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酪蛋白磷酸肽及其促进矿物质吸收的因素
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酪蛋白磷酸肽及其促进矿物质吸收的因素
官方公共微信酪蛋白磷酸肽(CPP)对铁吸收影响的研究--《黑龙江八一农垦大学学报》2001年01期
酪蛋白磷酸肽(CPP)对铁吸收影响的研究
【摘要】：通过动物试验研究了CPP对铁吸收的影响。试验表明：加入FeSO4和0.1%CPP加FeSO4的饲料对贫血大鼠血红蛋白、红细胞数及血细胞压积的影响比缺铁性饲料喂饲大鼠的血液指标有显著影响（P0.01或P0.05），且缺铁性贫血的大鼠血液指标恢复较好，分别达到112.6 g/L、159.1 g/L；7.94×1012/L、8.78×1012/L；40.76%、47.59%，并且CPP和FeSO4同时添加组的效果优于添加FeSO4组的效果。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：Q51【正文快照】：
0 前言酪蛋白磷酸肽（Casein phosphopeptides,简称CPP）是极具研究开发价值的生物活性肽，因其具有极强的促钙、促铁吸收活性，在国际上倍受关注。关于CPP促钙吸收的研究，国内已有零星报道，其促进铁吸收的研究进入九十年代也引起了重视，而国内未见报道。Saito研究认为CPP
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京公网安备74号酪蛋白磷酸肽新生产工艺及其功能性质研究--《江南大学》2004年硕士论文
酪蛋白磷酸肽新生产工艺及其功能性质研究
【摘要】：酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,简称 CPP)是以牛乳酪蛋白为原料,经蛋
白酶水解得到的含有磷酸丝氨酰基的肽。在动物小肠内 pH 呈中性到弱碱性的环境中,
CPP 能阻止磷酸钙沉淀的产生,从而促进肠内溶解钙的吸收和利用。按照 N/P(摩尔比)
的不同,可以将 CPP 分为 3 个等级:N/P(摩尔比)在 24 以上的 CPP 为高 N/P(摩尔
比)CPP,N/P(摩尔比)在 15-24 的 CPP 为中 N/P(摩尔比)CPP,N/P(摩尔比)在
15 以下的 CPP 为低 N/P(摩尔比)CPP。
本课题的主要目的是研究高 N/P(摩尔比)CPP 的生产工艺。
首先,选择水解酪蛋白的酶以及水解度监测方法,并利用纳滤技术去除酪蛋白水解
液中的部分游离氨基酸和短肽。实验结果表明:用 Alcalase 可以使酪蛋白溶液的水解度
达到 16%以上。自然水解并用 TNBS(三硝基苯磺酸)法检测酪蛋白水解度可以减少碱
的引入,从而大幅度降低 CPP 产品中的灰份含量。在纳滤时采用截留相对分子质量为
150D 的纳滤膜可以适当的降低 N/P(摩尔比),改善产品质量,而且 N 的回收率在 80%
以上,大部分 P 可以收回。用该工艺制得的 CPP 产品与 DMV 公司 CPP 产品在 CPP 含
量(两者都在 20%以上)和灰分含量(5.7%-6.0%)上很接近,N/P(摩尔比)有一
定的差别,DMV 公司 CPP 产品的 N/P(摩尔比)为 32.2,而本实验室制备所得 CPP 的
N/P(摩尔比)在 24-28 之间,因此,在质量上优于 DMV 公司的 CPP 产品。
对上述工艺得到的 CPP 和其他不同级别的 CPP 促进钙吸收的体外功能性质进行了
比较。测定了 CPP 的结合钙量、阻止磷酸钙沉淀的效果以及 CPP 和柠檬酸的协同作用。
研究结果表明:(1) CPP 的结合钙量随温度的升高而减小,随 pH 的升高而增加;(2)
CPP 阻止磷酸钙沉淀的能力随温度的下降而升高,随钙磷比的增加和 N/P(摩尔比)的
升高而下降;(3)CPP 也能阻止亚铁离子在碱性条件下的沉淀;(4)100℃加热半小时
不影响 CPP 阻止磷酸钙沉淀的能力;(5)CPP 和柠檬酸之间存在协同作用。
用 Sephadex G-15 柱层析法分析纳滤透过液,结果表明纳滤能滤去部分小分子的短
肽和游离氨基酸。纳滤前 CPP 的平均相对分子质量约为 660.76Da,纳滤后 CPP 的平均
相对分子质量为 1150.85Da。纳滤后 CPP 的 HPLC 图谱上相对分子质量在 240Da 的峰较
纳滤前有大幅度的降低,说明纳滤能滤去相当部分的小分子肽和游离氨基酸。用
Sephadex G-25 柱层析对纳滤后 CPP 进行初步的分离纯化,结果表明有活性 CPP 的相对
分子质量较大。
用乙醇提取工艺生产中 N/P(摩尔比)CPP。乙醇提取工艺所得 CPP 的 N/P(摩尔
比)在 19-24 之间,确定了提取法所用乙醇浓度为 85%,提取所用乙醇体积与提取前
CPP 的质量比(v/g)为 10:1,提取后 CPP 的 N 得率为 74.55%,P 得率为 98.37%。提
取后 CPP 产品的灰份含量较低,为 6.79%。乙醇提取工艺可以应用于中 N/P(摩尔比)
CPP 的工业化生产。另外,用乙醇提取法能得到灰份含量很低的 NPP 产品(4.42%)。
【关键词】：
【学位授予单位】：江南大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2004【分类号】：TS201【目录】：
ABSTRACT8-10
第一章 绪论10-18
1.1 功能性食品添加剂-酪蛋白磷酸肽的开发和利用10-16
1.1.1 简介10-11
1.1.2 酪蛋白磷酸肽(CPP)的研究历史与现状11-13
1.1.2.1 对 CPP 阻止磷酸钙沉淀的研究情况12
1.1.2.2 对 CPP 阻止铁沉淀的研究情况12
1.1.2.3 对 CPP 防止龋齿功能的研究12
1.1.2.4 关于 CPP 其他功能的研究12-13
1.1.2.4.1 CPP 的抗原性和免疫性12-13
1.1.2.4.2 促进精子进入卵细胞和体外受精细胞融合13
1.1.3 CPP 作用机理13-14
1.1.4 CPP 生产工艺14-16
1.1.4.1 乙醇钙沉淀法14
1.1.4.2 离子交换法14-15
1.1.4.3 膜分离法15-16
1.1.4.4 等电点电泳法16
1.1.5 CPP 的安全性16
1.2 立题意义16-17
1.3 本课题研究的主要内容17-18
第二章 高 N/P(摩尔比)酪蛋白磷酸肽(CPP)新生产工艺18-32
2.1 引言18
2.2 材料和仪器18-19
2.3 实验方法19-22
2.3.1 高 N/P(摩尔比)CPP 生产工艺路线19
2.3.2 分析与测定方法19-22
2.3.2.1 灰份的测定19
2.3.2.2 水分含量的测定19
2.3.2.3 水解度的测定19-20
2.3.2.3.1 TNBS 法19-20
2.3.2.3.2 pH-stat 法20
2.3.2.4 总氮的测定20
2.3.2.5 总磷的测定20-21
2.3.2.6 N/P(摩尔比)的计算21
2.3.2.7 CPP 含量测定21
2.3.2.8 CPP 生产工艺过程中 N、P 得率的计算21-22
2.3.2.8.1 离心过程中 N、P 得率的计算21-22
2.3.2.8.2 纳滤过程中 N、P 得率的计算22
2.4 实验结果与讨论22-30
2.4.1 酶以及酪蛋白水解度控制方法的选择22-24
2.4.1.1 ALCALASE 取代胰蛋白酶水解酪蛋白22-23
2.4.1.2 酪蛋白水解进程控制方法一代替酪蛋白水解进程控制方法二23-24
2.4.2 纳滤工艺参数以及膜大小的选择24-27
2.4.2.1 操作压力对通量的影响25
2.4.2.2 纳滤温度对通量的影响25-26
2.4.2.3 纳滤时间对纳滤通量的影响26-27
2.4.2.4 纳滤膜平均截留相对分子质量的选择27
2.4.3 不同工艺路线所得 CPP 产品成分以及得率分析27-30
2.4.3.1 不同工艺路线所得 CPP 产品成分分析27-29
2.4.3.2 CPP 生产工艺过程中的 N、P 得率分析29-30
2.4.4 纳滤技术对酪蛋白溶液脱盐30
2.5 本章小结30-32
第三章 高 N/P(摩尔比)CPP 产品的功能性质及其影响因素32-41
3.1 引言32
3.2 实验器材32
3.3 实验方法及步骤32-33
3.3.1 分析和测定方法32
3.3.2 各种 CPP 产品结合钙能力的测定32-33
3.3.2.1 CPP 产品游离钙的测定32-33
3.3.2.1.1 钙标准曲线绘制32-33
3.3.2.1.2 游离钙的测定33
3.3.3 CPP 阻止磷酸钙沉淀形成效果的定性测定33
3.3.4 CPP 阻止亚铁离子沉淀的效果的定性测定33
3.3.5 食品加工条件对 CPP 功能性质的影响实验33
3.3.5.1 加工过程中温度对 CPP 阻止磷酸钙沉淀效果的影响33
3.3.6 柠檬酸对 CPP 阻止磷酸钙沉淀效果的协同作用33
3.4 结果与讨论33-39
3.4.1 CPP 产品的成分分析33-34
3.4.2 不同 CPP 产品结合钙的能力与产品 N/P(摩尔比)之间的关系34-35
3.4.2.1 钙标准曲线34
3.4.2.2 结合钙的测定34-35
3.4.3 不同级别 CPP 产品阻止磷酸钙沉淀形成的效果35-36
3.4.4 CPP 阻止亚铁离子沉淀的效果36-37
3.4.5 食品加工条件对 CPP 功能性质的影响37
3.4.5.1 加工温度对 CPP 阻止磷酸钙沉淀效果的影响37
3.4.6 柠檬酸对 CPP 阻止磷酸钙沉淀形成效果的协同作用37-39
3.4.6.1 单独加入不同浓度的 CPP2 阻止磷酸钙沉淀效果分析37-38
3.4.6.2 单独加入不同浓度的柠檬酸阻止磷酸钙沉淀效果分析38-39
3.4.6.3 加入不同浓度的柠檬酸和 CPP2 阻止磷酸钙沉淀效果39
3.5 本章小结39-41
第四章 高 N/P(摩尔比)CPP 产品平均相对分子质量及分离纯化41-50
4.1 引言41
4.2 实验材料与仪器41-42
4.3 实验方法42-43
4.3.1 工艺实验以及产品成分分析42
4.3.2 透过液中氨基酸和肽的相对分子质量分布测定42
4.3.3 纳滤前后 CPP 产品相对分子质量分布的测定42-43
4.3.4 用 Sephadex G-25 对纳滤后 CPP 进行初步分离纯化43
4.3.5 CPP 经 S ephadex-G25 柱层析分离所得峰 1 阻止磷酸钙沉淀效果的测定43
4.4 结果与讨论43-48
4.4.1 新生产工艺所得 CPP 产品主要成分分析43
4.4.2 透过液相对分子质量分布的测定43-44
4.4.3 纳滤前后 CPP 产品相对分子质量分布的测定44-47
4.4.4 用 Sephadex G-25 柱层析对纳滤后 CPP 进行初步分离纯化47-48
4.4.5 CPP 经 Sephadex G-25 分离后所得峰 1 阻止磷酸钙沉淀效果测定48
4.4.5.1 不同 CPP 的 N/P(摩尔比)分析48
4.4.5.2 不同 CPP 阻止磷酸钙沉淀效果48
4.5 本章小结48-50
第五章 中 N/P(摩尔比)CPP 生产工艺研究50-54
5.1 引言50
5.2 实验材料与仪器50-51
5.2.1 材料与试剂50
5.2.2 仪器与设备50-51
5.3 实验方法51
5.4 结果与讨论51-53
5.4.1 乙醇提取工艺生产中 N/P(摩尔比)CPP51-52
5.4.1.1 提取用乙醇浓度(酒精度)的选择51-52
5.4.1.2 提取所用乙醇体积与提取前 CPP 的质量比(v/g)的选择52
5.4.1.3 从乙醇提取工艺过程中 P 的损失率角度评价该工艺的可行性52
5.4.2 放大实验52-53
5.5 本章结论53-54
主要结论54-56
参考文献56-62
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京公网安备74号酪蛋白磷酸肽促进人体钙吸收的作用研究--《食品科学》2002年04期
酪蛋白磷酸肽促进人体钙吸收的作用研究
【摘要】：报道了酪蛋白磷酸肽（ＣＰＰ）对人体钙吸收的影响。人体实验结果表明：实验组口服含ＣＰＰ的钙片后，２４ｈ尿钙均值达７６５．８＋２３４．２ｍｇ，比相应对照组的６３９．８＋２５３．８ｍｇ尿钙浓度提高近１９．７％。二者差异显著（Ｐ＜０．０５）。说明酪蛋白磷酸肽能显著促进人体胃肠道对食用钙的吸收。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R151【正文快照】：
钙质对各年龄组的人群都具有非常重要的营养作用。。］。据１９９２年全国营养调查结果显示，我国人民日常膳食中以钙的缺乏最为明显，平均每日摄人量仅为中国营养学会推荐的每日膳食中元素钙供给量的５０％。‘。随着生活水平的提高，人们对补钙食品及钙制剂的需求也日益增
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