 各浓度设 4 个复孔， 对照组加 20 μl 培养 液， 另设空白对照组单加培养液不加细胞， 继续培养 48 h， 每孔加入 MTT 液( 5 mg / ml) 20 μl， 培养 4 h， 弃 培养液， 每孔加入 DMSO 200 μl， 振 荡 10 min， 酶标 仪测吸光度 ( OD490 ) 值， 按 以 下 公 式 计算 存 活率， 绘 51山东医药 2011 年第 51 卷第 11 期［2 ］ 制存活曲 线， 并 利 用 中 效 方 程 式 求 得 中 效 浓 度。 存活率 = ( 实验组 OD － 空白组 OD) / ( 对照组 OD －空白组 OD ) × 100% ; 中 效 方 程 式: fa / fu = (D m ) ; Dma / m) 10 。 中效浓度 Dm = ( 1． 3 统计学方法 采用 SPSS 12． 0 统计软件， 采用 SNK 检验 以及双变 量 相 关 分析。 检 验水 方差分析、 准 α = 0． 05 。 2 结果 2． 1 HABP1 mRNA 表 达 SKOV3 、 HO8910PM、 HO8910LM、 OVCA429 、 OVCA420 中 HABP1 mRNA图1 五种卵巢癌细胞系对不同浓度紫杉醇的细胞存活率0． 66 ± 0． 06 、 0． 28 ± 表达量 分 别 为 1． 16 ± 0． 08 、 0． 02 、 0． 89 ± 0． 04 、 0． 31 ± 0． 02 ， SKOV3 、 OVCA429 8910PM 中 的表达 水 平 分 别 是 OVCA420 的 和 HO3． 7 、 2． 8 和 2． 1 倍 ( P 均 ＜ 0． 05 ) ， HO8910LM 和 OVCA420 中 HABP1 mRNA 表达量差异 无 统计 学 意 义( P 均 ＞ 0． 05 ) 。 2． 2 HABP1 蛋白的表达和定 位 5 种 卵 巢 癌细胞 系 HABP1 蛋白表达 量 与 mRNA 表达 量 基 本 一 致， OVCA429 和 HO8910PM 细胞 中 HABP1 即 SKOV3 、 8910LM 细 蛋白表达 量 明 显 高 于 OVCA420 和 HO胞， 且主要是核周表达 量 升高。 SKOV3 细胞 核 周有 HO8910PM 细胞核周有一定的聚 集， HO大量聚集， 8910LM 主 要 弥 散 分 布 在胞 质 中， OVCA429 多 集 中 OVCA420 主要弥散分布在胞质中。 在细胞核周， 2． 3 5 种 卵 巢 癌细胞 系 对 紫 杉 醇 的 敏感性 见 图 1 。由图 1 可见， SKOV3 和 HO随紫 杉 醇 浓 度 增 加， OVCA429 次 之， 8910PM 细胞存活率下降 最 为明显， 8910LM 细胞 存 活 率 下 降 较 缓 而 OVCA420 和 HOOVCA429 、 OVCA420 、 HO8910PM、 HO慢。SKOV3 、 8910LM 的 中 效 浓 度 分 别 为 0． 047 、 0． 221 、 0． 723 、 0． 092 、 0． 672 ， SKOV3 、 HO8910PM 和 OVCA429 的 HO8910LM， P均＜ 中效 浓 度 明显高 于 OVCA420 、 0． 05 。提示随 HABP1 表达水平升高， 卵巢癌细胞对 紫 杉 醇 的 敏 感 性 增 强， 表 现 为 其 中 效 浓 度 降 低。 HABP1 mRNA 水 平 与 中 效 浓 度 呈 正 相 关 ( r = － 0． 888 ， P ＜ 0． 05 ) ; HABP1 蛋白在细胞 核 周 分 布 量 大的细胞系其中效浓度较低， 对紫杉醇的敏感性高， HABP1 蛋白在细胞 核 周 分 布 量 少 的细胞 系 其 中 效 浓度较高， 对紫杉醇的敏感性低。 3 讨论 HABP1 与 p32 蛋白和 C1QBP 是 同 源 物， 其在 细胞中分布位置的不确定性使得其能与细胞内多种 因子相互作用， 发挥多 种功 能。 HABP1 可 与 丝裂原 活 化蛋白 激酶 通 路中 的 ERK 激酶结合 ， 发生 磷 酸 52化， 并被转运至细胞核中， 参与细胞增殖和凋亡的调 ［3 ］ 节。Meenakshi 等 报 道 成 纤 维 细 胞 中 过 表 达 的 HABP1 蛋白主要分布在细胞 核 周 的 线 粒体 中， 当线 HABP1 粒体中集聚的 蛋白的量到达一定程度后， 会 导致多种促凋亡蛋白的活化， 引起 细胞凋亡。 而 细 因 胞凋亡调 节 的 改 变是肿瘤化 疗 耐 药 产 生 的 主 要 原 ［4 ］ 。研究显示， HABP1 表达上调是顺铂 诱导 Hela细胞发生凋亡的必要环节， 降低 HABP1 的表达可以 ［5 ］ 导致 Hela 细胞对顺铂产生耐药 。 HABP1 的高表达能够 增 加 卵 巢 癌 本研究表明， 细胞对紫杉醇的敏感性， 其机制 可 能与细胞 核 周增 多的 HABP1 蛋白能够 增 强 紫 杉 醇 诱导 的细胞凋亡 有关。研究认为， 紫 杉 醇 高 浓 度 和低 浓 度 的 作 用机 制不同［6 ］， 高浓度紫 杉 醇 主 要 通过 微 管 稳 定机制 阻止肿瘤细胞的生长， 而 低 浓 度 的 紫 杉 醇 则 可 通过 诱 同一 导线粒体途经的细胞凋亡 程 序杀 伤 肿瘤细胞， 浓度( 10 ～ 100 nM ) 的 紫 杉 醇 持 续 ( 24 ～ 48 h ) 作 用 于 SKOV3 细胞可抑制 ERK1 /2 的活性， 激活 p38 激 酶通路， 抑制细胞增殖， 诱导细胞凋亡。由此我们推 HABP1 高表达的卵巢癌细胞在 接 受 持 续 的 紫 杉 测， 醇作用后， 其细胞内的 ERK1 /2 活性受 到 抑制， 使得 细胞质中的 HABP1 不能与 ERK1 /2 结合， 细胞 质 中 的 HABP1 增 多， 并 在 线 粒体 内 积 聚， 当超 过细胞 所 能承受的阈水平后， 导致线粒体功能障碍， 细胞产生 凋亡。HABP1 低表达的 卵 巢 癌细胞在 接 受 紫 杉 醇 作用后， 细胞核周线粒体中 HABP1 的积聚需要经过 一段较长时间才能达 到 阈 水 平， 因此在同样浓度紫 HABP1 高表达的 卵 巢 癌细胞 系 发生 杉醇的作用下， 的凋亡率要比低表达 HABP1 的卵巢癌细胞系高， 表 。 现为对紫杉醇更为敏感 HABP1 高表达 可 增 加 卵 巢 癌细胞对 综上所述， 紫杉醇的敏感性; HABP1 可作 为 监 测 卵 巢 癌细胞化 疗敏感性的一个新 指 标， 并 有 可 能 成 为肿瘤 治疗 的山东医药 2011 年第 51 卷第 11 期 一个新靶点。有 关 HABP1 在 卵 巢 癌和其 他 肿瘤 中 的表达情况需进一 步 研究， 其对其 他 化 疗 药 物 是 否 也有同样的作用尚需进一步证实。 参考文献:［ 1］ Kamal A，Datta K． Upregulation of hyaluronan binding protein 1 ( HABP1 / p32 / gC1qR) is associated with Cisplatin induced apoptoJ］ ． Apoptosis， 2006 ， 11 ( 5 ) : 861874． sis ［ ［ 2］ 陈英剑， 胡成进， 赵苗青． 大鼠 TGF2 β1 mRNA 表达水平的 SYBR PCR 方 法的 建 立［J］． 中国 实验 诊 断 学， Green Ⅰ荧光定量 RT2005 ， 9 ( 2 ) : 279281． ［ 3］ Meenakshi J，Anupama，Goswami SK，et al． Constitutive expression of hyaluronan binding protein 1 ( HABP1 / p32 / gC1qR) in normal fibroblast cells perturbs its growth characteristics and induces apoptosis ［J］． Biochem Biophys Res Commun，2003 ， 300 ( 3 ) : 686693． ［ 4］ Mor G，Montagna MK，Alvero AB． Modulation of apoptosis to reJ］ ． Methods Mol Biol， 2008 ， ( 414 ) : 112． verse chemoresistance ［ ［ 5］ Kamal A，Datta K． Upregulation of hyaluronan binding protein 1 ( HABP1 / p32 / gC1qR) is associated with Cisplatin induced apoptosis ［ J］ ． Apoptosis， 2006 ， 11 ( 5 ) : 861874． ［ 6］ Seidman R， Gitelman I， Sagi O， et al． The role of ERK1 /2 and p38 MAPkinase pathways in taxolinduced apoptosis in human ovarian ． Exp Cell Res， 2001 ， 268 ( 1 ) : 8492． carcinoma cells ［J］ ( 收稿日期:
)3 香蕉 皮 多 糖 对人 乳腺 癌细胞 Caspase蛋白表达的影响* 杨海云， 顾生玖， 朱开梅 ， 刘建楠 ( 桂林医学院药学院， 广西桂林 541004 )摘要: 目的7 ) 增殖的抑制作用及机制。方法 观察香蕉皮多糖对人乳腺癌细胞( MCF-7 细胞 分 为 两 将 MCF-1． 5 、 2． 5 、 3． 5 mg / ml 的香蕉皮多糖溶液， 组， 实验组加入 0． 5 、 对照组加入等量的 DMEM 培养 液。 均于 37 ℃ 孵 箱 中 48 、 72 h。采用 MTT 法测定各组 MCF7 细胞增殖抑制率， Western blot 法测定 Caspase3 蛋白表达变化。 结 培养 24 、 果 7 细胞增殖抑制率 增 加， 3 原酶 出 现 降 香蕉皮多糖干预后 MCF且呈 时 间 和 剂 量 依 赖 性; 干预 48 h 后 Caspase7 细胞凋亡， 香蕉皮多糖可诱导 MCF其 作 用机 3 表达随药物浓度增加而明显增强。结论 解， 其活性成分 Caspase3 有关。 制可能与激活 Caspase关键词: 香蕉皮多糖; 乳腺肿瘤 中图分类号: R737． 9 文献标志码: B 266X( 2011 )
文章编号: 1002-乳腺癌是危 害 妇 女 健康 常见的 恶 性 肿瘤 之 一， 近年来其发病 有 上 升 趋势。 香蕉 为 芭蕉 科， 具有多 种药理作用。研究 表明， 多 糖 可 通过 损 伤 肿瘤细胞 的膜结构和生化特 性， 影响肿瘤细胞 内 的 信 号传 导 途径， 抗氧化、 清除 自 由基 作 用， 诱导 肿瘤细胞 分 化 和凋亡及提高抑癌基因的表达等途径达到抗肿瘤效 果。2010 年 6 ～ 9 月， 我 们观察了 香蕉 皮 多 糖 对人 7 ) Caspase3 蛋白表达的影响， 乳腺癌细胞 ( MCF并 探讨其作用机制。现报告如下。 1 1． 1 材料与方法 3 原酶 材 料 兔 抗 人 多 克 隆 抗 体 Caspase( Procaspase3) 、 Caspase3 分别 购 自 Santa Cruz 公司actin ( 鼠 和 Bioword 公司。 纯 化人 类 单克隆抗 体 β IG1 ) 、 BCA 蛋白质定量试剂盒 购 自 碧 云天公司。 辣 根过氧化物酶( HRP ) 标 记 的 兔 抗鼠二抗、 山羊抗兔 PVDF 膜均 购 自 Millipore 公司。 ECL 化 学 发 二抗、 光试剂盒购自北京博奥森公司。DMEM( 高糖) 培养 基( 含 10% 胎牛血清) 、 噻 唑 蓝 ( MTT ) 购 自 Gibco 公 7 购 自 ATCC 公司。 香 司。人乳腺 癌细胞 株 MCF［1 ～ 3 ］ 蕉皮多糖按文献 方法制备。 1． 2 7 细胞 加入 DMEM 细胞培养及干预 将 MCF37 ℃ 细胞 培养 箱 培 培养 基， 于 5% CO2 、 饱 和 湿 度、 养， 细胞为贴 壁 生 长， 用 0． 25% 的 胰 酶 消 化常 规 传 3 取对数生长期细胞， 于 5 × 10 细胞 / 孔接种于 96 代， 1． 5 、 2． 5 、 3． 5 mg / ml 的 香 孔板中， 实验 组 加入 0． 5 、 蕉皮 多 糖 溶 液 ， 每组设 5 个复孔， 空白对照组加入 等 量的 DMEM 培养液。 1． 3 细胞增殖抑制率测定 均于 37 ℃ 孵箱中培养 53117 ) 资助; 广西自 基金项目: 广西科技攻关项目( 科技攻关 0815005然科学基金( 桂科自 0640190 ; 0728229 ) 资助; 桂 林 市科 技 攻 关项目 ( 科技攻关
; ) 。*通讯作者
HABP1在人卵巢癌细胞中的表达及其对紫杉醇敏感性的影响―汇集和整理大量word文档,专业文献,应用文书,考试资料,教学教材,办公文档,教程攻略,文档搜索下载下载,拥有海量中文文档库,关注高价值的实用信息,我们一直在努力,争取提供更多下载资源。}