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南方农业学报 Joumal ofSouthem Agriculture ):
ISSN ; CODEN NNXAAB
DOI: 10.3969/j : issn..6
基于AMEL:基因位点差异的水牛性别
PCR鉴别方法
李婷婷l气左二伟 l ，2，李孟琪l气谢龙l ，2，杨欢1 ，2，卢鼠盛 1 ，2，陆阳清l气
许惠艳1，气2 ，李永国 3飞，陆之泽3飞，杨小淦l3\ 卢克焕 1 ，2
e 广西大学广西高校动物繁殖与生物技术重点实验室'南宁 5刃30∞00仍5: 2亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
武鸣县水产畜牧兽医技术推广站，南宁 530100)
摘要: [目的]建立检测不同性别水牛染色体AMEL基因位点差异的PCR鉴别方法，为水牛早期胚胎性别鉴定及
水牛分离精子重分析提供简便可靠的检验手段。[方法]采用PCR扩增不同性别水牛染色体中的AMEL基因， Clone
Manager 9.0软件分析序列差异，BLASTn程序分析基因同源性，MEGA 6.06软件构建系统发育进化树。[结果]以水
牛血液基因组DNA为模板、amelBl为引物，引物退火温度60 &C，公水牛可扩增出两条清晰条带，长度分别为376
(AMEL-X基因)和304 bp(AMEL-V基因);母水牛仅扩增出 l条清晰条带，长度为376 bp( AMEL-X基因)。与AMEL-X
基因相比，水牛AMEL-Y基因缺失 155-226区域的72 bp ，同时存在20个基因型多态位点。临床检测结果证实，基于
AMEL基因的PCR鉴别结果与实际d性别的吻合率达100% , amelB 1 引物的灵敏度为0.5 ng模板量。 BLASTnt~对分析
结果显示，水牛AMEL-X和AMEL-Y基因与不同哺乳动物的对应序列存在高度保守性，其相似性均接近或高于
90%，与牛存在最近的亲缘关系。[结论 ]AMEL基因在哺乳动物中高度保守，且在不同性别水牛中呈多态性特征，以
其作为分子靶标建立的水牛性别PCR鉴定方法切实可行，为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供了
一个更便捷、高效的检验手段。
关键词:水牛 ; AMEL基因;位点差异; PCR; 性别鉴定
中图分类号: S823.83 文献标志码 :A 文章编号 :15)08一 1516-06
Sex identification of buffalos based on difference in
AMEL gene loci by using PCR technique
LI Ting-ting 1气 ZUO Er-wei 1,2, LI Meng-qi 1气 XIE 1ρng 1气 YANGHuan 1气 LU
Sheng-sheng 1气 LU Yang-qingl气 XU Hui-yan 1气 LI Y ong-guo3, LU Zhi-ze3,
Y ANG Xiao-gan
, LU Ke-huan
e Guangxi High Education Laboratory for Animal Reproduction and Biotechnology , Guangxi University , Nanning 530005 ,
C 2State Key Laboratory ofSubtropical Bio-resources Conservation and Utilization , Nanning 530005 , C
Husbandry Extension Station ofWuming County , Nanning 530100, China)
Abstract: [Objective ]The present experiment was conducted to establish PCR -based method for identifying di旺er-
ences in amelogenin (AMEL) gene loci of chromosome between female buffalo and male buffalo , in order to provide a
simple and reliable detection method for sex identification of early embryos and purity reanalysis of sorted semen.
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在法汉-汉法词典中发现10个解释错误，并通过审核，将获赠《法语助手》授权一个
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<div id="correct" title="在法汉-汉法词典中发现10个解释错误，并通过审核，将获赠《法语助手》授权一个">有奖纠错
西班牙人名是指在实行的个人称谓，由（简单或复合的）加上两个——第一个姓是父亲的姓，第二个姓是母亲的姓。在西班牙，根据性别平等法，这种传统的命名顺序是可逆的。
西班牙人没有的概念。以下面的姓名为例：
Juan Pablo Fernández de Calderón García-Iglesias
其中，Juan Pablo为名字，但Pablo不是中名，而只是复合名Juan Pablo的一部分。姓氏也可以是复合的，通常以de或连字号连接。所以，Fernández de Calderón 是父亲姓氏，而García-Iglesias 则为母亲姓氏。一般来说，人们会称呼他为Se?or Calderón（即Calderón先生），而不是Se?or Iglesias (Iglesias先生)，因为Calderón才是他的父亲姓氏。
不过，有时也会使用母亲姓氏作称呼。例如，José Luis Rodríguez Zapatero（在年大选中被选为首相）通常被称为Zapatero，即他的母亲姓氏，因为其父亲姓氏（即Rodríguez）太过普遍。又如哥伦比亚作家Gabriel García Márquez被英文媒体称为Se?or Márquez，正确应为Se?or García Márquez或Se?or García。
为配合英文人名的习惯，有时西班牙人会将其姓氏加上连字号，以免混淆。所以有Mr. José Antonio Calderón-Iglesias的写法。
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