三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较,花色苷,花色苷色素,豌豆..
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三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较
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葡萄花色苷研究进展
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18花青素提取
桑椹酒渣中花青素提取；1材料与方法；1.1材料；桑椹果酒酒渣；1.2试剂药品；试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na；1.3主要仪器；电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高；1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）；样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤；1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较；分别以75%乙醇、85%乙醇、9
桑椹酒渣中花青素提取1材料与方法1.1材料桑椹果酒酒渣。1.2试剂药品试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。1.3主要仪器电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀）释后在分光光度计上测出OD值，以OD值代表桑椹红色素的含量。1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较分别以75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。1.4.2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。1.4.3温度对提取效果的影响以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于60、50、40、30、20℃下提取1h。1.4.4提取时间对提取效果的影响每隔20分钟取样测得OD值。1.4.5正交实验1.4.6得率试验称取一定量样品，经提取后。提取液经旋转蒸发仪蒸发，真空干燥，求得率。方法一稀HCl+95%乙醇提取1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较固定浸提温度、提取时间、液料比，分别85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）为提取剂进行浸提试验，色素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2~0.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液ODλmax和700nm处的吸光值A。按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。注：ODλmax 的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。 2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。分别称取2.0g酒渣，按液料比5、10、15、20、25、30加入相应体积的浸提溶剂，在40℃下避光提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。取1mL清液，用pH 1.0和pH 4.5的缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对液料比作图，分析液料比对色素提取量的影响。 3温度对提取效果的影响分别称取2.0g酒渣置入5个50mL的三角瓶中，各加入浸提溶剂，搅拌5 min，用封口膜将瓶口密封并用铝箔纸包裹好以避光。分别置于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃的恒温水浴上提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。取1mL上清液，用pH 1.0和pH 4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对温度作图，分析温度对色素提取量的影响。4提取时间对提取效果的影响每隔30分钟取样测得OD值。用pH 1.0和pH 4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对时间作图，分析提取时间对色素提取量的影响。5桑椹红色素酸性乙醇溶剂提取条件的正交试验根据单因素试验的结果，选取L9(3)正交试验表，以浸提溶剂中乙醇浓度、浸提时 间、浸提温度、液料比为因素，安排4水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。 方法二超声波辅助提取桑椹红色素1超声波功率对红色素提取的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，在30℃温度下，分别以200～700 W超声功率萃取20min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲液稀释(吸光值控制在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声功率作图，分析功率对色素提取量的影响。2超声温度对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，以？W超声功率分别在20～60℃温度下萃取20min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm姗处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声温度作图，分析温度对色素提取量的影响。3超声时间对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，在？℃温度下，以？W超声功率分别萃取5、10、15、20、25、30min。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声时间作图，分析时间对色素提取量的影响。 4桑椹红色素超声波辅助提取条件的正交试验根据单因素试验的结果，选取L9(34)正交试验表，以超声功率、超声温度、超声时间为因素，安排3水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。方法三微波辅助提取桑椹红色选择微波辅助提取温度30℃、40℃、50℃、60℃、70℃ , 以微波功率500W、600W、700W、800W、900W,微波辐射时间2S、4S、6S、8S、10S以及液料比10:1、20:1、30:1、40:1、50:1为单因素考察因素.选择其中重要的3因素进行正交实验。 最后HPLC分析：将三种方法所得到的产品进行HPLC分析，看其活性物质是否有变化，主要是后面两种方法是否对活性物质改变。 4 方法三超高压辅助提取桑椹红色1 压力对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；以不同压力100～500MPa进行加压3min，加压1次的处理。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对高压压力作图，分析压力对色素提取量的影响。2 加压时间对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；分别以加压时间l～5min进行300MPa，加压1次的高压处理。抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对加压时间作图，分析时间对色素提取量的影响。3加压方式―间歇式对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；分别加压1次(300MPa处理3min)、加压2次(300MPa处理1.5min，卸压，再300MPa处理1.5min) 、加压3次(300MPa处理1min，卸压，再300MPa处理1min，再300MPa处理1min)。 抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对加压次数作图，分析结果。方法四加入酶对红色素提取的影响未加酶；果胶酶0.1%；纤维素酶.01%；果胶酶0.05%+纤维素酶0.05%。测定花色苷含量的方法有很多，经典的有薄层层析法、快速测定比色法、紫外吸收光谱 (UV)等，现代的有红外吸收光谱、液相色谱(HPLC)以及核磁共振(NMR)、质谱(FAB)等。除紫外吸收分光光度法外，其余方法均需要标准色素样品，测定的是某种花色营的具体含量。这对于尚未确定组成的新样品的初步研究是一个难题，也给一般性的检验分析带来了困难。花色苷是水溶性色素，根据比尔定律，溶液的浓度与其吸光度A成正比，因此在未有标准品时，可用紫外-可见吸收分光光度法测定总花色苷的含量。花色苷含量主要有2种表示方法：色价及代入消光系数用公式计算。由此可见，关键是吸光值A的测定。综合国内外资料，主要有以下几种计算吸光值A的方法：(1)当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时，需消除叶绿素吸收含量的影响；此时，计算公式为：A=(Amax－A620) －0.1(A650－A620)国内已有用此方法测定苹果果皮表面及山植果实中花色苷含量的报道。(2)含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:直接法：在新鲜的植物提取物中，因为很少含有在花色营的最大吸收区发生吸收的干扰 物质，花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。计算公式为：A=AmaxpH示差法：在食品加工或储藏过程中，会产生褐色降解物，这些降解物和花色普具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定，通常用pH示差法。计算公式为：A=(Amax－A700)pH1.0－(Amax－A700)pH4.5本研究通过两种分光光度方法测定桑堪果汁中花色昔的含量，运用数学统计分析，比较得出了适合于桑椹中花色苷测定的简便、准确的方法，从而为其他样品花色苷含量的测定提供了一般性思路。本实验样品采用的是桑椹果酒酒渣进行试验，故只需采用pH示差法来测定总花色苷含量。在食品加工或贮藏过程中，会产生褐色降解物，这些降解物和花色苷具有相同的能 量吸收范围，这类花色苷总量的测定，通常采用pH示差法，计算公式为：A=(Amax－A700)pH1.0－(Amax－A700)pH4.5测定方法：将色素提取液，分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2～0.8之间)，并且将稀释液静置15min，达到动态平衡后，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A。参考植物生理学实验指及冯建光pH示差法测定葡萄皮红色素含量的方法，以及结合霍琳琳等采用分光光度法测定桑椹花色苷含量，得到提取液中总花色苷含量的计算公式：??m式中：V一提取液总体积(mL)； TAcy(mg/g)?A?V?n?Mn一稀释倍数；M―Cy-3-glu的分子量(449．2)；ε一Cy-3-glu的消光系数，其值为26900；m一原料的重重(g) 红色素稳定性研究1 pH值对色素颜色的影响用柠檬酸、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠调色素溶液的pH值为2.5、3.5、4.5、5.5、6.5、 7.0、8.5，室温下用色差计观察溶液颜色变化，分析pH值对色素颜色的影响。2热对色素稳定性的影响取pH为？的色素稀释液100mL于30、40、60、80、90、100℃的恒温水浴中加热，隔一定时间，测定色素溶液在ODλmax处的吸光度值，分析热对色素稳定性的影响。 3光对色素稳定性的影响取pH值为？的色素稀释液100mL分别置于直射光、室内散射光下，隔一定时间测定色素溶液在ODλmax处的吸光度值，分析光对色素稳定性的影响。4糖对色素稳定性的影响配制pH为？的含有不同浓度的葡萄糖、蔗糖的色素稀释液，隔一定时间，测定色素溶液在ODλmax处的吸光度值，分析糖对色素稳定性的影响。5防腐剂对色素稳定性的影响配制含有不同浓度的苯甲酸钠和山梨酸钾的pH为？的色素稀释液，隔一定时间，测定色素溶液在ODλmax下的吸光度值，分析防腐剂对色素稳定性的影响。6氧化剂和还原剂对色素稳定性的影响配制含有不同浓度的亚硫酸钠和过氧化氢的pH为？的色素稀释液，隔一定时间，测定色素溶液在ODλmax处的吸光度值，分析亚硫酸钠和过氧化氢对色素稳定性的影响。 7金属离子对色素稳定性的影响配制含有不同浓度的K、Ca、Na、Mg、Cu、Zn、Fe、Mn、Ba、Sn、Al的pH为？的色素稀释液，隔一定时间，观察颜色变化，测定色素溶液在ODλmax处的最大吸光值，分析不同浓度的金属离子对色素稳定性的影响。 3++2＋＋2＋2＋2＋3＋2＋2＋2+桑椹红色素抗菌性研究1分析桑椹红色素对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌的抑制作用。2分析桑椹红色素对各种细菌的抑制作用研究 注：还可以考虑怎样把桑椹红色素提纯。包含各类专业文献、中学教育、文学作品欣赏、专业论文、生活休闲娱乐、18花青素提取等内容。
　花青素提取工艺_生物学_自然科学_专业资料。花青素的提取,纯化,及其抗氧化和抗癌性的研究的方法黑大豆、紫薯花青素一、提取工艺 1、黑豆:pH2.0,醇提黑豆为乙醇浓度... 　花青素提取方法_能源/化工_工程科技_专业资料。*花青素的提取: 花青素的提取: 花青素的提取是目前花青素研究发展的热点问题,也是花青素生产、 投入使用的关键性环节。... 　紫甘蓝中花青素的提取研究 【摘要】 蓝花青素具有很强的抗氧化作用,具有清除体内自由基、过敏、保护 胃粘膜等多种功能,引起了国内外学者广泛关注。目前抗变异、抗... 　蓝莓中提取花青素北京科技大学生物技术 0902 刘炎峻 摘要:蓝莓是杜鹃花科越桔属植物,在我国有丰富的蓝莓资源,蓝莓果中含 有丰富的营养成分,特别是花青素。花青素又... 　原花青素提取方法的研究进展【摘要】 原花青素是一种具有重要生理活性的多酚类化合物。 本文综述了天然原花青素 的提取方法,其中包括有机溶剂提取、微波提取、超声波... 　花青素的提取_理学_高等教育_教育专区。生化实验报告――― 山楂原花色素的提取一 实验目的 1. 了解并掌握从山楂中制备原花色素的方法。 二 实验原理原花色素(也... 　火龙果果皮花青素提取工艺研究马冰雪,潘腾,任中清,徐亚杰,李欣欣(吉林大学 生物与农业工程学院 长春 130022 ) 摘要:以单因素实验为基础,采用 L9(34)正交试验优化... 　紫甘蓝中花青素提取实验报告_理学_高等教育_教育专区。植物生理学实验,紫甘蓝中花青素提取实验报告紫甘蓝中花青素的提取(安徽农业大学 12 青年农场主班) 花青素具有很... 　从紫甘薯提取花青素_化学_自然科学_专业资料。紫鑫公司从紫甘薯提取花青素 [
] 来源于: 12 月 15 日化工报 12 月 9 日,湖北紫鑫生物科技有限公...ww三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较19
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ww三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较19
中国农业科学):2045-20；三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的；稳定性比较；李莉蓉；1，2；，张名位，刘邻渭，魏振承，张瑞芬；1211；（1广东省农业科学院生物技术研究所/农业部功能食；摘要:【目的】比较外界因素及杀菌工艺对黑米、黑大；关键词:黑米；黑大豆；黑玉米；花色苷；抗氧化作用；ComparingAntioxidantS
中国农业科学
): Scientia Agricultura Sinica三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较李莉蓉1，2，张名位，刘邻渭，魏振承，张瑞芬1211（1广东省农业科学院生物技术研究所/农业部功能食品重点开放实验室， 广州 西北农林科技大学食品科学与工程学院，杨凌 712100） 摘要: 【目的】比较外界因素及杀菌工艺对黑米、黑大豆、黑玉米3种黑色粮油作物种皮花色苷提取物总抗氧化能力的影响。【方法】选用不同光照、温度、食品原料、防腐剂、金属离子和5种杀菌工艺（巴氏灭菌、煮沸灭菌、高温短时灭菌、高压蒸汽灭菌、微波灭菌、）处理3种花色苷提取物，采用铁离子还原法评价其处理前后的总抗氧化能力变化。【结果】黑米、黑大豆、黑玉米种皮花色苷提取物的总抗氧化能力随光照和加热时间延长而下降，温度越高下降越快，在避光、自然光和日光灯照射3种光照条件下黑米花色苷提取物的稳定性最好，其次为黑大豆花色苷提取物的，黑玉米花色苷提取物的最差；在相同温度下黑大豆花色苷提取物的稳定性最好，黑米和黑玉米花色苷提取物的较差；NaCl、蔗糖、葡萄糖等食品原料和防腐剂苯甲酸钠对3种花色苷提取物总抗氧化能力的影响不明显，5种金属离子（K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+）和5种不同杀菌工艺（巴氏灭菌、煮沸灭菌、高温短时灭菌、高压蒸汽灭菌、微波灭菌）对其总抗氧化能力均有不同程度的影响，其中高温短时灭菌的影响较小，高压蒸汽灭菌的影响最大。【结论】黑米、黑大豆、黑玉米3种花色苷提取物抗氧化稳定性受光照、温度、食品原料、金属离子和杀菌工艺等多种因素影响。关键词: 黑米；黑大豆；黑玉米；花色苷；抗氧化作用；稳定性Comparing Antioxidant Stability of Anthocyanin Extracts in SeedCoats of Three Black Cereal and Oil CropsLI Li-rong1.2, ZHANG Ming-wei1, LIU Lin-wei2, WEI Zhen-cheng1, ZHANG Rui-fen1(1Key Laboratory of Functional Food, Ministry of Agriculture/Bio-Tech Research Institute of Guangdong Academy ofAgricultural Sciences, Guangzhou Food Science and Engineering College ofNorthwest Agriculture＆Forestry University, Yangling 712100) Abstract: 【Objective】To study was conducted to compare the effects of external factors and five sterilizing processes on the stabilities of total antioxidant capacities (TAC) in three anthocyanin extracts of black rice, black soybean and black corn. 【Method】Changes in TACs of three anthocyanin extracts of black rice, black soybean and black corn before and after treatments of light, temperature, food materials, antiseptic, metal ions and five sterilizing processes of pasteurization, boiling sterilization, high temperature short time sterilization, autoclave sterilization and microwave sterilization, were analyzed by ferric reducing method. 【Result】The TAC of anthocyanin extracts from seed coats of black rice, black soybean and black corn displayed the photosensitive and thermosensitive characteristics that decreased with the prolonging of illuminating and heating time. The higher the temperature, the more Under the conditions of natural light, fluorescent light, and without illumination, the TAC stability was in the order of black rice anthocyanin extracts (BRAE), black soybean anthocyanin extracts (BSAE), and black corn anthocyanin extracts (BCAE). Under the same temperature, the TAC stability was in the order of BSAE, BRAE and BCAE. There were no significant effects of food materials such as NaCl, sucrose and glucose and preservative sodium benzoate on the TAC stabilities of these three anthocyanin extracts, while there were different effects of five metal ions of K+, Ca2+, Mg2+, Zn2+, and Cu2+ on the TAC 收稿日期：；接受日期：基金项目：国家自然科学基金项目（） 作者简介：李莉蓉（1980-），女，壮族，广西南宁人，硕士，研究方向为食品化学。Tel：020-；E-mail：lilirong-。通讯作者张名位（1967-），男，湖北荆州人，研究员，博士，研究方向为生物活性物质。Tel：020-；Fax：020-；E-mail： 2046
40卷stabilities of these three anthocyanin extracts. There were different effects of five sterilizing processes on the TAC stabilities of these three anthocyanin extracts, of which high temperature short time treatment had the least effect, while autoclave sterilization had the highest effects.【Conclusion】The TAC stabilities of these three anthocyanin extracts were affected by external factors of light, temperature, food materials, metal ions and sterilizing processes.Key words: Black rice (Oryza sativa L.); Black soybean [Glycine max (L.) Merr.]; Black corn (Zea mays L.); Anthocyanin A Stability 0
引言【研究意义】花色苷是一类带有多羟基和多甲氧基、具有2-苯基苯并吡喃结构的类黄酮化合物，广泛存在于水果、蔬菜、鲜花和谷物中。长期以来花色苷被作为一类传统的中药用于治疗高血压、发热、肝功能紊乱、痢疾、腹泻、肾结石等疾病。现代已将其视为一类高附加值的天然色素，食用富含花色苷的食品有利于改善健康状况。在2004年的IWA（International Workshop on Anthocyanins）会议上，专家、企业家和消费者们共同讨论了花色苷的营养、理化和生理活性，并将推广使用花色苷为天然食品着色剂作为目标之 一[1]。研究花色苷生理活性的稳定性对用于一些高附加值食品的开发具有重要意义。【前人研究进展】目前关于pH、光照、温度以及金属离子等外界因素对水果、蔬菜中花色苷稳定性的研究已有不少报道，但迄今关于花色苷稳定性和抗氧化能力的关系鲜有报
道[2]。【本研究切入点】黑米、黑大豆和黑玉米因其种皮富含花色苷而呈现黑色，不仅受到消费者普遍欢迎，而且也被列入中国重要的优异品种资源。目前关于其种皮花色苷的提取制备和抗氧化功能评价研究已有不少报道[3,4]，但迄今关于其抗氧化稳定性研究未见报道。【拟解决的关键问题】不同外界因素和不同杀菌工艺对黑米、黑大豆、黑玉米3种不同黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的影响，旨在为花色苷的利用提供理论依据。1
材料与方法1.1
试验材料1.1.1
黑色粮油作物品种
供试黑米、黑大豆、黑玉米品种分别为‘龙锦黑米1号’、‘粤引黑大豆1号’和‘黑玉米1号’，均由广东省农业科学院生物技术研究所提供。取3种黑色粮油作物种皮，烘干，过60目筛，备用。1.1.2
Fe3+-三吡啶三吖嗪（ferric- tripyridyltriazine，Fe3+-TPTZ）购自Fluka公司，其它试剂均为国产分析纯。 1.2
试验方法1.2.1
花色苷提取物的制备
分别称取1 000 g黑米、黑大豆、黑玉米种皮用60%乙醇液按1s4的料液比，用盐酸调pH至3.5，避光下浸提48 h。滤纸过滤，收集滤液，于50℃下减压浓缩，浓缩液用等体积的石油醚萃取3次后过AB-8大孔树脂，再用70%酸性乙醇液洗脱，收集洗脱液，50℃下减压浓缩，真空冷冻干燥，得黑米花色苷提取物（black rice anthocyanin extract，BRAE）、黑大豆花色苷提取物（black soybean anthocyanin extract，BSAE）和黑玉米花色苷提取物（black corn anthocyanin extract，BCAE）。3种花色苷提取物均呈粉末状，深黑色。1.2.2
花色苷的定量分析
准确称取0.0025 g的花色苷提取物于100 ml容量瓶中定容，在分光光度计上测定535 nm下的吸光度，按公式（1）计算总花色苷含量[5]。花色苷含量（mg?g-1）=A535×V×N98.2×M（1）（1）式中，V为花色苷溶液定容体积（ml）；N为稀释倍数；98.2为花色苷色素在535 nm处的平均消光系数；W为花色苷重（g）。1.2.3
总抗氧化能力（total antioxidant capacity，TAC）的测定
采用铁离子还原法（ferric reducing ability ofplasma，FRAP）[6,7] 测花色苷提取物的TAC，具体方法为：取适量花色苷提取物，加入1.8 ml TPTZ工作液（由0.3 mol?L-1醋酸盐缓冲液，10 mmol?L-1TPTZ溶液，20 mmol?L-1FeCl3溶液以10s1s1的比例混合而成），混匀后37℃反应10 min，593 nm测定吸光度，以10 mmol?L-1FeSO4为标准，花色苷提取物抗氧化活性以达到同样吸光度所需的FeSO4的毫摩尔数表示，单位为mmol?L-1。分别测定3种花色苷提取物处理前TAC和经各种处理后的TAC，按公式（2）计算TAC的保存率。TAC保存率（%）=C535C×100%
（2） 0 9期
李莉蓉等：三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较 2047（2）式中，C为处理后TAC值（mol?L-1）；C0为处理前TAC值（mmol?L-1）。1.2.4
光对花色苷提取物TAC影响
用蒸馏水配制浓度为0.025%、pH 3.5的3种花色苷提取物溶液，分别测定日光灯照射、室内自然光照射及室内避光条件下的0、7、14、21、28、35、42 d 的TAC值，重复3次。1.2.5
温度对花色苷提取物TAC的影响
将3种等量浓度为0.015%、pH 3.5的花色苷提取物溶液，分别在40、60、80和100℃的水浴中进行加热处理，40和60℃下分别间隔0、16、32、48、64、80和96 h取样测定TAC值，80和100℃下则分别间隔0、2、4、6、8、10 h取样测定，重复3次。1.2.6
食品原料对花色苷提取物TAC的影响
分别配制含不同浓度NaCl、蔗糖、葡萄糖，pH 3.5、浓度为0.015%的花色苷提取物溶液，测定TAC值，放置7 d后再次测定，重复3次。1.2.7
防腐剂对花色苷提取物TAC的影响
分别配制含不同浓度苯甲酸钠，pH 3.5、浓度为0.015%花色苷提取物溶液，测定TAC值，放置7 d后再次测定，重复3次。1.2.8
金属离子对花色苷提取物TAC的影响
分别配制含不同K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+金属离子浓度，pH 3.5、浓度为0.015%的花色苷提取物溶液，测定TAC值，重复3次。1.2.9
不同杀菌工艺对花色苷提取物TAC的影 响
模拟软饮料体系用蒸馏水配置花色苷提取物浓度为0.015%，糖酸比为40s1（葡萄糖8%，柠檬酸0.1%，酒石酸0.1%）的3种花色苷提取物饮料，装入玻璃饮料瓶中，装瓶量为250 ml，均分别进行63℃、30 min巴氏灭菌；100℃、10 min煮沸灭菌；110℃、1 min高温短时杀菌；121℃、0.1 MPa、15 min高压蒸汽灭菌；2 450 MHz、800 W、5 min微波灭菌处理[8, 9]。然后测定TAC值及花色苷含量。重复5次。 1.3
数据处理采用DPSV3.01专业版软件进行处理和分析。2
结果与分析2.1
3种花色苷提取物的总花色苷含量及其TAC由表1可知，3种花色苷提取物的总花色苷含量和TAC存在差异。就总花色苷含量而言，BRAE的总花色苷含量最高，与BSAE和BCAE之间的差异均达到极显著水平（P＜0.01），但BSAE和BCAE二者间差异不显著；就TAC而言，其强弱顺序为BSAE＞BRAE＞BCAE，相互间的差异达到极显著水平（P＜0.01）。 表1
3种花色苷提取物的总花色苷含量及TACTable 1
The total anthocyanin contents and TAC in threeanthocyanin extracts花色苷提取物 总花色苷含量 总抗氧化能力Anthocyanin extracsTotal anthocyanin contents (mg?g-1)TAC (mmol?g-1)BRAE 145.20±3.16Aa 9.74±0.18BbBSAE 57.54±1.59Bb 11.63±0.16AaBCAE 56.59±0.39Bb 3.39±0.01Cc表中具有相同字母的表示差异不显著，字母不相同的表示差异显著，字母大小写分别表示0.01和0.05差异显著水平。下同Values with same letters are not significantly different, those with different letters are significantly different, capital letter and small letter indicate differences at 0.01 and 0.05 levels, respectively. The same as below 2.2
光照对3种花色苷提取物TAC的影响从表2可以看出，在避光、日光灯和自然光照射下3种花色苷提取物的TAC保存率均随时间延长出现不同程度的下降，表明花色苷提取物抗氧化的光稳定性较差。其中，在光照条件下BRAE的稳定性最好，BSAE的其次，BCAE的最差。2.3
温度对3种花色苷提取物TAC的影响不同温度条件下3种花色苷提取物TAC保存率的结果见表3。由表3可知，3种花色苷提取物的TAC保存率随加热过程的延长出现不同程度的下降趋势，温度越高TAC下降得越快。在温度相对较低（＜60℃）的条件下，BSAE的TAC稳定性最好，其次为BRAE，BCAE较差；在温度相对较高（＞60℃）的条件下，亦是BSAE的TAC稳定性最好，其次为BCAE，BRAE较差。2.4
食品原料对3种花色苷提取物TAC的影响食品原料NaCl、蔗糖和葡萄糖对3种花色苷提取物TAC的影响结果见图1。在试验浓度范围内NaCl、蔗糖和葡萄糖对3种花色苷提取物的TAC有不同程度的影响。BSAE的TAC受NaCl影响有下降趋势，BRAE和BCAE的TAC对NaCl稳定性较好（图1-A）。蔗糖、葡萄糖对3种花色苷提取物的TAC影响不明显，表明花色苷的TAC对蔗糖和葡萄糖稳定性较好（图1-B、C）。NaCl、蔗糖和葡萄糖对3种花色苷提取物TAC的影响在放置7 d后，其趋势亦具有一致性（数据略）。2.5
防腐剂对3种花色苷提取物TAC的影响由图2知，随苯甲酸钠浓度增加，3种花色苷提取物的TAC变化不明显，放置7 d后亦不明显，表明 2048
BC40卷 图1
食品原料对花色苷提取物TAC的影响Fig. 1
The effect of food materials on TAC of three anthocyanin extracts 表2
不同光照条件下3种花色苷提取物的TAC及其保存率(%)Table 2
The TAC and its preservation rates of three anthocyanin extracts under different illumination conditions光照 Light BRAE 避光2.387±0.029a 2.387±0.029a 1002.387±0.029a 1003.298±0.031a 3.298±0.031a 1003.298±0.031a 1000.884±0.026a 0.884±0.026a 1000.884±0.026a 1002.106±0.051b 88.25 2.081±0.063b 87.16 2.068±0.077b 86.65 3.218±0.059a 97.53 3.214±0.056a 97.47 3.202±0.051a 97.10 0.822±0.075b 92.97 0.778±0.072b 88.07 0.784±0.070b 88.661.937±0.143c81.14 1.926±0.074c80.71 1.925±0.085c80.63 2.749±0.065b83.35 2.610±0.061b79.15 2.520±0.053b76.42 0.746±0.124c84.35 0.657±0.048c74.36 0.676±0.141c76.521.838±0.101d77.01 1.790±0.106d74.97 1.762±0.109d73.812.617±0.103bc79.36 2.411±0.069c73.11 2.363±0.067c71.64 0.630±0.011d71.23 0.617±0.107d69.86 0.628±0.081d71.031.698±0.083e71.13 1.686±0.137e70.62 1.686±0.083e70.62 2.590±0.118c78.52 2.403±0.075c72.85 2.292±0.073c69.49 0.614±0.212d69.47 0.465±0.123e52.62 0.482±0.108e54.581.622±0.173ef 67.941.613±0.089ef 67.581.603±0.143ef 67.14 2.243±0.089d 68.02 2.091±0.093d 63.39 1.817±0.160d 55.10 0.505±0.086e 57.13 0.441±0.041e 49.88 0.472±0.096e 53.411.573±0..095f65.91 1.551±0.101f64.97 1.520±0.123f63.66 2.179±0.162d66.08 1.919±0.096e58.21 1.749±0.078d53.06 0.448±0.107f50.67 0.394±0.095f44.59 0.403±0.075f45.57 时间Time (d) 0 7 14 21 28 35 42Without illumination 100 日光灯 Fluorescent light 自然光 Natural lightBSAE
避光Without illumination 100 日光灯 Fluorescent light 自然光 Natural light BCAE 避光Without illumination 100 日光灯 Fluorescent light 自然光 Natural light 花色苷的TAC对苯甲酸钠稳定性较好（数据略）。 2.6
金属离子对3种花色苷提取物TAC的影响金属离子对3种花色苷提取物TAC的影响见表金属离子稳定性较好。Mg2+使BCAE的TAC下降；即稳定性较好。 其它金属离子对BCAE的影响不明显，2.7 不同杀菌工艺对3种花色苷提取物TAC的影响不同杀菌工艺对3种花色苷提取物的花色苷含量从表5可知杀菌后3种花色和TAC影响结果见表5。苷提取物的含量和其TAC出现不同程度的下降并表现出差异。就花色苷含量而言，高压蒸汽灭菌的影4。从表4可知，在试验浓度范围内金属离子对3种花色苷提取物的TAC有不同程度的影响。K+和Mg2+使BRAE的TAC随金属离子浓度的增加而增加，Cu2+使BRAE的TAC下降，其它金属离子对BRAE的影响不明显。BSAE的TAC受Ca2+影响较大，但对其它5种杀菌工艺之间对BSAE含量的影响达到响最大，9期
李莉蓉等：三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较 2049极显著水平（P＜0.01）；高温短时和煮沸灭菌对BRAE和BCAE含量影响差异均不显著。就TAC而言，杀菌后3种花色苷提取物的TAC出现不同程度的下降，高压蒸汽灭菌对TAC的影响最大。BRAE的TAC经过5种不同杀菌工艺后，各工艺间差异达到极显著水平（P＜0.01），但高温短时杀菌后TAC与未杀菌的TAC差异不显著；BSAE和BCAE经过5种不同杀菌工艺后的TAC与未杀菌处理间差异达到极显著水平（P＜0.01）。综合比较而言，实际应BSAE和BCAE的饮料或口服液用中对含有BRAE、等产品杀菌首选高温短时杀菌，应尽量避免高温、高压杀菌处理。 图2
苯甲酸钠对花色苷提取物TAC的影响Fig. 2
The effect of sodium benzoate on anthocyanin extracts 表3
不同温度条件下3种花色苷提取物的TAC及其保存率(%)Table 3
The TAC and its preservation rates of three anthocyanin extracts under different temperature conditions温度BRAE 时间Time (h) Temperature (℃)
0 16 32 48 64 80 96 1.219±0.043b83.18 1.190±0.031c81.15 1.656±0.048bc95.15 1.702±0.039a97.77 0.484±0.032b90.81 0.485±0.034b91.111.191±0.104b81.26 1.180±0.038c80.51 1.605±0.056cd92.18 1.693±0.075a97.23 0.472±0.012b88.62 0.452±0.029c84.83时间 Time（h）1.090±0.063c 74.33 1.069±0.096d 72.95 1.572±0.038d 90.28 1.492±0.123b 85.68 0.427±0.101c 80.05 0.423±0.089d 79.451.077±0.076c 73.48 1.051±0.046d 71.67 1.462±0.106e 83.97 1.438±0.068bc 82.61 0.374±0.047d 70.18 0.335±0.072e 63.011.035±0.116c70.61 1.024±0.113d69.86 1.358±0.112f77.99 1.371±0.026c78.73 0.340±0.068e63.89 0.313±0.048f58.82100 100BSAE83.71 89.3640 1.464±0.045a 1.227±0.056b 60 1.464±0.045a 1.310±0.029b100 10097.05 98.9440 1.741±0.046a 1.689±0.039ab 60 1.741±0.046a 1.723±0.050aBCAE100 10095.89 95.8940 0.533±0.037a 0.511±0.054a 60 0.533±0.037a 0.a温度处理 Temperature（℃） BRAE 0 2 4 6 8 10 121.244±0.103c84.88 1.174±0.031c80.09 1.701±0.052ab97.68 1.664±0.053ab95.61 0.522±0.024ab97.99 0.476±0.059c89.321.206±0.103cd82.32 1.131±0.098c77.21 1.686±0.049abc96.87 1.652±0.039b94.88 0.498±0.019bc93.51 0.454±0.021cd85.131.171±0.077de 79.87 1.060±0.023d 72.31 1.679±0.022abc96.42 1.647±0.048b 94.61 0.488±0.048c 91.71 0.443±0.034de 83.041.130±0.037e 77.11 0.961±0.074e 65.52 1.630±0.067bc 93.62 1.612±0.096b 92.63 0.497±0.037c 89.91 0.431±0.067de 80.941.118±0.091e76.25 0.969±0.045e66.13 1.613±0.089c92.67 1.603±0.101b92.09 0.474±0..422±0.097e79.15100 10090.32 85.8480 1.464±0.045a 1.324±0.035b 100 1.464±0.045a 1.258±0.037bBSAE100 10098.94 96.3380 1.741±0.046a 1.722±0.046a 100 1.741±0.046a 1.677±0.065abBCAE100 10098.59 93.8180 0.533±0.037a 0.525±0.015a 100 0.533±0.037a 0.500±0.047b包含各类专业文献、幼儿教育、小学教育、专业论文、高等教育、中学教育、生活休闲娱乐、ww三种黑色粮油作物种皮花色苷提取物抗氧化能力的稳定性比较19等内容。　
　食品科技学院,武汉
中国农业科学院作物科学研究所,北京 100081) 摘要: 【目的】了解不同黑大豆种质资源种皮中花色苷的组成、含量及其抗氧化能力分布... 　食品科技学院,武汉
中国农业科学院作物科学研究所,北京 100081) 摘要: 【目的】了解不同黑大豆种质资源种皮中花色苷的组成、含量及其抗氧化能力分布...}