用放大100倍的显微镜看玻片能看到64个细胞,那用400倍的能看到多少呢能不能给我讲讲哦?_百度作业帮
用放大100倍的显微镜看玻片能看到64个细胞,那用400倍的能看到多少呢能不能给我讲讲哦?
用放大100倍的显微镜看玻片能看到64个细胞,那用400倍的能看到多少呢能不能给我讲讲哦?
4个,因为显微镜放大的是细胞的长度和宽度,所以细胞的长和宽放大4倍,面积放大了16倍,所以只看到以前的1/16,所以是4个
16个，因为细胞被放大了4倍，所占的空间就被放大了4倍，在视野没有变化的情况下看到的细胞就减小到原来的1/4。徕卡显微镜：全内反射荧光显微镜（TIRF）
&&发布者：admin&
全内反射荧光（TIRF）是一种特殊的技术，在20世纪80年代初在安阿伯市密歇根大学的丹尼尔&阿克塞尔罗德在荧光显微镜。全内反射荧光显微镜提供的图像具有出色的高轴向分辨率低于100纳米。这允许与膜相关的过程的观察。
全内反射荧光显微镜
它允许靠近的玻璃/水（或玻璃/试样）接口的荧光分子成像。这是通过采用的渐逝波通过交付的弧光灯，发光二极管（LED）或激光的光激发的荧光基团，而不是直接照明。如果入射的光被全反射的两个具有不同折射率的透明介质的界面处发生的渐逝场。在生物应用中的入射光通常是激光和接口的玻璃盖玻片，盖玻片和贴壁细胞的膜之间的水溶液。
随着能量的渐逝场到界面的距离呈指数下降，只有在一定的接近盖玻片的荧光基团被激发。这允许创建的图像具有出色的信号噪声比，其余的细胞的荧光团几乎兴奋。此外，全内反射荧光显微镜提供的极高的轴向分辨率低于100纳米的图像。这使得观察膜相关的过程，如细胞粘附，激素结合，分子运输和胞吐（如神经递质的释放和吸收）和内吞过程。
图&1：TIRF显微镜的原理
全内反射和渐逝场
每当光遇到两个具有不同折射率的透明介质的接口，这将是部分衍射和部分地反射。的入射角一定的角度，即所谓的临界角，将被完全反射的光，这种现象被称为发生全内反射。如果光从更高的折射率（n）的（如玻璃皿中，n&=&1.52），在培养基中具有较低的折射率（例如，水性介质中，n&=&1.33）中的培养基中，才能观察到全内反射。的入射光，在发生全内反射的临界角（&T&&C），可以由斯涅耳定律：
n1和n2是试样的折射率和盖玻片。
在发生全内反射，一部分的入射光的能量将被转换成一个电磁场，并通过接口形成的界面处的渐逝波。新兴的倏逝波具有相同的频率为入射光和其振幅呈指数衰减的穿透深度。因此，内的倏逝波的激发的荧光团与光子的相互作用，但与电磁场的相互作用。在此字段中的穿透深度范围通常在60?100纳米，但可以去到200nm。它依赖于光的入射角，波长和两种介质的折射率（例如玻璃盖玻片和试样）的角度。增加导致减少的穿透深度和较高的波长的入射光的光的入射的角度，导致增加的穿透深度。背后的接口的介质的折射率（例如，试样）的穿透深度的影响也有更高的折射率增加的倏逝波的穿透深度。还应当指出，在TIRF显微镜高功率的激光，这是比通常采用的激光共聚焦系统中，是用来形成有足够能量的倏逝波强。
物镜的全内反射荧光显微镜
在光学实现全内反射的方法有两种：一种是基于棱镜和其他基于物镜。基于棱镜的全内反射荧光显微镜，棱镜连接到盖玻片的表面，该表面定向聚焦光束或激光朝向的盖玻片/介质界面。随着棱镜的帮助下，穿透光的角度被调整到临界角。
现代全内反射荧光显微镜系统通常是基于物镜的。的光，通常激光的光被定向到的标本，也收集所发射的荧光通过物镜。它是强制性的全内反射荧光显微镜的物镜具有一个非常高的数值孔径（NA）（&&1.45&NA），它允许的入射角大于临界角的。物镜的数值孔径（NA）越高，未能穿透深度越低的渐逝场的光的入射的角度，可以更加平坦。的棱镜型方法相比，物镜的方法是更方便的使用试样以及访问，能够容易地改变激光光的入射的角度。通过放置在激光光斑的物镜的后焦面的不同区域中，用户可以选择的激光的入射的角度，并因此而改变的倏逝波的穿透深度。在基于棱镜的全内反射荧光显微镜系统的棱镜强烈限制了访问的试样，难以例如变介质，添加药物或进行生理测量。
此外，对应的激光，并使用不同的角度入射在棱镜系统要复杂得多。此外，激光TIRF系统基于棱镜中出现的安全问题克服物镜为基础的系统。棱镜为基础的系统中，同时激光更多或更少的公开引导到棱镜物镜为基础的系统中，激光被直接耦合到显微镜本身和退出的物镜在一个非常定义的方式。
全内反射在生物设置
正如上文所述，全内反射荧光显微镜的物镜具有高数值孔径（&&1.45&NA），这只能通过使用浸油或其他特殊的液浸介质实现。在典型的生物设置，用于生产的瞬逝波的激光的光，有通过的物镜，液浸介质中和要在盖玻片/水（例如，水林格的溶液，PBS或其他成像缓冲液）界面反射的盖玻片。为了避免反射和偏转的影响，浸没介质的折射率尽可能接近的盖玻片（通常为N&=&1.52）。对于标准的浸泡油的折射率为n&=&1.515&-&1.518在20&C&当然，浸没介质的折射率是温度依赖的。尽可能多的实验，特别是在活细胞成像，在37℃下进行，由温度引起的变化的折射率的液浸介质可能发生。要纠正这些变化，很多都配备了全内反射荧光显微镜物镜校正领。
图&2：广角的的布雷斯特癌肿瘤细胞表达GFP标记的细胞粘附分子在细胞膜上表达的CD44的荧光图像。
图&3：同样的细胞在TIRF成像。礼貌：玛丽亚&蒙托亚博士，CNIO，西班牙国家癌症中心，马德里，西班牙
在一个生物的设置中，会发生全反射的接口，在该接口通常是玻璃盖玻片之间，其中n&=&1.52在盖玻片和细胞组（n&=&1.33）之间的小的薄膜的水性介质中。渐逝场，然后通过该水溶液膜，直径为约7.5&nm和转移到细胞质的细胞下降为零，在一定的穿透深度取决于激光光的入射的角度的质膜。在一些景点细胞直接坚持盖玻片和盖玻片的细胞（例如，细胞粘着斑）之间没有水溶液中可以找到。在这种情况下，盖玻片和细胞之间的界面全内反射的地方。细胞有不同的折射率（约每组1.38）比水溶液，这些斑点，可能是不可见的，当系统设置的盖玻片/水溶液界面。根据斯涅耳定律，发生全反射的临界角取决于介质的折射率，因此的盖玻片/细胞界面的盖玻片/水溶液的接口不一样的。此问题是可以克服的，通过改变激光光的入射的角度。
渐逝场的性质，因为它是在呈指数下降，只在约60-100纳米的范围内（根据设定）的盖玻片/水溶液界面（或细胞本身）的荧光团被激发。这提供了一个轴向分辨率通常为60-100纳米（z平面），使观察，它们位于或关闭到质膜不被淹没由位于细胞的其余部分中的荧光基团发出的荧光的荧光基团。被激发的荧光团仅在一个&切片&的细胞渐逝场的事实，导致具有很好的信号&-&噪声比，几乎没有任何背景荧光外的聚焦平面制作图像。
图&4：广角图像的微管蛋白表达CFP
图&5：微管蛋白CFP&TIRF图像。礼貌：德国马尔堡大学&雅各教授，的临床细胞生物学和细胞病理学系，马尔堡当前位置：
＞＞＞显微镜中看到的物像是实物的______（倒或正）像，而且比装片上的实..
显微镜中看到的物像是实物的______（倒或正）像，而且比装片上的实物大的多．当把上面刻有“b”字母的载玻片放在显微镜下观察时，视野中看到的图象应是______．
题型：解答题难度：中档来源：不详
显微镜成倒立的像．“倒立”不是相反，是旋转180度后得到的像．即上下相反、左右相反．“b”旋转180度后得到的是“d”．因此，显微镜中看到的物像是实物的倒像，而且比装片上的实物大的多．当把上面刻有“b”字母的载玻片放在显微镜下观察时，视野中看到的图象应是“d”．故答案为：倒；d．
马上分享给同学
据魔方格专家权威分析，试题“显微镜中看到的物像是实物的______（倒或正）像，而且比装片上的实..”主要考查你对&&显微镜的构造和使用&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
现在没空？点击收藏，以后再看。
因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
显微镜的构造和使用
显微镜的成像原理:光线→反光镜→遮光器→通光孔→透明标本→物镜(放大成倒立实像）→镜筒→目镜（放大成虚像）→眼特别提示：显微镜最重要的部分是物镜和目镜，观察标本时，必须使目镜，物镜，通光孔，光圈在一条直线上。显微镜的使用：1. 取镜和安放取镜时右手握住镜臂，左手平托镜座，保持镜体直立，不可歪斜。安放时，动作要轻，一般放在实验台左侧，距实验台边缘7理米左右处。安装物镜或目镜时，镜筒向前，镜臂朝向操作者。用毛巾擦拭机械部分，用擦镜纸擦拭光学部分。 2. 对光①转动粗准焦螺旋(逆时针)，使镜筒上升。 ②转动转换器：使低倍物镜对准通光孔(物镜前端与载物台保持2厘米距离)。 ③转动遮光器：把一个较大的光圈对准通光孔。 ④转动反光镜：左眼注视目镜(右眼睁开)，使光线通过通光孔反射到镜筒内，直到看到一个白亮的视野 3. 观察①低倍镜的使用观察任何标本都必须先用低倍镜。 a.放置标本：升高镜筒，把玻片标本放在载物台中央。标本材料正对通光孔的中心，用压片夹压住载玻片的两端。b.调焦：两眼从侧面注视物镜，转动粗准焦螺旋(顺时针)，让镜筒徐徐下降至物镜距玻片2～ 5毫米处。然后用左眼注视目镜．右眼同时睁开(以便绘图)，同时用手反方向(逆时针)转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。如果不够清楚，可用细准焦螺旋调节(不可以在调焦时边观察边使镜筒下降，以免压碎装片和镜头)。 c.低倍镜的观察：所用的目镜放大倍数与物镜放大倍数相乘所得的积即为原物被放大的倍数。如果物像不在视野中央，要慢慢移动到视野中央，再适当进行调节。 ②高倍镜的使用 a.定位目称：先用低倍物镜确定要观察的目标的位置，再将其移至视野中央。转动转换器．把低倍物镜轻轻移开，在原位置小心地换上高倍物镜(操作要卜分仔细，以防镜头碰击玻片)。 b.调焦：正常情况下，当高倍物镜转正之后，在视野中央即可看到模糊的物像，只要沿逆时针方向略微调到细准焦螺旋，即可获得清晰的物像。在换上高倍物镜观察时，视野变小、变暗，要重新调节视野亮度，可通过升高聚光器或利用凹面反光镜来增大。4. 整理将显微镜的外表擦拭干净，把物镜偏向两旁，取下目镜放进镜头盒，反光镜与水平面垂直，将镜筒下降到最低处，把显微镜放回箱内。5. 整理（1）在镜筒下降时，眼髓一定要注视物镜，以防物镜碰到玻片而损伤物镜或将玻片标本压碎更换物镜时血转动转换器．不能用手扳着物镜转动。（2）用显微镜观察时，两只眼睛都要睁开。（3）显微镜下所看到的像是倒立的(上下颠倒、左右相反、放大的虚像)。所以，玻片的移动方向与物像的移动方向相反。例如，物像偏左上方，则应往左上方移动玻片。（4）显微镜下物像的放大倍数等于物镜与目镜的放大倍数的乘积。5. 辨别镜头的放大规格①目镜：直插式，长度和放大倍数成反比，即目镜越长，放大倍数越小。 ②物镜：螺旋式，长度和放大倍数成正比，即物镜越长，放大倍数越大。6. 迅速判断污点位置的方法：污点一般会在目镜、物镜或者玻片标本上。首先转动目镜，如果污点不动，则污点不在目镜上；移动玻片标本，污点也不动，则污点肯定在物镜上；若污点在反光镜上则不会在视野中看到。7. 正确使用准焦螺旋：准焦螺旋有粗细之分。粗准焦螺旋（又称粗调），位于镜臂上方，可以转动，以使镜筒上下移动，转动时镜筒升降的幅度大；细准焦螺旋(又称细调)，位于镜臂的下方，它转动时镜筒升降的幅度小。8. 转动方向和升降方向的关系：顺时针转动准焦螺旋，镜筒下降；反之则上升。 9. 根据需要使用光圈、反光镜以调节视野的亮度①大光圈：光线强，视野亮，光线过弱需要强光时使用。小光圈：光线弱。视野暗，光线过强需要弱光时使用。 ②平面镜：反射的光线较弱，光线过强需要弱光时使用。凹面镜：反射的光线较强，光线过弱需要强光时使用。观察细胞的结构知识梳理:易错点：在显微镜的使用中，对光操作上的差错：在对光前应先使低倍目镜、物镜、通光孔、光圈在一条直线上，根据环境中光线的强弱正确选择光圈的大小和反光镜的平面或凹面。对好光后，通过目镜可看到白亮但不刺眼的视野。
误认为玻片的移动方向与物象的移动方向相同：&& 由于在显微镜下所看到的是一个倒像，且物像和实际物体上下、左右完全颠倒。所以物像和玻片的移动方向一定相反。如果物像偏右，应向右移动玻片；如果要想让物像向右移动，则需向左移动玻片。
误认为显微镜的放大倍数越大，视野中看到的细胞数目越多：显微镜的视野大小是不变的，如果放大倍数增大，视野中看到的细胞体积增大，原来视野边缘的细胞就到了视野之外，细胞数目就一定比原来少了。
发现相似题
与“显微镜中看到的物像是实物的______（倒或正）像，而且比装片上的实..”考查相似的试题有：
18158930708173689123756158606135052您可能感兴趣的
&|&&|&&|&&|&&|&&|&
Copyright & 2003 -
All Rights Reserved 谷瀑环保设备网 版权所有 经营许可证：
邮箱： 服务热线：5,75503 客服：&
营运： 本网站法律顾问：浙江天杭律师事务所
张平安律师}